Penetapan Kadar Air Serbuk Kulit Buah americana Pengaruh Pemberian Jangka Pendek Ekstrak Etanol Kulit Buah americana Terhadap Kadar Albumin Pada Tikus Terinduksi Karbon

etanol mempunyai daya ekstraktif yang tinggi. Pelarut organik selain etanol memiliki potensi toksisitas yang lebih tinggi Saifudin, Rahayu dan Teruna, 2011; Agoes, 2009. Metode yang digunakan dalam pembuatan ekstrak etanol kulit buah P. americana adalah metode maserasi. Maserasi adalah salah satu metode penyarian yang dilakukan dengan cara memasukkan serbuk simplisia ke dalam labu Erlenmeyer 500mL kemudian ditambahkan etanol 70 ditutup dengan aluminium foil dan didiamkan selama 5 hari sambil sesekali digojog setelah itu dilakukan remaserasi selama 2 hari. Metode maserasi bila dibanding dengan metode infudasi dan dekokta yaitu tidak menggunakan pemanasan sehingga kandungan senyawa dalam kulit buah P. americana lebih stabil dan mencegah kerusakan kandungan senyawa akibat pemanasan. Selain itu, zat aktif yang terkandung dalam simplisia tersebut mudah larut dalam cairan penyari. Proses ekstraksi etanol dari serbuk kulit buah P. americana menghasilkan esktrak kental. Hasil yang diperoleh menunjukkan sebanyak 400 g serbuk kering kulit buah P. americana memperoleh persen rendemen sebesar 11,20

C. Penetapan Kadar Air Serbuk Kulit Buah

P. americana

Penetapan kadar air dari kulit buah P. americana memiliki tujuan mengetahui apakah serbuk yang dihasilkan memenuhi salah satu persyaratan serbuk yang baik yaitu kandungan air dalam serbuk kurang dari 10 Direktorat Jendral Pengawasan Obat dan Makanan RI,1995. Pengujian penetapan kadar air memperoleh hasil kadar air rata-rata dari serbuk kulit P. americana 7,1. Dari hasil tersebut dapat disimpulkan bahwa serbuk kulit buah P.americana telah memenuhi syarat serbuk yang baik yang telah ditetapkan.

D. Uji Pendahuluan

1. Penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida

Senyawa yang digunakan sebagai toksin yang akan merusak hati pada penelitian ini yaitu karbon tetraklorida. Alasan dilakukannya penentuan dosis karbon tetraklorida untuk mengetahui pada dosis berapa hepatotoksin karbon tetraklorida dapat menyebabkan kerusakan hati pada tikus, yang ditandai dengan adanya penurunan kadar albumin. Korelasi antara aktivitas ALT dengan kadar albumin yaitu ketika tikus terinduksi hepatotoksin maka aktivitas ALT akan meningkat kemudian diikuti dengan adanya penurunan dari kadar albumin sebanyak 28,57 dari keadaan vehicle control Ahmed et al., 2002 ; Sivakrishnan et al., 2014 ; Mahmud et al., 2012. Penelitian Janakat dan Merie 2002 juga menunjukkan bahwa dosis yang mampu memberikan efek toksik terhadap hati sebesar 2 mLkg BB.

2. Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji

Penentuan waktu pencuplikan darah pada hewan uji dilakukan untuk mengetahui kehepatotoksikan dari karbon tetraklorida dengan dosis 2 mLkg BB mencapai titik maksimal yaitu dengan adanya peningkatan tertinggi aktivitas ALT serum pada rentang waktu 24 jam dan 48 jam. Diambil serum darah tikus pada jam ke-0 lalu diukur aktivitas ALT yang nantinya akan dipakai sebagai pembanding setelah pemberian hepatotoksin. Pencuplikan darah tersebut dilakukan melalui bagian sinus orbitalis mata pada tikus. Hasil aktivitas ALT serum setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mLkg BB dapat dilihat pada tabel I serta gambar 7. Tabel I. Aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2mLkg BB pada selang waktu 0,24 dan 48 jam Selang waktu jam Purata aktivitas ALT ± SEUL 72,3 ± 5,8 24 217,3 ± 2,7 48 90,3 ± 3,7 Keterangan: SE Standard Eror Setelah dianalisis menggunakan Kolmogorov-Smirnov diperoleh distribusi data normal. Selanjutnya dianalisis dengan One Way Anova menunjukkan nilai signifikasi 0,000 0,05. Dengan diperolehnya hasil tersebut maka dinyatakan bahwa ada perbedaan antara ketiga kelompok waktu. Dilakukan uji Scheffe dengan tujuan mengetahui kebermaknaan perbedaan antar kelompok yang tersaji pada tabel II. Tabel II. Hasil uji statistik aktivitas ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mLkg BB pada waktu pencuplikan darah jam ke 0, 24 serta 48 Selang waktu jam ke 24 48 BB TB 24 BB BB 48 TB BB BB = berbeda bermakana p0,05 dan TB= berbeda tidak bermakna p0,05 Berdasarkan data tabel I, pada pencuplikan darah jam ke-24 didapatkan hasil, ada peningkatan aktivitas ALT 2-3 kali dari nilai normal jam ke-0 yaitu 217,3 ± 2,7 UL. Pada tabel II juga memperlihatkan aktivitas ALT pada jam ke-24 memberikan peningkatan yang signifikan serta berbeda bermakna bila dibandingkan dengan jam ke-0 dan 48. Terlihat bahwa pada jam ke-48 aktivitas ALT akan mengalami penurunan sebesar 90,3 ± 3,7 UL, yang berarti pada jam ke-48 aktivitas ALT telah kembali normal, dimana peningkatan aktivitas ALT terjadi pada jam ke-24. Gambar 7. Diagram batang rata-rata aktivitas SGPTALT sel hati tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mLkg BB pada selang waktu 0, 24 dan 48 jam 3. Penentuan dosis ekstrak etanol kulit buah P. americana Penelitian ini menggunakan ekstrak etanol kulit buah P. americana menggunakan tiga peringkat dosis. Penentuan tiga tingkatan dosis ekstrak etanol kulit buah P. americana mengacu pada penelitian Nopitasari 2013 bahwa konsentrasi tertinggi dari ekstrak etanol biji P. americana yang akan menjadi dosis maksimal dari ekstrak etanol kulit buah P. americana. Konsentrasi tertinggi diperoleh sebesar 70 mgmL yang merupakan konsentrasi yang dibuat yang mana pada konsentrasi tersebut ekstrak dapat dengan mudah dikeluarkan serta dimasukkan dari dan ke spuit oral. Dari konsentrasi tertinggi ini maka didapat dosis maksimal dari ekstrak etanol kulit P. americana sebesar 1,40 gkg BB, dan tingkatan dosisnya ditentukan dari setengah serta seperempat dari dosis maksimal yaitu 0,70 dan 0,35 gkg BB.

E. Pengaruh Pemberian Jangka Pendek Ekstrak Etanol Kulit Buah

P. americana Terhadap Kadar Albumin Pada Tikus Terinduksi Karbon

Tetraklorida Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan adanya pengaruh pemberian jangka pendek ekstrak etanol kulit buah P.americana terhadap kadar albumin pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida. Pemberian jangka pendek dalam hal ini yaitu pemberian ekstrak etanol kulit buah P. americana yang dilakukan 6 jam sebelum pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mLkg BB. Tabel III. Pengaruh perlakuan jangka pendek ekstrak etanol kulit buah P. americana berdasarkan kadar albumin pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida dosis 2 mLkg BB Kelompok perlakuan Purata kadar albumin ± SE mgdL Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mLkg BB 2,91 ± 0,07 Kontrol olive oil 2 mLkg BB 3,62 ± 0,06 Kontrol ekstrak etanol kulit P. americana 3,57 ± 0,03 Ekstrak etanol kulit buah P. americana 0,35gkg BB + karbon tetraklorida 2 mLkg BB 3,28 ± 0,05 Ekstrak etanol kulit buah P. americana 0,7 gkg BB + karbon tetraklorida 2 mLkg BB 3,04 ± 0,06 Ekstrak etanol kulit buah P. americana 1,4 gkg BB + karbon tetraklorida 2 mLkg BB 3,30 ± 0,07 Kadar albumin yang didapat lalu dianalisis dengan analisis One Way Anova menunjukkan nilai signifikansi 0,000 0,05 yang menandakan bahwa terdapat perbedaan antar kelompok sehingga dilakukan uji Scheffe dengan tujuan mengetahui kebermaknaan perbedaan antar kelompok. Data tersaji pada tabel III serta gambar 8. Tabel IV. Hasil uji Scheffe kadar albumin tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mLkg BB pada kelompok perlakuan Kelompok perlakuan Kontrol hepatotoksin 2 mLkg BB Kontrol olive oil 2 mLkg BB Kontrol ekstrak etanol kulit P. americana EEPA I 0,35 gkg BB + karbon tetraklorida 2 mLkg BB EEPAII 0,7 gkg BB + karbon tetraklorida 2 mLkg BB EEPA III 1,4 gkg BB + karbon tetraklorida 2 mLkg BB Kontrol hepatotoksin 2 mLkg BB BB BB BB TB BB Kontrol olive oil 2 mLkg BB BB TB BB BB BB Kontrol ekstrak etanol kulit P. americana BB TB TB BB TB EEPA I 0,35 gkg BB + karbon tetraklorida 2 mLkg BB BB BB TB TB TB EEPA II 0,7 gkg BB + karbon tetraklorida 2 mLkg BB TB BB BB TB TB EEPA III 1,4 gkg BB + karbon tetraklorida 2 mLkg BB BB BB TB TB TB Keterangan : BB : berbeda bermakna p0,05 ; TB = Berbeda tidak bermakna p0,05 EEPA Ekstrak etanol kulit buah P. americana Dari analisis statistik yang dilakukan pada kadar albumin memperlihatkan bahwa data yang diperoleh terdistribusi normal. Data yang diperoleh terdistribusi normal maka dilanjutkan dengan analisis One Way Anova menghasilkan nilai signifikansi 0,000 0,05 yang berarti antar kelompok terdapat perbedaan. Diperlukan uji Scheffe untuk melihat kebermaknaan perbedaan antar kelompok, disajikan pada tabel IV. Gambar 8. Diagram batang rata-rata pengaruh perlakuan jangka pendek pemberian ekstrak etanol kulit buah

P. americana terhadap hepatotoksisitas karbon tetraklorida dilihat dari kadar albumin nya