BAB 4 METODE PENELITIAN
4.1. RANCANGAN PENELITIAN
Penelitian ini dilakukan dengan menggunakan studi Cross Sectional analitik untuk mengukur kadar FGF-2 serum pada penderita meningioma intrakranial, dilanjutkan dengan
analisa hubungan antara kadar FGF-2 serum dengan derajat histopatologi WHO.
4.2. LOKASI DAN WAKTU PENELITIAN
Penelitian dilakukan di Rumah Sakit H. Adam Malik Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera Utara, Medan. Pengambilan sampel dilakukan di ruang rawat pasien
dan diolah oleh SMF Patologi Klinik RS. H. Adam Malik Medan. Penelitian dilakukan mulai bulan April 2013 hingga April 2014.
4.3. POPULASI DAN SAMPEL PENELITIAN 4.3.1. Populasi Penelitian
Semua pasien yang menderita meningioma intrakranial yang datang ke RS. H. Adam Malik Medan.
4.3.2. Sampel Penelitian 4.3.2.1. Kriteria Inklusi
Kriteria inklusi dari penelitian ini :
1. Pasien yang telah terdiagnosis secara klinis menderita meningioma intrakranial pada
berbagai lokasi intrakranial. 2.
Pasien yang telah dilakukan pemeriksaan MRI kepala dengan kontras gadolinium intravena.
3. Pasien yang telah dilakukan operasi sehingga terdapat jaringan tumor yang dapat
dikonfirmasi sebagai meningioma oleh bagian Patologi Anatomi. 4.
Diagnosis telah ditegakkan dengan hasil pemeriksaan Patologi Anatomi.
Universitas Sumatera Utara
4.3.2.2. Kriteria Eksklusi
Kriteria eksklusi dari penelitian ini :
1. Kejadian berulang rekurensi atau kekambuhan residif, data tentang hal ini diambil
dari rekam medis pasien. 2.
Pasien yang mengalami ruda paksa, diketahui dengan cara pemeriksaan fisik dan rekam medis.
3. Pasien yang memiliki tumor lain pada bagian tubuhnya, data ini diambil dari rekam
medis.
4.3.3. Estimasi Besar Sampel
Pada penelitian ini digunakan total sampling, dimana seluruh penderita meningioma intrakranial yang memenuhi kriteria inklusi akan menjadi sampel.
4.4. METODE PENGUMPULAN DATA 4.4.1. Persetujuan Setelah Penjelasan
Semua subjek penelitian akan diminta persetujuan dari keluarga pasien setelah dilakukan penjelasan mengenai kondisi pasien dan tindakan yang akan dilakukan.
4.4.2. Etika Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan dengan menggunakan sampel biologis tersimpan untuk sampel yang diambil sebelum dilakukannya penelitian dan sediaan darah yang diambil dari
pasien yang masuk ke dalam kriteria inklusi, yang selama pelaksanaannya tidak bertentangan dengan nilai-nilai kemanusiaan dan kode etik penelitian biomedik. Izin didapat dari Komisi
Etika Penelitian Fakultas Kedokteran USU.
4.4.3. Pengumpulan Data
Data pasien dikumpulkan setelah pasien terdiagnosa dengan sangkaan suatu meningioma, data diambil dengan suatu wawancara klinis dengan fokus terhadap pertanyaan-
pertanyaan dari formulir yang akan diisi. Data kemudian dikumpulkan dan diberikan kode khusus dan ditabulasikan ke dalam perangkat lunak pengolah data.
Universitas Sumatera Utara
4.4.4. Pengumpulan dan Penyimpanan Sampel Darah
Setelah pasien dan atau keluarganya menyetujui pengambilan data dan telah menandatangani formulir persetujuan setelah pemberitahuan, sampel darah akan diambil dari
vena mediana cubiti dengan menggunakan alat suntik steril ukuran 10 cc sesuai dengan prosedur phlebotomi yang telah baku. Darah diambil sebanyak sekitar 5 cc. Setelah sampel
darah diambil, sampel tersebut segera dikode sesuai urutannya, dan diserahkan kepada instalasi Patologi Klinis untuk diproses menjadi serum. Setelah sampel mengalami
penggumpalan, sampel kemudian akan disentrifuge dengan kekuatan 2.500 rpm selama 15 menit, dan supernatan dipindahkan ke dalam tabung aliquot dan kemudian disimpan dalam
lemari es bersuhu -25
o
C.
4.4.5. Pengolahan Sampel Darah
Serum yang tersimpan akan dicairkan pada suhu ruangan selama sekitar 5 menit dan akan dilakukan pemeriksaan assay FGF. Pemeriksaan tersebut adalah suatu pemeriksaan
kuantitatif dengan menggunakan teknik sandwich Enzyme Linked Immunosorbent Assay ELISA. Sebuah antibodi monoklonal spesifik terhadap FGF telah dilekatkan pada sumur-
sumur dalam microplate. Standar atau sampel kemudian ditambahkan ke dalam sumur microplate dan diinkubasi. Jika dijumpai bFGF pada sampel, akan berikatan dan
diimmobilisasi oleh antibody pre-coated dalam sumur. Kemudian sumur microplate dicuci untuk menghilangkan bFGF yang tidak berikatan dan komponen – komponen lain dari
sampel. Agar kadar bFGF dalam sampel dapat dihitung secara kuantitatif, sebuah sedian standar horseradish peroxidase HRP-conjugated polyclonal antibody specific untuk bFGF
ditambahkan ke dalam sumur untuk menjadikan “sandwich” bFGF yang telah diimmobilisasi selama inkubasi pertama. Kemudian microtiter plate diinkubasikan kedua kalinya. Sumur –
sumur tersebut kemudian dicuci kembali untuk membuang semua HRP-conjugated antibodies yang tidak berikatan, dan ditambahkan substrat TMB 3,3’5,5’ tetramethyl-
benzidine ke masing – masing sumut tadi. Enzim HRP dan substrat akan bereaksi dalam waktu inkubasi yang singkat. Hanya sumur – sumur yang mengandung bFGF dan enzyme-
conjugated antibody akan mengalami perubahan warna. Reaksi ini diakhiri dengan penambahan larutan asam sulfur dan perubahan warna yang terjadi diukur menggunakan
spectrophotometer dengan panjang gelombang 450 nm ± 2 nm.
4.5. METODE ANALISIS DATA
Universitas Sumatera Utara
Data yang didapat akan diolah dengan menggunakan menggunakan perangkat lunak pengolah data. Variabel kategorik dianalisis dalam bentuk frekuensi dan persentase yang
disajikan baik dalam bentuk tabel maupun grafik. Analisis deskriptif variabel numerik dilakukan pemusatan mean, median dan penyebaran standar deviasi, minimum-
maksimum. Jika sebaran data normal, digunakan pasangan mean dan standar deviasi. Jika sebaran data tidak normal, digunakan median dengan minimum-maksimum.
Untuk menguji adanya hubungan antara nilai FGF-2 serum dengan derajat histopatologi WHO, ditentukan terlebih dahulu nilai signifikansi secara statistik apakah
memiliki kurva normal atau tidak normal dengan menggunakan Kolmogorof-Smirrnov atau Shapiro-Wilk tergantung jumlah sampel. Jika memiliki sebaran normal akan dilanjutkan
analisis dengan menggunakan metode Pearson dan jika memiliki sebaran tidak normal, korelasi dinilai dengan Spearman’s correlation test. Nilai P
≤0,05 dipertimbangkan suatu hubungan signifikan.
Universitas Sumatera Utara
BAB 5 HASIL PENELITIAN
5.1. KARAKTERISTIK SAMPEL
Sampel pada penelitian ini diambil dari bulan April 2013 hingga April 2014. Didapatkan sampel sebanyak 52 spesimen yang berasal dari penderita meningioma
intrakranial yang telah menjalani operasi pengangkatan tumor di RSUP. H. Adam Malik Medan. Setelah didapat jaringan tumor maka diagnosa dipastikan dengan pemeriksaan
histopatologi. Terhadap penderita tersebut dilakukan pengambilan serum darah kemudian dilakukan pengukuran kadar FGF-2. Hasil lengkap data penderita dapat dilihat pada
lampiran.
5.1.1. Jenis Kelamin
Setelah dilakukan pendataan dan analisis distribusi frekuensi, didapatkan sampel berjenis kelamin perempuan lebih banyak dibandingkan dengan sampel laki-laki, dimana
sampel perempuan 38 orang 73,1 dan laki-laki 14 orang 26,9.
Tabel 5.1. Distribusi Frekuensi Jenis Kelamin Jenis Kelamin
n
Laki-Laki 14
26,9 Perempuan
38 73,1
Total 52
100,0
5.1.2. Umur
Setelah dilakukan analisis deskriptif terhadap umur didapati bahwa mean adalah 44,5 ± 13,8 tahun dengan nilai minimal 24 tahun dan maksimal 89 tahun. Nilai median adalah 42,5
tahun. Terhadap sampel dilakukan klasifikasi umur berdasarkan dekade kehidupan kejadian
meningioma intrakranial, didapat data frekuensi kejadian terbanyak pada kelompok umur 30 – 39 tahun, 40 – 49 tahun dan 60-69 tahun, dengan masing-masing sebanyak 15 penderita
28,8, 13 penderita 25, 13 penderita 25.
Tabel 5.2. Distribusi Frekuensi Umur Usia
Nilai
Mean 44,5
Universitas Sumatera Utara
Kategori