Menurut ICH, dalam menguji linearitas setidaknya menggunakan 5 tingkat konsentrasi dan linearitas tercapai ketika nilai koefisien relasi r ≥ 0,9985.
Slope dari persamaan kurva baku akan memberikan gambaran tentang sensitivitas
Chan, dkk., 2004. Dalam penelitian ini untuk mencari regresi linear digunakan working solution. Working solution
merupakan larutan yang dipreparasi dari larutan stok yang kemudian diencerkan dengan pelarut yang sesuai dan membuat
konsentrasi yang diinginkan.
1. Kurva baku ekstrak metanol kelopak bunga rosella dalam metanol
Tujuan pembuatan kurva baku ekstrak metanol kelopak bunga rosella dalam metanol yaitu untuk menghitung jumlah ekstrak metanol kelopak bunga
rosella dalam sediaan multiemulsi pada kompartemen donor, kompartemen akseptor, dan yang tertahan di dalam kulit. Enam seri konsentrasi baku esktrak
rosella dibuat dengan cara melarutkan esktrak rosella menggunakan metanol p.a kemudian diukur menggunakan spektrofotometri UV-VIS derivatif.
Selanjutnya konsentrasi seri larutan baku ekstrak metanol kelopak bunga rosella diplotkan terhadap tinggi derivatif spektrum derivat menggunakan
aplikasi Powerfit v.6.05 yang dikeluarkan oleh Universiteit Utrecht Faculteit Scheikund
.
Gambar 27. Kurva baku ekstrak metanol kelopak bunga rosella dalam metanol
0.1 0.2
0.3 0.4
0.00 0.10
0.20 0.30
ti n
ggi d
e r
iv at
c m
konsentrasi mgml
Berdasarkan gambar 27 didapatkan persamaan kurva baku y = 1,32798x
– 0,02313 dengan nilai koefisien relasi r = 0,997. Dilihat dari nilai r yang didapat sudah memenuhi persyaratan yang ditetapkan oleh ICH yaitu
sekurang-kurangnya 5 konsentrasi dan hasil koefisien relasi yang didapatkan sebesar 0,997 menunjukan 99,7 perubahan tinggi derivat dipengaruhi oleh
perubahan konsentrasi analit ekstrak metanol kelopak bunga rosella. Hal ini menunjukkan hasil uji linearitas memenuhi syarat yang ditentukan oleh ICH
dimana konsentrasi berbanding linear terhadap respon uji tinggi derivat. Berdasarkan persamaan kurva baku, dapat dihitung nilai LOD dan LOQ untuk
mengetahui konsentrasi analit terendah dalam sampel yang dapat dideteksi. LOD merupakan konsentrasi atau jumlah analit yang berbeda signifikan dari
blanko dan dapat dideteksi oleh instrumen. LOQ merupakan kadar terkecil dari sampel yang masih bisa dikuantifikasi.
Berdasarkan data persamaan kurva baku yang diperoleh dari Powerfit v.6.05, didapatkan nila Sa = 4,97043x10
-2
. Apabila nilai Sa dimasukkan ke dalam rumus LOD dan LOQ maka didapatkan nilai LOD sebesar 0,1235
mgmL dan nilai LOQ sebesar 0,3743mgmL. Nilai slope dari persamaan kurva baku yaitu 1,32798.
2. Kurva baku ekstrak metanol kelopak bunga rosella dalam aquadest
