berkelamin dua, terletak di ujung cabang, bertangkai silindris, panjang 8-15 cm, kelopak hijau, mahkota halus, benang sari silindris berwarna putih kekuningan,
putih lonjong, dan coklat muda. Buah berwarna hijau, berbentuk bulat telur, dan buni. Biji berbentuk bulat, berwarna putih, dan mempunyai diameter 1 cm.
Tanaman mimba mempunyai akar tunggang yang berwarna coklat Hutapea, 1993.
B. Protein
Protein adalah suatu polipeptida yang mempunyai bobot molekul yang sangat bervariasi, dari 5000 hingga lebih dari satu juta. Di samping berat molekul
yang berbeda-beda, protein mempunyai sifat yang berbeda-beda pula. Ada protein yang mudah larut dalam air, tetapi ada juga yang sukar larut dalam air Poedjiadi,
1994. Fraksinasi protein dilakukan dengan memisahkan masing–masing
protein dalam campuran secara fraksi demi fraksi. Ada dua macam cara yang biasa digunakan dalam proses fraksinasi yakni dengan jalan pengendapan dan
kromatografi. Fraksinasi protein dengan jalan pengendapan dapat dilakukan dengan menggunakan amonium sulfat dalam konsentrasi tertentu Poedjiadi,
1994. Keuntungan fraksinasi menggunakan amonium sulfat adalah lebih efektif
dari garam kation yang lain, selain itu harganya lebih murah dan ada manfaat yang lebih besar lagi yaitu dapat menstabilkan protein yang dimurnikan. Pada
konsentrasi garam yang tinggi dapat mencegah terjadinya proteolisis dan juga mencegah pertumbuhan bakteri. Selain itu, amonium sulfat bersifat inert, tidak
bereaksi dengan protein yang dipisahkan. Namun kelemahannya, amonium sulfat biasanya terkontaminasi oleh logam berat seperti besi, sehingga dapat
mengganggu proses pengendapan. Jumlah amonium sulfat yang ditambahkan untuk mencapai kejenuhan yang diinginkan dapat ditentukan dengan rumus yang
mudah Scopes, 1994. Beberapa metode tersedia untuk determinasi protein, antara lain:
1 metode Spektrofotometri
Sebagian besar protein memiliki absorbansi maksimal pada panjang gelombang 280 nm karena adanya residu asam amino tirosin dan triptofan.
Keuntungan metode ini yaitu sensitifitasnya tinggi dan tidak membutuhkan reagen. Komponen yang mengandung cincin purin dan pirimidin akan menyerap
UV pada panjang gelombang 260 nm. Dengan demikian keberadaan beberapa komponen tersebut akan mengganggu pengukuran absorbansi protein pada
panjang gelombang 280 nm. Oleh karena itu untuk pengukuran protein dilakukan pada panjang gelombang 260 nm dan 280 untuk mengoreksi adanya komponen-
komponen tersebut Kerese, 1984. 2
metode Biuret Prinsip dari metode biuret adalah mencampur larutan yang
mengandung protein dengan basa kuat kemudian direaksikan dengan larutan CuSO
4
yang sangat encer, sehingga menghasilkan warna violet kemerahan sampai biru violet. Warna yang dihasilkan merupakan senyawa kompleks yang dihasilkan
karena reaksi antara Cu
2+
dengan 4 atom N. Dua atom N yang berdekatan dari satu rantai peptida dengan 2 atom N yang berdekatan dari rantai peptida yang lain
berikatan dengan Cu
2+
sehingga membentuk kompleks warna biru violet, dimana semakin lama warna yang terbentuk akan semakin pekat tua. Reaksi ini tidak
dapat terjadi pada dipeptida dan asam amino bebas kecuali serin dan treonin. Range protein yang dapat dianalisis menggunakan merode biuret yaitu 0,2 sampai
2 mg. 3
metode Lowry Prinsip dari metode Lowry adalah mencampur larutan yang
mengandung protein dengan basa kuat kemudian direaksikan dengan larutan CuSO
4
yang sangat encer, sehingga menghasilkan warna violet kemerahan sampai biru violet. Warna yang dihasilkan merupakan senyawa kompleks yang dihasilkan
karena reaksi antara Cu
2+
dengan 4 atom N. Dua atom N yang berdekatan dari satu rantai peptida dengan 2 atom N yang berdekatan dari rantai peptida yang lain
berikatan dengan Cu
2+
sehingga membentuk kompleks warna biru violet. Kemudian terjadi reduksi reagen fosfomolibdat- fosfotungstat reagen Folin-
Ciocalteau oleh tirosin, triptofan, dan sistein. 4
metode “Dye- Binding” Interaksi antara reagen Coomassie Brilliant Blue G250 dengan protein
memberikan perubahan warna yang teramati, sehingga kadar protein dapat ditetapkan dengan mengukur absorbansinya pada panjang gelombang 595 nm
Alexander, 1985. PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
