d. Dipipet 40 µl ekstrak temulawak ke dalam organ bath sehingga konsentrasi
ekstrak dalam organ bath didapat 0,04 e.
Dipipet 50 µl ekstrak temulawak ke dalam organ bath sehingga konsentrasi ekstrak dalam organ bath didapat 0,05
f. Dipipet 60 µl ekstrak temulawak ke dalam organ bath sehingga konsentrasi
ekstrak dalam organ bath didapat 0,06 g.
Dipipet 70 µl ekstrak temulawak ke dalam organ bath sehingga konsentrasi ekstrak dalam organ bath didapat 0,07
h. Dipipet 80 µl ekstrak temulawak ke dalam organ bath sehingga konsentrasi
ekstrak dalam organ bath didapat 0,08 i.
Dipipet 90 µl ekstrak temulawak ke dalam organ bath sehingga konsentrasi ekstrak dalam organ bath didapat 0,09
j. Dipipet 100 µ l ekstrak temulawak ke dalam organ bath sehingga konsentrasi
ekstrak dalam organ bath didapat 0,1
3.8.2 Pembuatan Larutan Tirode
Larutan buffer fisiologis yang digunakan adalah larutan tirode. Untuk
membuat 1 liter larutan tirode ditimbang Anomin, 2010:
NaCl : 8,00 gram
KCl : 0,2 gram
MgSO
4
.7H
2
O : 0,214 gram
NaH
2
PO
4.
2H
2
O : 0,05 gram
NaHCO
3
: 1,00 gram Glukosa
: 2,00 gram CaCl
2
: 0,2 gram
Universitas Sumatera Utara
NaHCO
3
1,00 gram dilarutkan dengan sebagian air suling sampai larut, sehingga didapat larutan natrium bikarbonat. Bahan yang lain NaCl, KCl,
MgSO
.
7H
2
O, NaH
2
PO
4
dilarutkan terpisah dengan air suling sampai larut, kemudian ditambahkan larutan natrium bikarbonat. CaCl
2
dan glukosa ditambahkan terakhir setelah semua bahan tercampur.
Setelah semua bahan tercampur, larutan di earasi dengan karbogen O
2
95, CO
2
5 agar tidak terjadi pengendapan garam kalsium yang ditandai dengan kekeruhan. Selanjutnya larutan diatur pada pH 7,4. Larutan tirode dapat
bertahan selama 24 jam. Untuk mencegah tumbuhnya mikroba, larutan tirode yang digunakan lebih dari 24 jam disimpan pada suhu 4-10
o
C.
3.8.3 Penyiapan Larutan Asetilkolin
Dalam penelitian ini asetilkolin klorida digunakan sebagai agonis kolinergik. Senyawa ini dapat menyebabkan kontraksi otot polos pada usus halus.
Dibuat larutan induk dengan cara melarutkan asetilkolin ke dalam aqua destilata sehingga didapat konsentrasi 2x10
-1
M. Kemudian dibuat larutan yang lebih encer sampai kadar 2x10
-6
M dengan faktor pengenceran 5 kali. a.
Pembuatan larutan baku asetilkolin klorida Timbang seksama asetilkolin klorida BM 181,60 gmol seberat 181,60 mg
kemudian dilarutkan dalam 5,0 ml aquadest. Diperoleh larutan asetilkolin klorida 2x10
-1
M. b.
Pembuatan seri konsentrasi asetilkolin klorida 1.
Asetilkolin klorida 2 x 10
-2
M Dipipet 300 µL larutan baku asetilkolin 2x10
-1
M. masukkan kedalam tabung reaksi, tambahkan 2700 µL aquadest. Vortex selama 3 menit.
Universitas Sumatera Utara
2. Asetilkolin klorida 2 x 10
-3
Dipipet 300 µL larutan baku asetilkolin 2x10
-2
M. masukkan kedalam tabung reaksi, tambahkan 2700 µL aquadest. Vortex selama 3 menit.
3. Asetilkolin klorida 2 x 10
-4
Dipipet 300 µL larutan baku asetilkolin 2x10
-3
M. masukkan kedalam tabung reaksi, tambahkan 2700 µL aquadest. Vortex selama 3 menit.
4. Asetilkolin klorida 2 x 10
-5
Dipipet 300 µL larutan baku asetilkolin 2x10
-4
M. masukkan kedalam tabung reaksi, tambahkan 2700 µL aquadest. Vortex selama 3 menit.
5. Asetilkolin klorida 2 x 10
-6
Dipipet 300 µL larutan baku asetilkolin 2x10
-5
M. masukkan kedalam tabung reaksi, tambahkan 2700 µL aquadest. Vortex selama 3 menit.
3.8.4 Penyiapan Larutan Atropin Sulfat
