bahan disimpan di ruang pemeliharaan kultur yang telah aseptik dengan cara disemprot setiap hari dengan menggunakan alkohol 70. Suhu ruangan tetap
dijaga berkisar 25 C±2
C dengan pengaturan AC.
3.4.2. Pembuatan Media
Media yang digunakan adalah media MS Lampiran 7 halaman 38 yang diberi perlakuan tanpa penambahan 2,4-D untuk perlakuan A
, dengan penambahan 2,4-D sebanyak 325 µM untuk perlakuan A
1
, 400 µM untuk perlakuan A
2
, 475 µM untuk perlakuan A
3
. Tanpa penambahan BAP untuk perlakuan B ,
dengan penambahan BAP sebanyak 25 µM untuk perlakuan B
1
, 50 µM untuk perlakuan B
2
, 75 µM untuk perlakuan B
3
. Tahap awal pembuatan media adalah pembuatan larutan stok terlebih dahulu yaitu hara makro, mikro, iron, dan
vitamin. Unsur-unsur lain ditimbang sesuai kebutuhan seperti sukrosa dan agar. Pembuatan media sebanyak 1000 ml.
Unsur-unsur hara makro, mikro, iron, vitamin, sukrosa, ZPT dimasukkan ke dalam gelas piala dan ditambah dengan akuades sehingga volume menjadi
1000 ml. Pada media tersebut ditambahkan arang aktif 3 mgl kemudian ZPT 2,4-D dan BAP sesuai dengan perlakuan. Keasaman media diukur dengan
menggunakan pH meter sekitar 5,8. Untuk mendapatkan keasaman yang diharapkan, ditambah dengan HCl 0,1 N atau NaOH 0,1 N. Ke dalam media
dimasukkan agar, lalu dipanaskan hingga larutan menjadi bening. Larutan tersebut dituang ke dalam botol kultur lalu ditutup dengan aluminium foil dan plastik
kemudian diikat dengan karet. Media diautoklaf pada suhu 121 C dengan tekanan
15 psi selama 10 menit, media disimpan di ruang kultur lebih kurang selama 1 minggu sebelum digunakan.
3.4.3. Sterilisasi Eksplan
Eksplan berupa bunga betina kelapa sawit dibersihkan dengan air mengalir hingga bersih. Selanjutnya eksplan direndam dalam larutan fungisida 2 gl dan dishaker
pada 100 rpm selama 30 menit. Eksplan dibilas dengan akuades steril, dan direndam dalam larutan antibiotik. Eksplan dibilas dengan akuades, lalu
dimasukkan dalam larutan pemutih 10 selama 10 menit lalu dibilas 3 kali
Universitas Sumatera Utara
dengan akuades steril. Kemudian eksplan direndam kembali dengan larutan HgCl
2
1 gl selama 15 menit lalu dibilas 3 kali dengan akuades steril. Eksplan dikeringkan di atas kertas saring steril dalam cawan petri.
3.4.4. Penanaman Eksplan