Pengukuran Kadar Protein dengan Spektrofotometri UV

N N N N S N CH 3 CH 3 NH N N N S N CH 3 CH 3 NADH NAD + MTT Formazan Br Gambar 4. Reaksi Pembentukan Kristal Formazan Kristal formazan ini bersifat tidak larut air. Penambahan detergen natrium dodesil sulfat 10 yang terdapat dalam stopper reagent, akan menyebabkan kristal formazan larut. Intensitas warna ungu yang terbentuk dapat dibaca dengan ELISA reader. Jumlah sel hidup berbanding lurus dengan intensitas warna dari formazan yang terbentuk. Gambar 5. Kristal Formazan di Bawah Mikroskop Metode MTT ini termasuk metode yang cukup akurat karena absorbansi yang terbaca sebanding dengan jumlah sel hidup yang masih aktif melakukan metabolisme. Selain itu, uji ini juga dirasa cukup aman, sederhana, dan cepat. Aman karena tidak memerlukan penggunaan zat-zat yang berbahaya, sederhana karena perlakuan yang harus diberikan pada sampel sebelum diuji relatif cukup PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI mudah, dan cepat karena waktu yang dibutuhkan cukup singkat sehingga sangat memungkinkan untuk menguji sampel dalam jumlah yang cukup banyak. Data yang diperoleh dari uji toksisitas dengan metode MTT adalah nilai absorbansi yang selanjutnya diolah dengan menggunakan modifikasi rumus Abbot sehingga menghasilkan persentase kematian sel pada masing-masing fraksi protein daun mimba. Konsentrasi protein yang digunakan pada masing-masing fraksi yaitu 0,20 μgml; 0,40 μgml; 0,80 μgml; 1,56 μgml; 3,13 μgml; 6,25 μgml; 12,50 μgml; 25,00 μgml; 50,00 μgml; 100,00 μgml; 200,00 μgml. Tabel II. Hasil uji sitotoksisitas fraksi protein terhadap sel SiHa Rata-rata Persen Kematian Sel Konsentrasi fraksi protein daun mimba µgml FP 30 FP 40 FP 50 FP 60 200 100,3524 89,4948 91,6026 93,4068 100 94,9453 87,2656 77,8533 86,2066 50 87,5533 83,1611 69,9389 82,9847 25 69,0966 70,7520 56,9781 67,7531 12,5 62,5116 57,3574 56,1108 56,0422 6,25 61,6398 54,3724 53,7256 51,6436 3,125 74,4667 58,8021 56,1502 52,1012 1,5625 57,4012 53,5687 54,1001 49,8506 0,78125 57,8000 56,3050 53,2328 50,8312 0,390625 55,0825 56,8695 52,7006 52,3254 0,1953125 45,6687 51,8657 47,7922 52,9791