15
III. METODOLOGI PENELITIAN
2.4 BAHAN DAN ALAT
Bahan-bahan yang digunakan untuk preparasi media fermentasi semi padat adalah limbah pertanian berupa kulit durian, kulit jeruk Siam, kulit jeruk Medan, dan daun teh tua. Limbah
pertanian yang digunakan untuk penelitian ini berasal dari beberapa sumber. Kulit durian didapat dari satu pedagang produk es durian di daerah Dramaga Bogor, kulit jeruk Siam dan jeruk
Medan didapat dari satu penjual buah di daerah Senen Jakarta Pusat, sedangkan daun teh tua diperoleh dari satu perkebunan teh di daerah Puncak, Jawa Barat. Bahan-bahan yang digunakan
untuk pembuatan media pertumbuhan dan peremajaan Aspergillus ustus adalah biakan Aspergillus ustus
yang diperoleh dari koleksi Laboratorium Biokatalis dan Fermentasi, Bidang Bioproses, Pusat Penelitian Bioteknologi, LIPI Cibinong, purified agar, pektin komersial Sigma, bahan-
bahan mineral seperti NH
4 2
HPO
4
, KH
2
PO
4
, K
2
HPO
4
, dan MGSO
4
.7H
2
O, HCl 10, NaOH, air destilata, dan alkohol 70. Bahan-bahan yang digunakan untuk produksi enzim pektinase adalah
substrat media fermentasi semi padat berupa tepung limbah pertanian berukuran 500 mesh, NaNO
3
, KCl, MGSO
4
.7H
2
O, FeSO
4
.7H
2
O, K
2
HPO
4
, yeast extract, sukrosa, buffer fosfat pH 6 0.1 M, dan air destilata. Bahan-bahan yang digunakan untuk analisis produk adalah semua jenis
substrat media fermentasi semi padat yang digunakan dalam penelitian ini, DNS Sigma, enzim pektinase kasar hasil produksi enzim pada penelitian ini, pektin komersial Sigma, HCl 10 pH
2.5, NaOH 1 M, alkohol 96, dan air destilata. Alat-alat yang digunakan untuk preparasi media fermentasi semi padat adalah penggiling,
oven, ayakan ukuran 500 mesh, dan wadah penampung dan penyimpan hasil gilingan. Alat-alat yang digunakan untuk pembuatan media pertumbuhan dan peremajaan Aspergillus ustus adalah
cawan petri steril, tabung reaksi steril, rak tabung reaksi, ose steril, bunsen, laminar, dan plastik wrap
. Alat-alat yang digunakan untuk produksi enzim pektinase adalah Erlenmeyer 100 mL, kapas, alumunium foil, magnetic stirrer, inkubator 30, 40, dan 50
o
C, dan pemanas hot plate. Alat-alat yang digunakan untuk analisis produk adalah microtube eppendorf, pipet mikro,
sentifuse, labu bulat, refluks, timer atau stopwatch, tabung reaksi, rak tabung reaksi, vortex, kuvet, spektrofotometer uv-vis Hitachi U-3900H. Alat tambahan untuk proses sterilisasi adalah
autoclave Tomy High-Pressure steam Sterilizer ES-315.
2.5 METODE PENELITIAN
