Hipotesa Penelitian yang Relevan

natrium karbonat selama 15 menit setelah itu dibilas dengan aquades. Sedangkan untuk sterilisasi media dapat dilakukan menggunakan autoklaf selama 10 menit. Untuk alat yang tidak tahan panas dapat dilakukan sterilisasi menggunakan alkohol atau pembakaran di atas api bunsen Jutono dkk, 1980. b. Pembuatan Ekstrak Daun Keji Beling Dalam pengambilan sampel tidak diperlukan penanganan khusus karena bahan yang digunakan hanya daun yang sudah tua berwarna hijau tua. Daun Keji Beling dipetik satu persatu secara manual dan dicuci bersih menggunakan air mengalir kemudian dipisahkan antara daun yang baik dan yang rusak. Kriteria baik adalah daun segar, daun berwarna hijau tua pada bagian atas permukaan dan berwarna hijau muda pada bagian bawah permukaan dan tidak terdapat bercak, Sedangkan kriteria rusak adalah daun layu, terdapat bercak pada bagian permukaan daun dan diserang hama. Daun Keji Beling dengan kriteria baik disterilkan secara kimia. Sterilisasi dilakukan dengan melarutkan 10 ml Natrium hipoklorit dalam 3 liter aquades dan merendam daun selama 15 menit, kemudian dibilas dengan menggunakan aquades. Ekstrak Keji Beling diperoleh dengan melakukan metode ekstraksi dimana sampel ditimbang, untuk pembuatan ekstrak 10 digunakan daun Keji Beling sebanyak 3,5 gr yang ditambahkan aqudes sebanyak 35 ml. Sedangkan konsentrasi 25 digunakan daun Keji Beling sebanyak 5 gr yang ditambahkan aquades sebanyak 12,5 ml. Konsentrasi 50 daun Keji Beling yang digunakan sebanyak 6 gr yang ditambahkan aquades sebanyak 12 ml. Untuk konsentrasi 75 daun Keji Beling dibutuhkan sebanyak 9 gr yang ditambahkan 13,5 ml, dan konsentrasi terakhir yaitu 100 digunakan daun Keji Beling sebanyak 10 gr yang ditambahkan aquades sebanyak 10 ml. Permukaan daun diperkecil dengan cara dipotong menjadi kecil secara manual menggunakan tangan dan direbus dengan aquades steril dalam erlenmeyer hingga mendidih. Pembuatan stok ekstrak yang digunakan untuk penelitian dapat dilihat dalam tabel di bawah ini: Tabel 3.1 Pembuatan Ekstrak Daun yang Digunakan Untuk Stok Konsentrasi Ekstrak Konsentrasi Daun Keji Beling gr Aquades ml 10 3,5 35 25 5 12,5 50 6 12 75 9 13,5 100 10 10