Penetapan Kadar Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat Dalam Sediaan Tablet Secara Spektrofotometri Ultraviolet Dengan Metode Panjang Gelombang Berganda

Lampiran 1. Gambar Sediaan Tablet

Lampiran 2. Daftar Spesifikasi Sediaan tablet Ocuson® 1. Ocuson® (Sanbe)

No. Reg : DKL9722221010A1 Expire Date : September 2016

Komposisi : Betametason…………... 0,25 mg Dexchlorpheniramin maleate……... 2 mg

Lampiran 3. Gambar Alat

Gambar 2. Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu 1800)

Gambar 3. Sonikator (Branson 1510)

Lampiran 4. Bagan Alir Prosedur Penelitian 1. Pembuatan Larutan Induk Baku Betametason

diukur serapan maksimum pada

λ 200-400 nm Baku Betametason

LIB I Betametason 1000 μg/mL

Betametason 11,0 μg/mL

λ Betametason= 239 nm LIB II Betametason 500 μg/mL

ditimbang sebanyak 50 mg

dimasukkan kedalam labu tentukur 50 mL dilarutkan dan dicukupkan dengan

metanol p.a

dipipet 0,55 mL

dimasukkan kedalam labu tentukur 25 mL dilarutkan dan dicukupkan dengan

metanol p.a dipipet 12,5 mL

dimasukkan kedalam labu tentukur 25 mL dilarutkan dan dicukupkan dengan

Lampiran 4. (Lanjutan)

2. Pembuatan Larutan Induk Baku Deksklorfeniramin Maleat

dipipet 12,5 mL dipipet 12,5 mL

dimasukkan kedalam labu tentukur 25Ml dilarutkan dan dicukupkan dengan

metanol p.a

dipipet 1,05 mL

dimasukkan kedalam labu tentukur 25 mL dilarutkan dan dicukupkan dengan

metanol p.a

diukur serapan maksimum pada

λ 200-400 nm Baku Deksklorfeniramin Maleat

LIB I Deksklorfeniramin Maleat 1000 μg/mL

LIB II Deksklorfeniramin Maleat 500 μg/mL

Deksklorfeniramin Maleat 21,0 μg/mL

λ Deksklorfeniramin maleat = 259 nm

ditimbang sebanyak 50 mg

dimasukkan kedalam labu tentukur 50 mL dilarutkan dan dicukupkan dengan metanol p.a

Lampiran 4. (Lanjutan)

3. Pembuatan Larutan Standar Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat

Larutan standar Betametason 5,0; 8,0; 11,0; 14,0; 17,0; 20,0; dan 23,0 μg/mL

diambil 0,25; 0,4; 0,55; 0,7; 0,85; 1 dan 1,15 mL

dilarutkan dan dicukupkan ke dalam labu tentukur 25 mL dengan

pelarut metanol p.a LIB II Betametason 500 μg/mL

Larutanstandar Deksklorfeniramin maleat 10,0; 16,0; 21,0; 26,0; 31,0; 35,0 dan 40 μg/mL

diambil 0,5; 0,8; 1; 1,3; 1,55; 1,75 dan 2 mL

dilarutkan dan dicukupkan ke dalam labu tentukur 25 mL dengan pelarut metanol p.a

Lampiran 4. (Lanjutan)

4. Penentuan Panjang Gelombang Analisis Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason

Betametason 5,0 μg/mL Deksklorfeniramin

Maleat 40,0 μg/mL

diukur serapan dari masing-masing

deksklorfeniramin maleat dan betametason panjang gelombang 200 - 400 nm

ditumpang tindihkan

ditentukan 5 titik panjang gelombang analisis

diambil panjang gelombang dari spektrum serapan komponen mulai memberikan serapan sampai hampir tidak memberikan serapan.

Lampiran 4. (Lanjutan)

4. Penentuan kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason dalam campuran Timbang 10 mg deksklorfeniramin maleat dan betametason

dalam campuran

Larutkan 10 mg deksklorfeniramin maleat dan betametason dalam 10 mL metanol p.a

Dari masing – masing larutan, ambil 0,4 mL dari larutan deksklorfeniramin maleat dan 0,2 mL dari larutan

betametason

Campur kedua larutan ad metanol p.a sampai 10 mL

Larutan diukur pada 5 panjang gelombang penelitian

Lakukan pengulangan sebanyak 6 kali

Lampiran 4. (Lanjutan)

5. Penentuan Kadar Sediaan Tablet

ditimbang

digerus dalam lumpang sampai halus dan homogen

ditimbang setara 4,5 mg deksklorfeniramin maleat dihitung kesetaraan betametason yang terkandung didalamnya (penimbangan dilakukan sebanyak 6

kali pengulangan)

dimasukkan kedalam labu tentukur 50 mL

ditambahkan dengan metanol p.a sampai garis tanda sambil dikocok

dihomogenkan dengan sonikator selama 15 menit disaring

dibuang ± 10 mL filtrat pertama dan filtrat selanjutnya ditampung

dipipet 4,4 mL

dimasukkan kedalam labu tentukur 10 mL

dicukupkan dengan metanol p.a sampai gari tanda dipipet lagi 2 mL

dimasukkan kedalam labu tentukur 10 mL

dicukupkan dengan metanol p.a sampai garis tanda

dihitung Nilai Absorbansi

Kadar 20 tablet

Serbuk

Lampiran 5. Perhitungan kadar teoritis deksklorfeniramin maleat dan betametason

Pengulangan 1

Kadar deksklorfeniramin maleat :

V1 x C1 = V2 x C2 0,4 x 1000 = 10 x C2 X = 40 μg/mL V2 x C2 = V3 x C3 2 x 40 = 10 x C3 X = 8,0 μg/mL Kadar betametason :

V1 x C1 = V2 x C2 0,2 x 1020 = 10 x C2 X = 20,4 μg/mL V2 x C2 = V3 x C3 2 x 20,4 = 10 x C3 X = 4,08 μg/mL Pengulangan 2

Kadar deksklorfeniramin maleat :

V1 x C1 = V2 x C2 0,4 x 1010 = 10 x C2 X = 40,4 μg/mL V2 x C2 = V3 x C3 2 x 40,8 = 10 x C3 X = 8,08 μg/mL Kadar betametason :

V1 x C1 = V2 x C2 0,2 x 1040 = 10 x C2 X = 20,8 μg/mL V2 x C2 = V3 x C3 2 x 20,8 = 10 x C3 X = 4,16 μg/mL

Pengulangan 3

Kadar deksklorfeniramin maleat :

V1 x C1 = V2 x C2 0,4 x 1020 = 10 x C2 X = 40,8 μg/mL V2 x C2 = V3 x C3 2 x 40,8 = 10 x C3 X = 8,16 μg/mL Kadar betametason :

V1 x C1 = V2 x C2 0,2 x 1020 = 10 x C2 X = 20,4 μg/mL V2 x C2 = V3 x C3 2 x 20,4 = 10 x C3 X = 4,08 μg/mL Pengulangan 4

Kadar deksklorfeniramin maleat :

V1 x C1 = V2 x C2 0,4 x 1010 = 10 x C2 X = 40,4 μg/mL V2 x C2 = V3 x C3 2 x 40,8 = 10 x C3 X = 8,08 μg/mL Kadar betametason :

V1 x C1 = V2 x C2 0,2 x 1000 = 10 x C2 X = 20 μg/mL V2 x C2 = V3 x C3 2 x 20 = 10 x C3 X = 4,0 μg/mL

Pengulangan 5

Kadar deksklorfeniramin maleat :

V1 x C1 = V2 x C2 0,4 x 1020 = 10 x C2 X = 40,8 μg/mL V2 x C2 = V3 x C3 2 x 40,8 = 10 x C3 X = 8,16 μg/mL Kadar betametason :

V1 x C1 = V2 x C2 0,2 x 1030 = 10 x C2 X = 20,6 μg/mL V2 x C2 = V3 x C3 2 x 20,6 = 10 x C3 X = 4,12 μg/mL Pengulangan 6

Kadar deksklorfeniramin maleat :

V1 x C1 = V2 x C2 0,4 x 1010 = 10 x C2 X = 40,4 μg/mL V2 x C2 = V3 x C3 2 x 40,8 = 10 x C3 X = 8,08 μg/mL Kadar betametason :

V1 x C1 = V2 x C2 0,2 x 1000 = 10 x C2 X = 20 μg/mL V2 x C2 = V3 x C3 2 x 20 = 10 x C3

Lampiran 6. Data penimbangan baku deksklorfeniramin maleat dan betametason, serta kadar teoritis dari deksklorfeniramin maleat dan betametason

Pengulangan

Penimbangan deksklorfeniramin

maleat (mg)

kadar teoritis deksklorfeniramin

maleat (µg/mL)

Penimbangan betametason

(mg)

Kadar teoris betametason (µg/mL)

1 10 8,00 10,2 4,08

2 10,1 8,08 10,4 4,16

3 10,2 8,16 10,2 4,08

4 10,1 8,08 10,0 4,00

5 10,2 8,16 10,3 4,12

Lampiran 7. Contoh Perhitungan penetapan kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason dalam sampel

Berat 20 tablet = 3,9925 g

Komposisi Tablet : Betametason 0,25 mg

Deksklorfeniramin maleat 2 mg

Ditimbang serbuksetara dengan 4,5 mg deksklorfeniramin maleat, maka jumlah serbuk yang ditimbang adalah :

x1 =

mg 2 x 20 mg 4,5

x 3,9582 g = 0,4491 g

Selanjutnya dari desklorfeniramin maleat dihitung kesetaraan betametason yang terkandung dalam 0,4491 g adalah:

x2 = 0,4491 g x

g 3,9582 mg 0,25 x 20 = 0,5624 mg

Jadi secara teoritis kadarnya betametason dalam analit adalah 0,5624 mg. Dilarutkan dengan metanol dengan kuantitatif dalam labu tentukur 50 mL. Konsentrasi desklorfeniramin maleat =

mL 50

mg 4,5

x 1000 μg = 90 μg/mL

Konsentrasi betametason =

mL 50

mg 0,5624

x 1000 μg = 11,25 μg/mL Kemudian dari larutan filtrat ini, dipipet 4,4 mL dan dimasukkan kedalam labu tentukur 10 mL dan diencerkan dengan metanol p.a hingga garis tanda. Dari larutan ini kita pipet lagi 2 mL dan dimasukkan kedalam labu tentukur 10 mL dan diencerkan dengan metanol p.a hingga garis tanda.

Konsentrasi deksklorfeniramin maleat sampel = mL) (10 mL 4,4 x g/mL 90µ

= 40 μg/mL

= mL) (10 mL 2 x g/mL 40µ

= 8 μg/mL Konsentrasi betametason sampel = mL) (10 mL 4,4 x g/mL 11,25µ

= 5 μg/mL

= mL) (10 mL 2 x g/mL 5µ

= 1 μg/mL

Dari konsentrasi diatas deksklorfeniramin maleat 8 μg/mL dan betametason 1

μg/mL (8:1) untuk menjadikan perbandingan (2:1) maka, di tambahkan baku betametason yang diambil dari LIB III (11,25 μg/mL) yaitu :

Konsentrasi betametason dari LIB III =

mL) (100

2,25 x g/mL

500µ _{= 11,25 μg/mL.}

Dari LIB III dipipet 1,5 mL di masukkan dalam labu tentukur 10 mL Maka volume analisis betametason adalah

= ( betametason awal + betametason yang ditambahkan) = 2 mL+ 1,5 mL = 3,5 mL

Jadi =

mL 10 mL 3,5 x g/mL 11,25µ

Lampiran 8. Data kadar terukur deksklorfeniramin maleat dan betametason Larutan sampel yang telah dibuat kemudian diukur serapannya pada panjang gelombang 219, 229, 239, 249, 259 nm. Data serapan larutan sampel dapat dilihat pada Tabel 14.

Tabel 14. Data serapan larutan sampel

NO Keterangan

Serapan pada panjang gelombang

219 nm 229 nm 239 nm 249 nm 259 nm 1 Pengulangan 1 0,6981 0,3045 0,2579 0,2301 0,2004 2 Pengulangan 2 0,6992 0,3154 0,2756 0,2033 0,1994 3 Pengulangan 3 0,6912 0,3302 0,2542 0,2123 0,1999 4 Pengulangan 4 0,6857 0,3485 0,2516 0,2123 0,1899 5 Pengulangan 5 0,6981 0,3265 0,2776 0,2355 0,1995 6 Pengulangan 6 0,7000 0,3005 0,2516 0,2323 0,2010

Lampiran 9. Spektrum tumpang tindih serapan dari larutan standar deksklorfeniramin maleat dan betametason

Gambar 5. Kurva tumpang tindih serapan betametason dalam berbagai konsentrasi

Gambar 6. Kurva tumpang tindih serapan deksklorfeniramin maleat dalam berbagai konsentrasi

Gambar 7. Tumpang tindih spektrum serapan deksklorfeniramin maleat konsentrasi 40,0 µg/mL dan betametason 5,0 µ g/mL

nm .

200,00 250,00 300,00 350,00 400,00

1,00000

0,80000

0,60000

0,40000

0,20000

Lampiran 10. Spektrum serapan dari larutan baku campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason (pengulangan)

Pengulangan 1

n m .

2 0 0 ,0 0 2 5 0 ,0 0 3 0 0 ,0 0 3 5 0 ,0 0 4 0 0 ,0 0

Ab

s.

2 ,0 0 0 0 0

1 ,5 0 0 0 0

1 ,0 0 0 0 0

0 ,5 0 0 0 0

Pengulangan 5

nm.

200,00 250,00 300,00 350,00 400,00

A

b

s.

2,00000

1,50000

1,00000

0,50000

Lampiran 11. Spektrun serapan dari sampel deksklorfeniramin maleat dan betametason pada sediaan tablet O® (pengulangan)

Pengulangan 1

nm .

200,00 250,00 300,00 350,00 400,00

A

bs.

2,00000

1,50000

1,00000

0,50000

Pengulangan 4

nm.

200,00 250,00 300,00 350,00 400,00

A

b

s.

2,00000

1,50000

1,00000

0,50000

Lampiran 12. Perhitungan operasi matriks kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason

Data serapan tersebut digunakan untuk menghitung kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason dalam sampel melalui operasi matriks sebagai berikut:

pengulangan 1

= x

=

pengulangan 2

= x

=

pengulangan 3

= x

=

-1

-1

pengulangan 4

= x

=

Pengulangan 5

= x

=

Pengulangan 6

= x

=

Keterangan :

C1 : Konsentrasi Deksklorfeniramin Maleat C2 : Konsentrasi Betametason

-1

-1

Lampiran 13. Perhitungan operasi matriks dan % KV deksklorfeniramin maleat dan betametason

Pengulangan 1 Deksklorfeniramin maleat = x 99,70 % = 99,99 %

Betametason = x 102,21 % = 102,07%

Pengulangan 2 Deksklorfeniramin maleat = x 99,70 % = 99,51%

Betametason = x 102,21 % = 100,48%

Pengulangan 3 Deksklorfeniramin maleat = x 99,70 % = 98,49%

Betametason = x 102,21 % = 101,04%

Pengulangan 4 Deksklorfeniramin maleat = x 99,70 % = 99,17 %

Betametason = x 102,21 % = 101,72 %

pengulangan 5 Deksklorfeniramin maleat = x 99,70 % = 98,63 %

Betametason = x 102,21 % = 101,04%

pengulangan 6 Deksklorfeniramin maleat = x 99,70 % = 99,53%

Betametason = x 102,21 % = 101,39 %

Rerata Deksklorfeniramin maleat = 99,22 %

Lampiran 14. Perhitungan statistik deksklorfeniramin maleat pada tablet O®

SD = = =

= 0,4892

Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 6-1 = 5 Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk

= (1 – 0,025); 5 = 0,975; 5 = 2.5706

Dasar penerimaan data jika t hitung≤ t tabeldan t hitung≥ -t tabel.

thitung =

t hitung 1 = = (ditolak)

t hitung 2 = = 1,4521 (diterima)

t hitung 3 = = 1,3520 (diterima)

t hitung 4 = = 0,2503 (diterima)

t hitung 5 = = 2,9544 (ditolak)

No.

X Kadar akurasi

dari hasil matriks(%)

2

1 99,99 0,77 0,5929

2 99,51 0,29 0,0841

3 98,49 0,27 0,0729

4 99,17 -0,05 0,0025

5 98,63 -0,59 0,3481

6 99,53 0,31 0,0961

t hitung 6 = = 1,5523 (diterima)

Data 1 dan 5 ditolak karena nilai t hitung≥ t tabel dan t hitung≤-t tabel , maka data yang

dipakai adalah data 2, 3, 4, dan 6.

No.

(X)

Kadar akurasi dari hasil matriks (%)

X - (X - )2

2. 99,51 0,34 0,1156

3. 98,49 -0,68 0,4624

4. 99,17 0,00 0,000

6. 99,53 0,36 0,1296

= 99,17 Σ(X - )2= 0,7076

SD = = =

= 0,4856

Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = 4-1 = 4-1 = 3 Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk

= (1 – 0,025); 3 = 0,975; 3 = 3,1824

Dasar penerimaan data jika t hitung≤ t tabel

thitung =

t hitung 3 = = 2,8006 (diterima)

t hitung 4 = = 0,0000 (diterima)

t hitung 6 = = 1,4827 (diterima)

Semua data diterima, maka kadar deksklorfeniramin maleat sebenarnya adalah:

μ = ( ± ttabel x ) %

= (99,17±3,1824x )% = (99,17±3,1824 x 0,2428) % = (99,17±0,7727)%

Lampiran 15. Perhitungan Statistik Betametason pada Tablet O®

No.

(X) Kadar akurasi

dari hasil matriks (%)

X - (X - )2

1. 102,07 0,78 0,6084

2. 100,48 -0,81 0,6561

3. 101,04 -0,25 0,0625

4. 101,72 0,43 0,1849

5. 101,04 -0,25 0,0625

6. 101,39 0,10 0,0100

= 101,29 Σ(X - )2 = 1,5844

SD = = =

= 0,5629

Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = n-1 = 6-1 = 5 Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk

= (1 – 0,025); 5 = 0,975; 5 = 2.5706

Dasar penerimaan data jika t hitung≤ t tabeldan t hitung≥ -t tabel.

thitung =

t hitung 1 = = (ditolak)

t hitung 2 = = 3,5248 (ditolak)

t hitung 3 = = 1,0879 (diterima)

t hitung 5 = = 1,0879 (diterima)

t hitung 6 = = 0,4351 (diterima)

Data 1 dan 2 ditolak karena nilai t hitung≥ t tabel dan t hitung≤-t tabel , maka data yang

dipakai adalah data 3, 4, 5 dan 6.

No.

(X) Kadar akurasi

dari hasil matriks (%)

X - (X - )2

3. 101,04 -0,25 0,0625

4. 101,72 0,43 0,1849

5. 101,04 -0,25 0,0625

6. 101,39 0,10 0,0100

= 101,29 Σ(X - )2 = 0,3199

SD = = =

= 0,3265

Uji statistik pada taraf kepercayaan 95% maka nilai α = 0,05 ; dk = 4-1 = 4-1 = 3 Diperoleh ttabel= (1 – ½ α); dk

= (1 – 0,025); 3 = 0,975; 3 = 3,1824

Dasar penerimaan data jika t hitung≤ t tabel

thitung =

t hitung 3 = = (diterima)

t hitung 5 = = 1,5314 (diterima)

t hitung 6 = = 0,6125 (diterima)

Semua data diterima, maka kadar betametason sebenarnya adalah:

μ = ( ± ttabel x ) %

= ( 101,29±3,1824x )% = ( 101,29±3,1824 x 0,1632)% = (101,29±0,5195)%

Lampiran 16. Perhitungan %KV (koefisien variasi) deksklorfeniramin maleat dan betametason

% KV = x 100%

%KV Deksklorfeniramin maleat =

99,17

0,4856 _{X 100% = 0,4896 %}

%KV Betametason =

101,29 0,3265

DAFTAR PUSTAKA

Aisyah. (2015). Optimasi dan Analisisi Kadar Campuran Deksklorfeniramin maleat dan Betametason dengan Metode Spektrofotometri Derivatif. Skripsi. Medan: Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. Halaman 27, 60, dan 89.

Andrianto, Y.C. (2009). Validasi Metode Penetapan Kadar Campuran Parasetamol dan Ibuprofen secara Spektrofotometri UV Dengan Aplikasi Metode Panjang Gelombang Berganda. Skripsi, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Halaman 2, 24, 25, 33, dan 35. Ansel, C.H (1985). Introduction to Pharmaceutical Dosage forms. Fourth Edition.

Penerjemah: Ibrahim, F. (2008). Pengantar Bentuk Sediaan Farmasi Edisi Ke empat. Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia. Halaman 1-2.

Cairns, D. (2008). Essentials of Pharmaceutical Chemistry. Edisi Ketiga. London : Pharmaceutical Press. Halaman 177.

Day, R.A., dan Underwood, A.L. (1998). Quantitative Analysis. Sixth Edition. Penerjemah: Sopyan, I. (2002). Analisa Kimia Kuantitatif Edisi Ke Enam. Jakarta: Penerbit Erlangga. Halaman 413.

Denny, R.C., dan Sinclair, R. (1991). Visible and Ultraviolet Spectroscopy. Analytical Chemistry by Open Learning. Singapore : John Wiley and Sons. Halaman 84-85.

Ditjen POM. (1995). Farmakope Indonesia. Edisi Keempat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 135, 136, 293 dan 1067.

Ditjen BKAK. (2014). Farmakope Indonesia. Edisi Kelima. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 136 dan 1068.

Ermer, J., dan McB. Miller, J.H. (2005). Method Validation in Pharmaceutical Analysis. A Guide to Best Practice. Dalam: E. Joachim. Linearity. Weiheim: Wiley-VCH. Halaman 80 dan 89.

Gandjar, I.G., dan Rohman, A. (2007). Kimia Farmasi Analisis. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Halaman 235-236.

Harkness, R. (1984). Drug interactions. Penerjemah : Agoes, G dan Widianto, M.B. (1989) Interaksi Obat. Bandung: Penerbit ITB. Halaman 9.

Harmita. (2004). Petunjuk Pelaksanaan Validasi Metode dan Cara Perhitungannya. Majalah Ilmu Kefarmasian. 1(3):117-135.

Khopkar, S.M. (1985). Basic Concepts of Analytical Chemistry. Penerjemah: Saptorahardjo, A. (1990). Konsep Dasar Kimia Analitik. Jakarta: Penerbit Universitas Indonesia (UI Press). Halaman 225.

Moffat, A.C., Osselton, M.D., dan Widdop, B. (2004). Clarke’s Analysis of Drugs and Poisons Edisi Ketiga. London : Pharmaceutical Press. Halaman 234 dan 973

Mulja, M., dan Suharman. (1995). Analisis Instrumental. Surabaya : Airlangga University Press. Halaman 26 -41.

Munson, J.W. (1984). Pharmaceutical Analysis: Part B Modern Methods. Penerjemah: Harjana. (1991). Analisis Farmasi Metode Modern. Surabaya: Airlangga University Press. Halaman 335, 369-385.

Mustarichie, R., Levitaa, J., Musfiroha, I. (2014). Spectrophotmetric Validation method of Dexchlorpheniramine maleat and Betamethasone. International Journal of Research and Development in pharmacy and Life Sciences. 3(4): 1096-1105.

Nurhidayati, L. (2007). Spektrofotometri Derivatif dan Aplikasinya dalam Bidang Farmasi. Jurnal ilmu Kefarmasian Indonesia. 5(2): 93 - 99.

Satiadarma, K., Mulja, M., Tjahjono, D.H., Kartasasmita, R.E. (2004). Asas Pengembangan Prosedur Analisis. Edisi Pertama. Surabaya: Airlangga University Press. Halaman 49, 87 - 93.

Sudjana, (2002). Metode Statistika. Bandung: Penerbit Tarsito. Halaman 226 -227.

Tan, H.J., dan Rahardja, K. (2007). Obat-obat Penting Khasiat, Penggunaan dan Efek-Efek Sampingnya. Edisi Keenam. Cetakan Ketiga. Jakarta: PT. Elex Media Komputindo. Halaman 730, 727 dan 819

BAB III

METODE PENELITIAN 3.1Jenis Penelitian

Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental dengan metode spektrofotometri ultraviolet metode panjang gelombang berganda terhadap analisa campuran betametason dan deksklorfeniramin maleat yang terkandung dalam satu sediaan tablet merek dagang.

3.2 Tempat dan Waktu Penelitian

Penelitian ini dilakukan pada bulan Oktober sampai dengan November 2015 di Laboratorium Penelitian Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara. 3.3 Alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah spektrofotometer UV-Visible (dapat dilihat pada Lampiran 3 halaman 49), Personal Computer (PC) yang dilengkapi software UV Probe 2.42 (UV-1800 Shimadzu), sonikator (Branson 1510), neraca analitik (Boeco), kuvet, alat gelas (Oberoi) dan alat-alat lainnya yang diperlukan dalam penyiapan sampel.

3.4 Bahan

Bahan–bahan yang digunakan dalam penelitian adalah metanol p.a, Betametason baku (Kimia Farma Plant Medan) sertifikat pengujian betametason dapat dilihat pada Lampiran 19 halaman 80, Deksklorfeniramin maleat baku (BPFI) sertifikat pengujian deksklorfeniramin maleat dapat dilihat pada Lampiran 20 halaman 81, tablet merek dagang O® (Sanbe).

3.5Pengambilan Sampel

Pengambilan sampel dilakukan secara purposif, yaitu ditentukan atas dasar pertimbangan bahwa sampel yang terambil mempunyai karakteristik yang sama dengan yang diteliti (Sudjana, 2005). Sampel yang digunakan adalah tablet yang mengandung deksklorfeniramin maleat 2 mg dan betametason 0,25 mg. Gambar dan daftar spesifikasi tabletdapat dilihat pada Lampiran 1 dan 2 halaman 47 dan 48.

3.6 Prosedur Penelitian

3.6.1 Pembuatan Larutan Induk Baku

3.6.1.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Betametason

Ditimbang 50 mg betametason, dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL, ditambahkan metanol p.a dikocok hingga larut, lalu dicukupkan sampai garis tanda dengan metanol p.a sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 1000 μg/mL, larutan ini disebut larutan induk baku I (LIB I). Dari larutan ini dipipet 12,5 mL, dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL, diencerkan dengan metanol p.a sampai garis tanda, lalu dikocok sampai homogen sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 50 0 μg/mL (LIB II). Dari larutan ini dipipet 2,25 mL, dimasukkan kedalam labu tentukur 100 mL, diencerkan dengan metanol p.a sampai garis tanda, lalu dikocok sampai homogen sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 11,25 μg/mL (LIB III) (Ditjen POM., 1995).

3.6.1.2Pembuatan Larutan Induk Baku Deksklorfeniramin maleat

Ditimbang 50 mg deksklorfeniramin maleat, dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL, ditambahkan metanol p.a, dikocok hingga larut, lalu dicukupkan sampai garis tanda dengan metanol p.a sehingga diperoleh larutan dengan

konsentrasi 1000 μg/mL, larutan ini disebut larutan induk baku I (LIB I). Dari larutan ini dipipet 12,5 mL, dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL, diencerkan dengan metanol p.a sampai garis tanda, lalu dikocok sampai homogen sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 500 μg/mL (LIB II) (Ditjen POM., 1995).

3.6.2 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum

3.6.2.1 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum Betametason

Dipipet 0,55 mL Larutan Induk Baku II (LIB II) betametason (konsentrasi = 500 μg/mL), dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL, diencerkan dengan metanol p.a hingga garis tanda, lalu dikocok sampai homogen sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 11,0 μg/mL, kemudian diukur serapan pada panjang gelombang 200 – 400 nm. Kurva serapan maksimum betametason dapat dilihat pada Gambar 4.1 halaman 26.

3.6.2.2 Pembuatan Spektrum Serapan Maksimum Deksklorfeniramin maleat Dipipet 1,05 mL Larutan Induk Baku II (LIB II) deksklorfeniramin maleat (konsentrasi = 500 μg/mL), dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL, diencerkan dengan metanol p.a hingga garis tanda, lalu dikocok sampai homogen sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 21 μg/mL, kemudian diukur serapan pada panjang gelombang 200 – 400 nm. Kurva serapan maksimum desklorfeniramin maleat dapat dilihat pada Gambar 4.2 halaman 26.

3.6.3 Pembuatan Larutan Standar

3.6.3.1Pembuatan larutan standar deksklorfeniramin maleat

Dipipet Larutan Induk Baku II deksklorfeniramin maleat (konsentrasi = 500 μg/mL) sebanyak 0,5 mL; 0,8 mL; 1,05 mL; 1,3 mL; 1,55 mL; 1,75 mL; 2 mL. Masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL, diencerkan dengan metanol p.a hingga garis tanda. Lalu dikocok sampai homogen sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 10,0; 16,0; 21,0; 26,0; 31,0; 35,0; dan 40,0 μg/mL. Kemudian diukur pada panjang gelombang 200–400 nm.

3.6.3.2 Pembuatan larutan standar betametason

Dipipet Larutan Induk Baku II betametason (konsentrasi = 500 μg/mL) sebanyak 0,25 mL; 0,4 mL; 0,55 mL; 0,7 mL; dan 0,85 mL; 1 mL; dan 1,15 mL. Masing-masing dimasukkan ke dalam labu tentukur 25 mL, diencerkan dengan metanol p.a hingga garis tanda. Lalu dikocok sampai homogen sehingga diperoleh larutan dengan konsentrasi 5,0; 8,0; 11,0; 14,0; 17,0; 20,0; 23,0 μg/mL. Kemudian diukur pada panjang gelombang 200 – 400 nm.

3.6.4 Panjang Gelombang

Dari seri kadar yang telah diperoleh pada penetapan rentang kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason, masing-masing diambil satu seri kadar yaitu konsentrasi tengah dan dilakukan pengukuran absorbansi kedua larutan pada rentang panjang gelombang 200 - 400 nm, sehingga dapat diketahui masing-masing absorbansi larutan pada berbagai panjang gelombang.

Dibuat spektrum serapan antara panjang gelombang lawan absorbansi. Menentukan 5 panjang gelombang pada daerah tumpang tindih dari kedua spektrum serapan yang diperoleh. Panjang gelombang yang diperoleh digunakan

untuk mengukur absorbansi larutan baku desklorfeniramin maleat dan betametason.

3.6.5 Penentuan harga serapan

Larutan baku deksklorfeniramin maleat dan betametason yang telah dibuat, diukur absorbansinya pada multi panjang gelombang yang telah ditentukan. Harga serapan kedua senyawa ditentukan dengan menggunakan metode regresi linear yang dioperasikan pada data konsentrasi dan absorbansi masing-masing senyawa pada setiap panjang gelombang pengukuran.

Dari persamaan regresi yang diperoleh, y = aX + b , y adalah harga serapan (A), b adalah koefisien regresi yang menunjukkan harga serapan (a), X adalah kadar (mg/100 mL), sedangkan a adalah konstanta.

3.6.6 Penetuan Kadar Baku Campuran Deksklorfeniramin maleat dan Betametason

Ditimbang masing-masing 10 mg deksklorfeniramin maleat dan betametason, masing-masing dimasukkan ke labu tentukur 10 mL, dilarutkan dengan pelarut metanol p.a sampai garis tanda. Kemudian dipipet 0,4 mL dari larutan deksklorfeniramin maleat dan 0,2 mL dari larutan betametason, campur larutan kedalam labu tentukur 10 mL, dan diencerkan dengan pelarut metanol p.a. Dari larutan tersebut dipipet 2 mL dimasukkan ke labu tentukur 10 mL diencerkan dengan pelarut metanol p.a. Diukur serapan dengan panjang gelombang 200-400 nm. Dilakukan sebanyak enam kali pengulangan.

3.6.7 Perhitungan Kadar Deksklorfeniramin maleat-Betametason dalam Campuran

Dua puluh tablet merek dagang yang mengandung betametason 0,25 mg dan deksklorfeniramin maleat 2 mg ditimbang lalu digerus dalam lumpang sampai

halus dan homogen. Serbuk ditimbang setara dengan 4,5 mg deksklorfeniramin maleat dan dihitung kesetaraan betametason yang terkandung didalamnya, penimbangan dilakukan sebanyak enam kali pengulangan. Dimasukkan ke dalam labu tentukur 50 mL dan dicukupkan dengan pelarut metanol p.a sampai garis tanda. Dibantu pelarutannya menggunakan sonikator selama 15 menit, lalu disaring (± 10 mL filtrat pertama dibuang, filtrat selanjutnya ditampung). Kemudian dari larutan filtrat ini, dipipet 4,4 mL, dimasukkan kedalam labu tentukur 10 mL, lalu dicukupkan dengan metanol p.a hingga garis tanda. Kemudian dipipet lagi 2 mL, dan untuk betametason ditambahkan LIB III sebanyak 1,5 mL agar tercapainya konsentrasi 4 μg/mL dimasukkan kedalam labu tentukur 10 mL, lalu dicukupkan dengan metanol p.a hingga garis tanda (konsentrasi = 4 μg/mL untuk betametason dan konsentrasi = 8 μg/mL untuk deksklorfeniramin maleat) Selanjutnya diukur absorbansinya pada panjang gelombang yang telah ditetapkan.

3.6.8 Perhitungan Kadar Deksklorfeniramin Maleat-Betametason dalam Campuran

Perhitungan kadar masing-masing komponen dalam campuran dilakukan atas dasar absorbansi campuran (Ac) dan serapan tiap komponen pada multi panjang gelombang yang telah diketahui dari hasil pengukuran dengan menggunakan persamaan matriks:

[c] = [[a] x [a1]]-1 X [a] x [Ac] Keterangan :

[c] : kadar komponen dari campuran

[a] : matriks serapan senyawa penyusun campuran [a1] : transp matriks serapan senyawa penyusun campuran

[[a] x [a1]] : invers matriks kali transpose matriks serapan senyawa penyusun campuran

3.6.9 Analisis Hasil

Analisis hasil dilakukan untuk mengetahui validitas metode yang digunakan dalam penelitian. Parameter yang diukur:

3.6.9.1 Akurasi

Nilai akurasi dihitung dari hasil matriks kadar yang terukur atau kadar hasil dibandingkan dengan kadar yang sebenarnya dikalikan 100%. Akurasi dikatakan baik jika berada dalam rentang 98-102%. (Ditjen BKAK., 2014).

Akurasi dari hasil matris =

sebenarnya kadar

hasil kadar

X % kadar sertifikat analisis 3.6.9.2 Presisi

Penentuan presisi berdasarkan harga koefisien variasi (KV) atau Coefficient of Variation (CV). Jika KV lebih kecil dari 2%, maka dinilai mempunyai presisi yang baik (Gandjar dan Rohman, 2007). Koefisien variasi (KV) diperoleh dengan rumus:

KV = hasil kadar rerata Harga hasil kadar deviasi Standar

x 100%

3.6.9.3 Analisis Data Penetapan Kadar Secara Statistik

Data perhitungan kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason dianalisis secara statistik dengan menggunakan uji ttabel distribusi t dapat dilihat

pada Lampiran 14 halaman 71.

Menurut sudjana (2005), Rumus yang digunakan adalah :

SD =

( )

1 -n X -Xi 2

∑

t hitung =

n SD

x Xi

/

−

Data diterima jika ttabel < thitung < ttabel pada interval kepercayaan 95%

dengan nilai α = 0,005. Keterangan :

SD : Simpangan baku

xi : Kadar dalam satu perlakuan

−

X _{: Kadar rata-rata dalam satu sampel (mg/100g)}

n : Jumlah perlakuan α : Tingkat kepercayaan

Untuk menghitung kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason sebenarnya dalam sampel secara statistik dapat digunakan rumus

µ = X ± (t(α/2, dk) x SD / √n ) Keterangan :

SD : Simpangan baku −

X _{: Kadar rata-rata dalam satu sampel}

n : Jumlah perlakuan

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Penentuan Kurva Serapan Maksimum

Penentuan kurva serapan maksimum dilakukan pada panjang gelombang 200-400 nm untuk betametason dilakukan pada konsentrasi 11,0 μg/mL, sedangkan untuk deksklorfeniramin maleat pengukuran dilakukan pada konsentrasi 21,0 μg/mL. Berdasarkan hasil penelitian diperoleh kurva serapan maksimum pada λ = 239 nm untuk betametason dan pada λ = 259 nm untuk deksklorfeniramin maleat dapat dilihat pada Gambar 4.1 dan 4.2.

Gamb ar 4.1 Kurva serapan maksimum betametason 11,0 μg/mL

Gambar 4.2 Kurva serapan maksimum deksklorfeniramin maleat 21,0 μg/mL

nm.

200,00 250,00 300,00 350,00 400,00

A

b

s.

1,00000

0,80000

0,60000

0,40000

0,20000

4.2 Hasil Penentuan Kurva Serapan betametason dan deksklorfeniramin Telah didapatkan serapan dari, larutan betametason dibuat dalam konsentrasi 5,0; 8,0; 11,0; 14,0; 17,0; 20,0; 23,0 μg/mL dan larutan deksklorfeniramin maleat dalam konsetrasi 10; 16; 21; 26; 31; 35; dan 40 μg/mL pada panjang gelombang 200-400 nm. Kurva tumpang tindih serapan betametason dalam berbagai konsentrasi dapat dilihat pada Gambar 4.3 – 4.4.

nm.

200,00 250,00 300,00 350,00 400,00

A

b

s.

1,00000

0,80000

0,60000

0,40000

0,20000

Gambar 4.4 Kurva tumpang tindih serapan deksklorfeniramin maleat dalam berbagai konsentrasi

nm.

200,00 250,00 300,00 350,00 400,00

A

b

s.

1,00000

0,80000

0,60000

0,40000

0,20000

menggambarkan besar konsentrasi zat tersebut dalam campurannya. Berbeda dengan spektrofotometri ultraviolet (UV) metode panjang gelombang berganda yang dapat menetapkan kadar suatu zat dalam campuran zat tersebut dengan zat lainnya.

4.3 Penentuan Panjang Gelombang Penelitian

Setelah didapat spektrum serapan dari masing-masing komponen, maka spektrum ini kemudian digunakan untuk menentukan panjang gelombang penelitian yang digunakan. Pembacaan spektrum serapan ini dilakukan pada rentang panjang gelombang 200-330 nm, karena pada rentang panjang gelombang ini deksklorfeniramin maleat dan betametason tumpang tindih secara keseluruhan. Penentuan dilakukan dengan menggabungkan 2 spektrum tersebut kemudian dicari 5 titik sebagai panjang gelombang yang akan digunakan. Spektrum yang dipilih adalah spektrum deksklorfeniramin maleat konsentrasi tinggi dan spektrum betametason konsentrasi rendah, karena mewakili perbandingan konsentrasi deksklorfeniramin maleat dan betametason yaitu 8:1.

Spektrum tumpang tindih dari deksklorfeniramin maleat dan betametason dapat dilihat sebagai berikut:

Gambar 4.6 Spektrum tumpang tindih serapan deksklorfeniramin maleat konsentrasi 40,0 µg/mL dan betametason konsentrasi 5,0 µg/mL

nm .

200,00 250,00 300,00 330,00

A

bs.

1,00000 0,80000 0,60000 0,40000 0,20000 0,00000

259 249 239 229 219

Berdasarkan kurva Gambar 4.6 maka diperoleh lima panjang gelombang analisis yang digunakan. Lima panjang gelombang analisis yang digunakan adalah 219 nm, pada panjang gelombang ini merupakan awal serapan dari zat betametason dan deksklorfeniramin maleat. Pada panjang gelombang 229 nm deksklorfeniramin maleat dan betametason masih sama-sama memberikan serapan yang cukup besar. Pada panjang gelombang 239 nm deksklorfeniramin maleat dan betametason masih sama-sama memberikan serapan dan merupakan panjang gelombang maksimum betametason. Pada panjang gelombang 249 nm deksklorfeniramin maleat dan betametason masih sama-sama memberikan serapan. Pada panjang gelombang 259 nm merupakan panjang gelombang deksklorfeniramin maleat dan sama-sama masih memberikan serapan.

4.4 Penentuan Serapan

Setelah dilakukan pengukuran serapan masing-masing larutan pada panjang gelombang analisis 219, 229, 239, 249, dan 259 nm dengan pengulangan sebanyak enam kali. Data perhitungan serapan deksklorfeniramin maleat dan betametason dapat dilihat pada Tabel 1-12 :

Tabel 1 Data serapan panjang gelombang betametason pengulangan 1 C

(μg/mL) 219 nm λ

λ

229 nm

λ

239 nm 249 nm λ

λ

259 nm 0,0 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 5,0 0,10825 0,17044 0,20044 0,19142 0,07840 8,0 0.18690 0,25600 0,30060 0,24472 0,13362 11,0 0,26842 0,34938 0,39993 0,32718 0,19160 14,0 0,29724 0,43465 0,51064 0,42275 0,25200 17,0 0,31052 0,49876 0,60069 0,48428 0,30411 20,0 0,40701 0,59666 0,70786 0,57516 0,34700 23,0 0,46686 0,71030 0,84019 0,67607 0,41261 a= 0,01949 a= 0,02982 a= 0,03550 a= 0,28680 a=0,01917 b= 0,01690 b=0,01170 b= 0,01020 b= 0,01010 b=0,00620 r= 0,9897 r = 0,9986 r = 0,9992 r = 0,9991 r =0,9992

Tabel 2 Data serapan panjang gelombang betametason pengulangan 2 C

(μg/mL) 219 nm λ

λ 229 nm λ 239 nm λ 249 nm λ 259 nm 0,0 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 5,0 0.18350 0,19060 0,19950 0,18020 0,18744 8,0 0,2470 0,23700 0,27542 0,21480 0,20422 11,0 0,27851 0,29999 0,38160 0,30090 0,27101 14,0 0,32600 0,38950 0,49540 0,39270 0,32548 17,0 0,39721 0,48040 0,59271 0,46890 0,38144 20,0 0,41644 0,53761 0,67622 0,53620 0,41654 23,0 0,48710 0,64242 0,79572 0,63220 0,45290 a= 0,01700 a= 0,02810 a= 0,03450 a= 0,02740 a=0,019170 b= 0,01020 b= 0,00950 b= 0,00070 b= 0,00160 b= 0,00620 r= 0,99770 r = 0,99910 r = 0,99990 r = 0,99980 r = 0,99920 Tabel 3 Data serapan panjang gelombang betametason pengulangan 3

C (μg/mL) λ 219 nm λ 229 nm λ 239 nm λ 249 nm λ 259 nm 0,0 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 5,0 0,08914 0,15161 0,18364 0,14719 0,09689 8,0 0,19904 0,26890 0,31087 0,25281 0,17052 11,0 0,29471 0,36198 0,41148 0,33954 0,23215 14,0 0,29916 0,43715 0,51289 0,41576 0,27927 17,0 0,40422 0,54823 0,63733 0,51802 0,34906 20,0 0,44038 0,600649 0,71429 0,58327 0,39417 23,0 0,45900 0,70444 0,87389 0,67137 0,44849

a=0,02109 a= 0,03057 a= 0,03705 a= 0,29180 a= 0,019610 b= 0,01490 b= 0,01030 b= 0,00170 b= 0,00850 b= 0,00610 r= 0,98320 r = 0,99830 r = 0,99870 r = 0,99910 r = 0,99870 Tabel 4 Data serapan panjang gelombang betametason pengulangan 4

C

(μg/mL) 219 nm λ

λ 229 nm λ 239 nm λ 249 nm λ 259 nm 0,0 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 5,0 0,16699 0,20171 0,22571 0,17978 0,12006 8,0 0,26912 0,30392 0,33707 0,27950 0,19402 11,0 0,25625 0,34496 0,39740 0,32361 0,21736 14,0 0,29419 0,43311 0,51007 0,41252 0,27463 17,0 0,37424 0,53692 0,62643 0,50644 0,33955 20,0 0,34793 0,57916 0,69965 0,56308 0,37477 23,0 0,49936 0,70082 0,82930 0,67654 0,45824 a=0,01814 a = 0,02867 a= 0,03457 a= 0,02802 a= 0,01879 b= 0,05380 b= 0,03630 b = 0,02970 b= 0,02440 b= 0,01720 r= 0,95270 r = 0,99370 r = 0,99700 r = 0,99630 r = 0,99480

Tabel 5 data serapan panjang gelombang betametason pengulangan 5

C

(μg/mL) 219 nm λ

λ 229 nm λ 239 nm λ 249 nm λ 259 nm 0,0 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 5,0 0,10930 0,17122 0,20163 0,16284 0,10878 8,0 0,19403 0,26662 0,30969 0,25107 0,16893 11,0 0,28702 0,36615 0,41203 0,33855 0,23045 14,0 0,29762 0,43678 0,51367 0,41629 0,27937 17,0 0,41281 0,55869 0,64549 0,52502 0,35513 20,0 0,40524 0,60013 0,71465 0,58102 0,39006 23,0 0,44269 0,69104 0,82515 0,66588 0,44470 a=0,01985 a= 0,02994 a= 0,03561 a= 0,02884 a=0,01933 b= 0,02550 b = 0,01910 b= 0,01660 b= 0,01430 b= 0,01040 r= 0,97910 r = 0,99720 r = 0,99880 r = 0,99860 r = 0,99810 Tabel 6 data serapan panjang gelombang betametason pengulangan 6

C

(μg/mL) 219 nm λ

λ 229 nm λ 239 nm λ 249 nm λ 259 nm 0,0 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 5,0 0,10759 0,16661 0,19540 0,15674 0,10413 8,0 0,21356 0,29045 0,32753 0,29886 0,19598 11,0 0,23993 0,33643 0,39212 0,31865 0,21317 14,0 0,26129 0,44617 0,56656 0,45512 0,29352 17,0 0,41003 0,55574 0,64285 0,52199 0,35211 20,0 0,34511 0,60266 0,77199 0,60980 0,39586 23,0 0,40616 0,68277 0,85019 0,66272 0,43021 a =0,01761 a= 0,02967 a= 0,03747 a= 0,29090 a=0,01895 b= 0,03220 b= 0,02160 b= 0,00930 b= 0,02160 b= 0,01600

r= 0,95720 r = 0,99580 r = 0,99750 r = 0,99360 r = 0,99330 Tabel 7 Data serapan panjang gelombang deksklorfeniramin maleat pengulangan 1

C

(μg/mL) 219 nm λ

λ 229 nm λ 239 nm λ 249 nm λ 259 nm 0,00 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 10,0 0,72223 0,45241 0,14350 0,17533 0,16734 15,0 1,16917 0,70327 0,23398 0,22059 0,27684 20,0 1,54282 0,94910 0,31952 0,31892 0,42438 25,0 1,89467 1,14513 0,36738 0,36613 0,44664 30,0 2,34748 1,47760 0,48588 0,48624 0,58130 35,0 2,76036 1,72708 0,55740 0,57685 0,70747 40,0 2,83661 1,83254 0,59493 0,59077 0,71268 a= 0,07424 a= 0,02967 a= 0,01547 a= 0,01574 a= 0,01896 b= - 0,01440 b= 0,02160 b= -0,04880 b= -0,00720 b= -0,00010

Tabel 8 data serapan panjang gelombang deksklorfeniramin maleat pengulangan 2

C

(μg/mL) 219 nm λ

λ

229 nm

λ

239 nm

λ

249 nm 259 nm λ 0,00 0,00000 0,00000 0,0000 0,00000 0,00000 10,0 0,39834 0,38970 0,21030 0,182230 0,19930 15,0 0,48212 0,58840 0,28850 0,22610 0,22430 20,0 0,5295 0,64180 0,32450 0,27240 0,28040 25,0 0,58002 0,69300 0,37380 0,35920 0,34450 30,0 0,66615 0,70870 0,45250 0,39470 0,43070 35,0 0,73065 0,74720 0,49230 0,45710 0,48600 40,0 0,83469 0,80300 0,54540 0,49200 0,55230 a= 0,07422 a= 0,034900 a= 0,01106 a = 0,01120 a= 0,01370 b= -0,03780 b= -0,02105 b= 0,00760 b= 0,00740 b= 0,00870 r= 0,99850 r = 0,99880 r = 0,99800 r = 0,99860 r = 0,99930 Tabel 9 data serapan panjang gelombang deksklorfeniramin maleat pengulangan 3

C

(μg/mL) 219 nm λ

λ 229 nm λ 239 nm λ 249 nm λ 259 nm 0,00 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 10,0 0,64386 0,41470 0,13521 0,12859 0,15236 15,0 1,28505 0,77872 0,26559 0,25156 0,31255 20,0 1,72507 1,06915 0,34425 0,32730 0,41599 25,0 2,03851 1,25522 0,40744 0,38651 0,46983 30,0 2,28397 1,42149 0,42943 0,44392 0,54272 35,0 2,46228 1,54419 0,49641 0,50580 0,62561 40,0 2,90643 1,85535 0,60042 0,61288 0,73750 a= 0,07235 a= 0,04578 a= 0,01450 a= 0,01499 a= 0,01822 b= 0,08550 b= 0,04090 b= 0,01760 b= 0,00410 b= 0,00850

r= 0,98980 r = 0,99260 r = 0,98980 r = 0,99560 r = 0,99410 Tabel 10 data serapan panjang gelombang deksklorfeniramin maleat pengulangan 4

C

(μg/mL) 219 nm λ

λ 229 nm λ 239 nm λ 249 nm λ 259 nm 0,00 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 10,0 0,68692 0,42734 0,13693 0,13310 0,16190 15,0 1,27541 0,76419 0,24533 0,23515 0,27715 20,0 1,62834 0,99292 0,31720 0,31020 0,39726 25,0 1,93736 1,17787 0,38187 0,38078 0,46753 30,0 2,45799 1,46356 0,44844 0,46457 0,57433 35,0 2,48293 1,55403 0,50549 0,50822 0,62030 40,0 2,96770 1,90222 0,60994 0,61433 0,74472 a= 0,074130 a= 0,04672 a= 0,01493 a= 0,01523 a= 0,01860

b= 0,05810 b= 0,01320 b= 0,00400 b= -0,00240 b= -0,00150 r= 0,99290 r = 0,99650 r = 0,99760 r = 0,99810 r = 0,99720

Tabel 11 data serapan panjang gelombang deksklorfeniramin maleat pengulangan 5 C

(μg/mL) 219 nm λ

λ 229 nm λ 239 nm λ 249 nm λ 259 nm 0,00 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 10,0 0,79092 0,50725 0,16061 0,15007 0,18108 15,0 1,24106 0,79314 0,24712 0,23778 0,30031 20,0 1,55791 0,98782 0,36507 0,35300 0,36816 25,0 1,86942 1,18517 0,38866 0,39713 0,45723 30,0 2,37799 1,50269 0,48537 0,47215 0,56914 35,0 2,65192 1,74971 0,57870 0,57089 0,68799 40,0 2,71413 1,79124 0,58678 0,58958 0,72505 a= 0,07083 a = 0,04653 a = 0,01532 a= 0,01538 a= 0,01870 b= 0,10100 b= 0,04680 b= 0,01650 b = 0,00990 b= 0,00200 r= 0,99250 r = 0,99480 r = 0,99190 r = 0,99440 r= 0,99740 Tabel 12 data serapan panjang gelombang deksklorfeniramin maleat pengulangan 6

C

(μg/mL) 219 nm λ

λ 229 nm λ 239 nm λ 249 nm λ 259 nm 0,00 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 0,00000 10,0 0,6507 0,38397 0,12610 0,11905 0,14233 15,0 0,9659 0,68941 0,21405 0,20805 0,25412 20,0 1,2399 0,90541 0,30023 0,29056 0,35898 25,0 1,5177 1,18810 0,38765 0,38449 0,46628 30,0 1,8447 1,35130 0,44734 0,45599 0,56885 35,0 2,0697 1,57640 0,51009 0,52448 0,65332 40,0 2,2976 2,01196 0,65547 0,64995 0,78847 a= 0,05760 a= 0,04880 a = 0,01595 a= 0,01619 a= 0,01992 b= 0,09970 b= -0,05430 b = -0,01880 b= -0,02500 b= -0,03170

r= 0,99830 r = 0,99520 r = 0,99530 r = 0,99670 r = 0,99740

Nilai serapan yang dipakai adalah nilai serapan dari deksklorfeniramin maleat dan betametason pada pengulangan II. Pemilihan nilai serapan ini dapat ditentukan berdasarkan harga r hitung. Nilai r hitung dibandingkan dengan nilai r tabel dengan taraf kepercayaan 95% dengan df 4 yaitu 0,811. Berdasarkan data tersebut terlihat bahwa nilai r hitung deksklorfeniramin maleat dan betametason pada pengulangan II lebih besar dari nilai r tabel. Ini berarti bahwa persamaan tersebut mempunyai linearitas yang baik, karena nilai r hitung semakin mendekati

1. Dasar lain dalam memilih nilai serapan yang akan digunakan dapat dilihat dari nilai a dari persamaan, nilai a ini melambangkan noise atau pengganggu. Dalam suatu penelitian harga noise yang diterima adalah semakin mendekati 0, karena menunjukkan bahwa hasil penelitian ini dapat dipercaya. Nilai a dari deksklorfeniramin maleat dan betametason pada pengulangan II memberikan hasil yang baik, yaitu nilai a nya semakin mendekati 0, meskipun untuk nilai a dari deksklorfeniramin maleat dan betametason pengulangan 2 bukan nilai a yang terkecil. Hal pertama yang harus diperhatikan adalah melihat nilai r nya. Nilai r diterima bila lebih besar dari nilai r tabel, dan nilai r yang semakin mendekati 1.

Berdasarkan pada penilaian tersebut maka nilai serapan yang digunakan untuk deksklorfeniramin maleat dan betametason adalah nilai serapan pada duplikat kedua, didukung dengan nilai a dan r yang baik.

4.5 Kadar Teoritis Baku Campuran Deksklorfeniramin maleat dan betametason

Data serapan yang diperoleh ini kemudian digunakan untuk menetapkan kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason dalam campuran dengan perhitungan matriks. Larutan baku campuran yang telah dipreparasi sebanyak enam kali pengulangan kemudian masing–masing diukur pada panjang gelombang 200–400 nm. Spektrum yang diperoleh digunakan untuk melihat apakah spektrum larutan baku campuran tersebut sama dengan spektrum tablet O® perhitungan kadar teoritis baku campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason padat dilihat pada Lampiran 5 halaman 56, 57 dan 58.

4.6 Hasi Penentuan Kadar Deksklorfeniramin maleat dan Betametason dalam Sediaan Tablet

Penentuan penetapan kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason dalam tablet yang beredar diapotik mengandung deksklorfeniramin maleat 2 mg dan betametason 0,25 mg. Pengukuran deksklorfeniramin maleat dan betametason baku pada sediaan masing-masing deksklorfeniramin maleat 8,0 μg/mL dan betametason 4,0 μg/mL. Agar tercapainya uji perbandingan tersebut maka dilakukan addisi dengan baku pembanding sebanyak 1,5 mL dari larutan induk baku III setelah itu dapat dilakukan pengukuran. Larutan sampel dibuat sebanyak enam pengulangan, dengan tujuan agar data yang diperoleh lebih akurat. Kemudian larutan tersebut diukur serapannya pada kelima panjang gelombang yaitu 219, 229, 239, 249, 259 nm.

Dari hasil pengukuran spektrum sampel campuran diperoleh bentuk spektrum sebagai berikut:

Gambar 4.7 Spektrum sampel campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason

Dari bentuk spektrum campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason berbeda dengan bentuk spektrum tumpang tindih (Gambar 4.7),

nm .

200,00 250,00 300,00 350,00 400,00

Ab

s.

2,00000

1,50000

1,00000

0,50000

karena spektrum campuran merupakan gabungan dari 2 senyawa dalam satu larutan, sehingga tidak dapat diperoleh bentuk spektrum yang sama dengan bentuk spektrum tumpang tindih, karena pada spektrum tumpang tindih bukan merupakan gabungan spektrum deksklorfeniramin maleat dan betametason, tapi merupakan tumpang tindih dari spektrum masing-masing larutan. Pada spektrum campuran, deksklorfeniramin maleat dan betametason terdapat dalam satu larutan sehingga spektrum yang diperoleh merupakan spektrum dari campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason, bukan gabungan dari 2 spektrum.

Data serapan larutan sampel campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason yang didapat digunakan untuk mengukur kadar masing-masing campuran, dengan cara memasukkan data yang tersedia pada rumus perhitungan matriks. Kemudian dari perhitungan akan diperoleh kadar masing-masing komponen campuran. Sehingga dapat dihitung nilai metode matriks dan % Koefisien variasinya dan dapat dilihat pada Tabel 13 di bawah ini :

Tabel 13 Data hasil perhitungan kadar, metode matriks, dan % Koefisien variasi Nomor

sampel

Deksklorfeniramin maleat Betametason Kadar

terukur (μg/mL)

Kadar teoritis (μg/mL)

Akurasi hasil matriks (%) Kadar terukur (μg/mL)

Kadar teoritis (μg/mL)

Akurasi hasil matriks (%)

1 8,0234 8,00 99,99 4,0754 4,08 102,07

2 8,0649 8,08 99,51 4,0899 4,16 100,48

3 8,0609 8,16 98,49 4,0338 4,08 101,04

4 8,0370 8,08 99,17 4,0212 4,00 101,72

5 8,0727 8,16 98,63 4,0736 4,12 101,04

6 8,0661 8,08 99,53 3,9685 4,00 101,39

Rerata matriks % KV 99,22 Rerata matriks % KV 101,29

0,4896 0,3223

Berdasarkan Tabel 13 diatas, kadar betametason dan deksklorfeniramin maleat pada sediaan tablet O® memenuhi persyaratan menurut Farmakope Indonesia Edisi V (2014) yaitu untuk sediaan tablet betametason dan sediaan tablet deksklorfeniramin maleat yaitu tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket.

Diperoleh rentang kadar akurasi dari hasil matriks untuk masing-masing deksklorfeniramin maleat dan betametason adalah 98,17%-99,94% dan 100,77%-101,81%. Koefisien variasi (%KV) untuk masing-masing deksklorfeniramin maleat dan betametason adalah 0,4896% dan 0,3223%. Nilai rentang kadar akurasi deksklorfeniramin maleat dan betametason memiliki akurasi yang baik karena berada pada rentang 90%-110% dan juga memiliki presisi yang baik karena %KV deksklorfeniramin maleat dan betametason termasuk <2%.

Perhitungan matriks dapat dilihat pada Lampiran 12 halaman 68, perhitungan kadar akurasi hasil matriks dapat dilihat pada Lampiran 13 halaman 70 dan perhitungan koefisien variasi (%KV) dapat dilihat pada Lampiran 16 halaman 77. Perhitungan statistik kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason pada sediaan tablet O® dapat dilihat pada Lampiran 14 halaman 71.

4.7 Hasil Perbandingan Spektrum Serapan Campuran Deksklorfeniramin maleat dan Betametason Sebelum Penambahan Baku dengan Sesudah Penambahan Baku

Spektrum campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason sebelum penambahan baku dengan sesudah penambahan baku dapat dilihat Gambar 4.8 dan 4.9

Gambar 4.8 Spektrum serapan campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason (Sebelum Metode Adisi Standar)

Gambar 4.9 Spektrum serapan campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason (Sesudah Metode Adisi Standar)

Dari Gambar 4.8 dan 4.9 dapat dilihat bahwa adanya perbedaan spektrum sebelum penambahan baku dengan sesudah penambahan baku. Sebelum penambahan baku, spektrum yang terlihat hanya deksklorfeniramin maleat sedangkan betametason tidak terlihat, sehingga tidak dapat dilakukan penetapan kadar betametason karena konsentrasinya di dalam campuran kecil atau hampir tidak ada.

Oleh karena itu, diperlukan metode adisi standar terhadap betametason agar konsentrasi betametason dapat meningkat dan absorbsinya turut meningkat.

nm.

200,00 250,00 300,00 350,00 400,00

A

b

s.

2,00000

1,50000

1,00000

0,50000

Menurut Harmita (2004), dalam metode adisi (penambahan bahan baku), sejumlah sampel yang dianalisis ditambah analit dengan konsentrasi biasanya 98% sampai 102% dari kadar analit yang diperkirakan, dicampur dan dianalisis kembali. Selisih kedua hasil dibandingkan dengan kadar yang sebenarnya.

4.8 Kadar Deksklorfeniramin maleat dan Betametason dengan Analisis Statistik

Kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason pada tablet O® dengan analisis secara statistik pada metode panjang gelombang berganda menggunakan pelarut metanol p.a dan juga yang telah dilakukan oleh Aisyah (2015) secara spektrofotometri derivatif dengan teknik zero crossing menggunakan pelarut metanol p.a dapat dilihat pada Tabel 4.14.

Tabel 4.14 Rentang Kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason pada tablet O® dengan analisis secara statistik

Metode

Rujukan

Aisyah (2015) Nurbaya (2016) zero crossing Panjang gelombang berganda

pelarut Metanol p.a Metanol p.a

Panjang gelombang yang digunakan

Deksklorfeniramin maleat pada 249 nm dan Betametason 239 nm.

219 nm, 229 nm, 239 nm, 149 nm, 259 nm.

Kadar betametason (92,51 – 96,98)% (0,2312 – 0,2424)mg

(100,77-101,81)% (0,2519 – 0,2545)mg Kadar

deksklorfeniramin maleat

(95,31 – 95,96)% (1,9062 – 1,9192)mg

(98,17-99,94)% (1,9634 – 1,9988)mg

Berdasarkan Tabel 4.14 di atas, kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason pada kedua metode memenuhi persyaratan menurut Farmakope Indonesia Edisi V (2013) yaitu untuk sediaan tablet deksklorfeniramin maleat dan sediaan tablet betametason yaitu tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket. Kadar deksklorfeniramin maleat

yang diperoleh dengan metode panjang gelombang berganda lebih besar dari pada dengan metode spektrofotometri derivatif teknik zero crossing, dan kadar betametason yang diperoleh dengan metode panjang gelombang berganda lebih besar dari pada dengan metode spektrofotometri derivatif teknik zero crossing. Hal ini bisa disebabkan karena adanya perbedaan pada pengambilan panjang gelombang analisisnya. Pada teknik zero crossing panjang gelombang dipilih oleh software pada alat UV probe pada spektrum serapan masing-masing yang telah diderivatkan dilakukan dengan mengamati panjang gelombang yang menunjukkan nilai serapan senyawa pasangannya nol dan nilai serapan senyawa yang lain dan campurannya memiliki nilai serapan sama atau hampir sama. Pada metode panjang gelombang berganda dilakukan pemilihan panjang gelombang analisis secara variabel bebas oleh si peneliti dimana pemilihan panjang gelombangnya diambil dari spektrum tersebut mulai memberikan serapan sampai hampir tidak memberikan serapan yang dipilih sebanyak 5 lima panjang gelombang dan pada metode ini dilakukan perhitungan kadar dengan operasi matriks. Perhitungan statistik kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason pada sediaan tablet O® dengan metode panjang gelombang berganda dapat dilihat pada Lampiran 14 halaman 71.

4.9 Hasil Uji Validasi Tujuan utama yang harus dicapai dari suatu kegiatan analisis kimia adalah

dihasilkannya data hasil uji yang absah (valid). Secara sederhana hasil uji yang absah dapat digambarkan sebagai hasil uji yang mempunyai akurasi (accuracy) dan presisi (precission) yang baik (Rohman, 2007).

4.9.1 Hasil Uji Akurasi

Perhitungan uji akurasi dari hasil matriks pada sediaan tablet O® dapat dilihat pada Lampiran 13 halaman 70. Data hasil uji akurasi dari hasil matriks deksklorfeniramin maleat dan betametason dengan pada tablet O® dapat dilihat pada Tabel 4.15.

Tabel 4.15 Data hasil uji akurasil hasil matriks deksklorfeniramin maleat dan betametason pada tablet O®

Pengulangan

Akurasi hasil matriks (%) Deksklorfeniramin

maleat Betametason

1 99,99 102,07

2 99,51 100,48

3 98,49 101,04

4 99,17 101,72

5 98,63 101,04

6 99,53 101,39

Rata-rata 99,22 101,29

Berdasarkan Tabel 4.15 diatas menunjukkan bahwa nilai rata-rata persen akurasi dari hasil matriks yang diperoleh sangat dekat dengan nilai sebenarnya dan telah memenuhi syarat akurasi untuk validasi prosedur analisis karena rata-rata berada di antara rentang 90%−110% (Ditjen BKAK., 2014). Persen perolehan kembali deksklorfeniramin maleat dan betametason masing-masing 99,22% dan 101,29%.

4.9.2 Hasil Uji Presisi

Berdasarkan data perhitungan terhadap kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason, diperoleh koefisien variasi deksklorfeniramin maleat adalah 0,4896% dan betametason adalah 0,3223%. Koefisien varikasi yang diperoleh pada deksklorfeniramin maleat dan betametason telah memenuhi syarat presisi

yaitu ≤2% (Rohman, 2007). Perhitungan koefisien variasi (KV) deksklorfeniramin maleat dan betametason masing–masing dapat dilihat pada Lampiran 16 halaman 77.

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan penelitian yang dilakukan, maka dapat disimpulkan:

a. Pelarut metanol p.a dapat digunakan untuk analisis campuran betametason dan deksklorfeniramin maleat secara spektrofotometri ultraviolet dengan metode panjang gelombang berganda.

b. Kadar betametason dan deksklorfeniramin maleat dalam sediaan tablet O® memenuhi persyaratan Farmakope Indonesia Edisi V (2014) dengan kadar sebesar (99,17±0,7727)% dan (101,29±0,5195)% masing–masing untuk betametason dan deksklorfeniramin maleat.

5.2 Saran

Disarankan agar dilakukan penelitian lebih lanjut pada penetapan kadar campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason dengan sediaan lain, misalnya sirup.

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Betametason

Betametason mengandung tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket. Menurut Ditjen BKAK., (2014), Uraian tentang betametason adalah sebagai berikut :

Gambar 2.1 Rumus struktur betametason Rumus molekul

Berat molekul

Nama kimia : 9-Fluoro-11β,17,21-trihidroksi-16β -metilpregna-1,4-diena- 3,20-dion

Pemerian : Serbuk, putih sampai praktis putih; tidak berbau

Kelarutan : Praktis tidak larut dalam air, mudah larut dalam aceton dan dalam kloroform; larut dalam etanol; sukar larut dalam ete : Atropi lokal, gatal-gatal, hipopigmentasi,

: C22H29FO5

: 392,47

: 9-Fluoro-11 β, 17, 21-trihidroksi-16 β-metilpregna-1,4-diena 3,20-dion

: Serbuk hablur, putih sampai praktis putih; tidak berbau

: Praktis tidak larut dalam air, mudah larut dalam aceton dan dalam kloroform, larut dalam etanol, sukar larut dalam eter dan benzen

CH3

CH3

CH3

O

OH OH OH

O

H

Betametason digunakan untuk mengobati alergi dan peradangan lokal, tetapi betametason juga dapat menimbulkan efek samping, antara lain antropi lokal, gatal-gatal, hipopigmentasi, dermatitis perioral dan alergi, serta infeksi sekunder. Semua kortikosteroid secara oral di absopsi dengan langsung efeknya baru tampak setelah 4-6 jam, maka untuk efek cepat hendaknya digunakan injeksi dari derivat yang mudah larut. Masa paruhnya berkisar antara 1,5 dan 5 jam, tetapi bertahan jauh lebih lama. Misalnya: deksametason dan betametason (Tan dan Rahardja, 2007).

2.2 Deksklorfeniramin maleat

Deksklorfeniramin maleat mengandung tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket. Menurut Ditjen BKAK., (2014), Uraian tentang deksklorfeniramin maleat adalah sebagai berikut :

Gambar 2.2 Rumus struktur deksklorfeniramin maleat Rumus molekul : C16H19ClN2. C4H4O4

Berat molekul : 390,87

Nama kimia : (+)-2-[p-Kloro α-[(Dimetilamino)etil]benzil] piridina maleat

Pemerian : Serbuk hablur putih tidak berbau

Susut pengeringan : Lakukan pengeringan pada suhu 65 oC selama 4 jam sebelum digunakan

Kelarutan : Mudah larut dalam air, larut dalam etanol dan dalam kloroform, sukar larut dalam benzen dan dalam eter Deksklorfeniramin maleat digunakan sebagai antihistamin. Efek samping yang ditimbulkan deksklorfeniramin maleat antara lain fertigo, tinitus, lelah, penat, inkoordinasi, kabur, diplopia, euforia, gelisah, tremor, mulut kering, disuria, palpitasi, hipotensi, sakit kepala, rasa berat dan lemah pada tangan. Deksklorfeniramin maleat setelah pemberian oral atau parenteral, antihistamin (AH1) diabsorpsi secara baik. Efeknya timbul 15-30 menit setelah pemberian oral dan maksimal 1-2 jam. Lama kerja antihistamin (AH1) setelah pemberian dosis tunggal kira-kira 4-6 jam. Kadar tertinggi terdapat pada paru-paru, sedangkan pada limpa, ginjal, otak, otot dan kulit kadarnya lebih rendah (Tan dan Rahardja, 2007).

2.3 Metode Umum Pemeriksaan Analisis Campuran Deksklorfeniramin maleat dan Betametason

Beberapa penelitian telah melakukan pemeriksaan analisis campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason dengan metode umum dapat dilihat pada Tabel 2.1.

Tabel 2.1 Pemeriksaan Analisis Campuran Deksklorfeniramin maleat dan Betametason

Berdasarkan Tabel 2.1 diatas penetapan kadar campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason dengan KCKT dilakukan oleh

Senyawa Metode Pelarut / Fase gerak Rujukan Deksklorfeniramin

maleat dan betametason

Kromatografi Cair Kinerja Tinggi

Dapar metanol pH 7,2 (45:55) Mustarichie, dkk., (2014) Deksklorfeniramin maleat dan betametason Spektrofotometri derivatif dengan teknik zero crossing

pada panjang gelombang deksklorfeniramin maleat 249 nm dan betametason

239 nm.

Mustarichie, dkk., (2014). Penggunaan KCKT relatif lebih mahal dan memerlukan tahap pemisahan sehingga memerlukan waktu yang lebih lama. Aisyah, (2015) menggunakan spektrofotometri derivatif untuk penetapan kadar campuran dan deksklorfeniramin maleat dan betametason dengan pelarut metanol p.a. penggunaan spektrofotometri derivatif metode zero crossing memerlukan pemilihan panjang gelombang kritis untuk pengukuran. Pemilihan ini menyebabkan penurunan sensitivitas dan presisi pada campuran biner (Nurhidayati, 2007).

2.4 Spektrofotometri

Spektrofotometer adalah alat untuk mengukur transmitan atau serapan suatu sampel sebagai fungsi panjang gelombang. Spektrofotometer merupakan penggabungan dari dua fungsi alat yang terdiri dari spektrometer yang menghasilkan sinar dari spektrum dengan panjang gelombang tertentu dan fotometer sebagai alat pengukur intensitas cahaya yang ditransmisikan atau yang diabsorpsi (Gandjar dan Rohman, 2007). Pada spektrofotometer, panjang gelombang yang benar-benar terseleksi dapat diperoleh dengan bantuan alat pengurai cahaya seperti prima. Suatu spektrofotometer tersusun dari spektrum tampak yang kontinu, monokromator, sel pengabsorpsi untuk larutan sampel atau blangko dan suatu alat untuk mengukur perbedaan absorpsi antara sampel dan pembanding (Khopkar, 1985).

Jika suatu molekul sederhana dikenakan radiasi ultraviolet maka molekul tersebut akan menyerap radiasi ultraviolet. Interaksi antara molekul dengan radiasi ultraviolet ini akan meningkatkan energi dari tingkat dasar ke tingkat tereksitasi.

Apabila pada molekul yang sederhana tadi hanya terjadi transisi elektronik pada satu macam gugus yang terdapat pada molekul, maka hanya akan terjadi satu absorpsi yang merupakan garis spektrum. Terjadinya dua atau lebih pita spektrum diberikan oleh molekul dengan struktur yang lebih kompleks karena terjadi beberapa transisi sehingga mempunyai lebih dari satu panjang gelombang (Gandjar dan Rohman, 2007).

2.4.1 Hukum Lambert-Beer

Menurut Gandjar dan Rohman (2007) Hukum Lambert, serapan berbanding lurus terhadap ketebalan sel yang disinari. Sedangkan menurut Beer, serapan berbanding lurus dengan konsentrasi. Kedua pernyataan ini dapat dijadikan satu dalam Hukum Lambert-Beer, sehingga diperoleh bahwa serapan berbanding lurus terhadap konsentrasi dan ketebalan sel, yang dapat ditulis dengan persamaan :

A = a.b.c (g/Liter) Keterangan: A = absorbansi

a = absorptivitas b = tebal kuvet (cm)

c = konsentrasi

Absorptivitas (a) merupakan suatu konstanta yang tidak tergantung pada konsentrasi, tebal kuvet dan intensitas radiasi yang mengenai larutan sampel.

Menurut Denney dan Sinclair (1991) hukum Lambert-Beer terdapat beberapa pembatasan yaitu:

a. Larutan yang menyerap cahaya adalah campuran yang homogen. b. Menggunakan sinar monokromatis.

Parameter kekuatan energi radiasi yang diabsorpsi oleh molekul adalah absorbansi (A) yang dalam batas konsentrasi tertentu nilainya sebanding dengan banyaknya molekul yang mengabsorpsi radiasi. Senyawa yang tidak mengabsorpsi radiasi ultraviolet-sinar tampak dapat juga ditentukan dengan spektrofotometri ultraviolet-sinar tampak (Gandjar dan Rohman, 2007).

2.4.2 Kegunaan Spektrofotometri Ultraviolet

Kegunaan spektrofotometri ultraviolet dalam analisis kualitatif sangat terbatas karena rentang daerah radiasi yang relatif sempit hanya dapat mengakomodasi sedikit sekali puncak absorpsi maksimum dan minimum karena itu identifikasi senyawa yang tidak diketahui tidak memungkinkan untuk dilakukan (Satiadarma, dkk., 2004).

Pada analisis kuantitatif dengan cara penetapan kadar, larutan standar obat yang akan dianalisis disiapkan, serapan sampel dan standar dapat ditentukan (Cairns, 2008). Konsentrasi sampel dalam senyawa dihitung dengan rumus sebagai berikut:

Ct Cs At As

=

Keterangan: As = Absorbansi baku pembanding At = Absorbansi zat dalam sampel Cs = Konsentrasi baku pembanding Ct = Konsentrasi zat dalam sampel

Metode spektrofotometri memiliki beberapa keuntungan antara lain kepekaan yang tinggi, ketelitian yang baik, mudah dilakukan, cepat pengerjaannya dan dapat digunakan untuk menentukan senyawa campuran (Munson, 1984).

Penentuan kadar senyawa organik yang mempunyai struktur kromofor atau mengandung gugus kromofor, serta mengabsorpsi radiasi ultraviolet penggunaanya cukup luas (Satiadarma, dkk., 2004).

2.4.3 Komponen Spektrofotometer

Spektrofotometer yang sesuai untuk pengukuran di daerah spektrum ultraviolet–visibel terdiri atas suatu sistem optik dengan kemampuan menghasilkan sinar monokromatis dalam jangkauan panjang gelombang 200 – 800 nm (Cairns, 2004). Diagram spektrofotometer Ultraviolet-Visible dapat dilihat pada Gambar 2.3.

Gambar 2.3 Diagram spektrofotometer ultraviolet – visible

Menurut Day dan Underwood (1998), unsur-unsur terpenting suatu spektrofotometer adalah sebagai berikut:

a. Sumber-sumber lampu: lampu deuterium digunakan untuk daerah Ultraviolet pada panjang gelombang dari 190-350 nm, sementara lampu halogen kuarsa atau lampu tungsten digunakan untuk daerah visibel pada panjang gelombang antara 350- 900 nm.

b. Monokromotor: digunakan untuk memperoleh sumber sinar yang monokromatis. Alatnya berupa prisma untuk mengarahkan sinar monokromatis yang diinginkan dari hasil penguraian.

c. Kuvet (sel): digunakan sebagai wadah sampel untuk menaruh cairan ke dalam berkas cahaya spektrofotometer. Kuvet itu haruslah meneruskan energi radiasi dalam daerah spektrum yang diinginkan. Pada pengukuran di daerah sinar tampak, kuvet dapat digunakan, tetapi untuk pengukuran pada daerah ultraviolet kita harus menggunakan sel kuarsa karena gelas tidak tembus cahaya pada daerah ini. Kuvet tampak dan ultraviolet yang khas mempunyai ketebalan 1 cm, namun tersedia kuvet dengan ketebalan yang sangat beraneka, mulai dari ketebalan kurang dari 1 mm sampai 10 cm bahkan lebih.

d. Detektor: Peranan detektor penerima adalah memberikan respon terhadap cahaya pada berbagai panjang gelombang.

2.5 Analisis Multikompenen dengan Spektrofotometri Ultraviolet

Analisis kuantitatif campuran dua komponen merupakan teknik pengembangan analisis kuantitaif komponen tunggal. Prinsip pelaksanaanya adalah mencari absorban atau beda absorban di tiap-tiap komponnen yang memberikan korelasi yang linier terhadap konsentrasi, sehingga akan dapat dihitung masing-masing kadar campuran zat tersebut secara serentak atau salah satu komponen komponen dalam campurannya dengan komponen lainnya (Mulja dan Suharman, 1995).

Menurut Day dan Underwood (1998) ada beberapa kemungkinan yang terjadi pada spektrum absorban dua kompenen sebagai berikut:

a. Kemungkinan I dan II

Gambar 2.4 Spektrum absorban senyawa X dan Y Kemungkinan II

Gambar 2.5 Spektrum absorban senyawa X dan Y, spektrum X bertumpang tindih pada spektrum Y

Pada Gambar 2.4 diatas menunjukkan terjadi kemungkinan spektrum tidak tumpang tindih pada dua panjang gelombang yang digunakan. X dan Y semata-mata diukur masing-masing pada panjang gelombang λ1 dan λ2. Terjadi tumpang

tindih satu cara dari Gambar 2.5 dimana Y tidak mengganggu pengukuran X pada

λ1, tetapi X memang menyerap cukup banyak bersama-sama Y pada λ2.

Konsentrasi X ditetapkan langsung dari absorban larutan pada λ1, kemudian

absorban yang dsumbangkan oleh larutan X pada λ2 dihitung dari absortivitas

dari absorban terukur larutan pada λ2 sehingga akan diperoleh absorban yang

disebabkan oleh Y, kemudian konsentrasi Y dapat diukur dengan cara yang umum. b. Kemungkinan III

Gambar 2.6 Spektrum absorban senyawa X dan Y saling tumpang tindih

Pada Gambar 2.6 spektrum X dan Y saling tumpang tindih secara keseluruhan. Pada absorbansi maksimum dari komponen X pada λ1, komponen Y

memiliki absorbansi tersendiri. Begitu juga komponen Y pada λ2 , komponen X

memiliki absorbansi sendiri.

Sebuah Spektrofotometer tidak dapat menganalisa suatu contoh. Ia menjadi suatu alat berguna hanya setelah contoh telah dikerjakan sedemikian rupa sehingga pengukuran dapat ditafsirkan dalam istilah-istilah yang tidak berarti rangkap. Akan tetapi dalam banyak hal, adalah tidak perlu bahwa setiap komponen sendiri-sendiri dari suatu contoh kompleks dipisahkan dari semua yang lain. Misalkan suatu larutan mengandung dua zat penyerap X dan Y. kerumitan keadaan tergantung pada spektrum absorpsi X dan Y (Underwood , 1998).

Menurut Andrianto (2009) pada penetapan kadar campuran multikomponen sulit dilakukan, sehingga untuk mengatasi hal itu diperkenalkan analisis multikomponen menggunakan prinsip persamaan regresi berganda

melalui perhitungan matriks dengan metode pengamatan beberapa panjang gelombang berganda.

Panjang gelombang dipilih berdasarkan spektrum tersebut mulai memberikan serapan sampai hampir tidak memberikan serapan, dimana konsentrasi larutan yang dipakai serapannnya memenuhi hukum Lambert dan Beer yaitu 0,2-0,8. Penentuan panjang gelombang dengan memilih lima panjang gelombang secara variabel bebas. Pada metode ini tidak diperlukan proses pemisahan komponen zat aktif karena kadar komponen kedua zat dapat ditetapkan secara bersama-sama (Andrianto, 2009).

2.6 Validasi Metode Analisis

Tujuan utama yang harus dicapai dari suatu kegiatan analisis kimia adalah dihasilkannya data hasil uji yang absah (valid). Secara sederhana hasil uji yang absah dapat digambarkan sebagai hasil uji yang mempunyai akurasi (accuracy) dan presisi (precission) yang baik. Validasi metode adalah suatu proses yang menunjukkan bahwa prosedur analitik telah sesuai dengan penggunaan yang dikehendaki. Validasi merupakan persyaratan mendasar yang diperlukan untuk menjamin kualitas dan hasil dari semua aplikasi analitik (Ermer dan McB. Miller, 2005).

2.6.1 Akurasi (Kecermatan)

Akurasi (kecermatan) adalah ukuran yang menunjukkan derajat kedekatan hasil analisis dengan kadar analit sebenarnya. Rentai nilai % akurasi analit yang dapat diterima adala 90%-110% (Ditjen BKAK., 2014). Rentang ini bersifat fleksibel tergantung dari analit yang diperiksa, jumlah sampel, dan kondisi laboratorium (Andrianto, 2009).

2.6.2 Presisi (Keseksamaan)

Presisi merupakan ukuran keterulangan metode analisis dan biasanya diekspresikan sebagai simpangan baku relatif dari sejumlah sampel yang berbeda signifikan secara statistik. Dokumentasi presisi seharusnya mencakup simpangan baku, simpangan baku relative (RSD) atau koefisien variasi (CV), dan kisaran kepercayaan. Presisi bisa dinyatakan dalam koefisien variasi (KV) dan dinyatakan memiliki presisi yang baik apabila KV < 2% (Gandjar dan Rohman, 2007).

2.6.3 Linearitas

Linieritas adalah kemampuan suatu metode untuk memperoleh hasil uji yang secara langsung proposional dengan konsentrasi analit pada kisaran yang diberikan. Linieritas dapat ditentukan secara langsung dengan pengukuran sampel (analit) yang ditambahkan baku pada sekurang-kurangnya lima titik konsentrasi yang mencakup seluruh rentang konsentrasi kerja (Ermer dan McB. Miller, 2005). 2.6.4 Rentang

Rentang adalah konsentrasi terendah dan tertinggi yang mana suatu metode analitik menunjukkan akurasi, presisi dan linieritas yang cukup. Rentang suatu prosedur dapat divalidasi lewat pembuktian bahwa prosedur analitik tersebut mampu memberikan presisi, akurasi dan linieritas yang dapat diterima ketika digunakan untuk menganalisis (Ermer dan Miller, 2005).

BAB I PENDAHULUAN 1.1Latar Belakang

Obat dapat didefinisikan sebagai suatu zat yang dimaksud untuk dipakai dalam diagnosis, mengurangi rasa sakit, mengobati atau mencegah penyakit pada manusia atau hewan. Zat aktif tersebut dapat dipergunakan sebagai obat terlebih dahulu harus dibuat dalam bentuk sediaan seperti pil, tablet, kapsul, sirup, suspensi, supositoria, dan salep. Sediaan obat terdapat lebih dari satu komponen zat aktif. Salah satu kombinasi yang sering digunakan adalah betametason dan deksklorfeniramin maleat yang tersedia dalam bentuk sediaan tablet dengan berbagai merek dagang. Betametason adalah obat kortikosteroid dan deksklorfeniramin maleat adalah salah satu obat antihistamin (Ansel, 1989; Moffat, dkk., 2005). Bentuk sediaan farmasi seperti tablet harus memenuhi beberapa persyaratan sesuai dengan standar yang ada pada acuan misalnya pada Farmakope. Salah satu persyaratan tersebut adalah persyaratan kadar. Persyaratan kadar untuk sediaan tablet deksklorfeniramin maleat dan betametason yaitu mengandung betametason dan deksklorfeniramin maleat tidak kurang dari 90,0% dan tidak lebih dari 110,0% dari jumlah yang tertera pada etiket (Ditjen POM., 1995)

Betametason adalah obat kortikosteroid yang mengandung fluor, mempunyai daya kerja yang besar, tetapi penggunaan obat kortikosteroid yang mengandung fluor dalam jangka waktu lama dapat menyebabkan pelebaran kapiler dan pembuluh nadi halus yang bersifat permanen sampai terjadi atropikulit. Betametason dapat ditentukan kadarnya dengan Spektrofotometri UV

pada pelarut etanol panjang gelombang 240 nm (A11=390a) dan natrium fosfat:air

panjang gelombang 241 nm (A11=296a) (Moffat, dkk., 2005).

Deksklorfeniramin maleat merupakan suatu antihistamin yang dapat mencegah gejala-gejala alergi, yang disebabkan sebagian besar oleh histamin (H1). Deksklorfeniramin dapat ditentukan kadarnya dengan Spektrofotometri UV pada pelarut asam panjang gelombang 265 (A11=302a) dan basa panjang

gelombang 260 nm (A11=205a) (Harkness, 1984; Moffat, dkk., 2005).

Penelitian untuk tujuan mengetahui kondisi analisis betametason dan deksklorfeniramin maleat telah dilakukan pada tablet mengunakan metode kromatografi cair kinerja tinggi (KCKT) dengan dapar metanol pH 7,2 (45:55) sebagai fase gerak. Spektrofotometri derivatif metode zero crossing pada serapan derivat kedua dalam pelarut metanol p.a (Mustarichie, dkk., 2014; Aisyah, 2015).

Metode analisis yang dibutuhkan di bagian kontrol kualitas industri obat dalam rangka pengawasan mutu obat adalah metode analisis yang cepat dan memenuhi persyaratan kesahihan suatu metode dengan modifikasi tersebut maka penetapan kadar campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason dapat ditetapkan secara simultan atau secara bersama-sama dan dengan waktu yang singkat. Dalam pengembangan metode analisis ini perlu mempertimbangkan sifat fisika kimia deksklorfeniramin maleat dan betametason. Deksklorfeniramin maleat dan betametason mempunyai kelarutan yang hampir sama, salah satunya adalah mudah larut dalam metanol p.a. Deksklorfeniramin maleat dan betametason dapat menyerap radiasi elektromagnetik UV dengan serapan maksimal pada panjang gelombang yang berdekatan yaitu 259 nm untuk serapan deksklorfeniramin maleat dan 239 nm untuk serapan betametason. Data panjang

gelombang maksimum kedua senyawa yang memiliki selisih yang kecil menunjukkan bahwa kurva serapan deksklorfeniramin maleat dan betametason mengalami tumpang tindih secara keseluruhan (Aisyah, 2015).

Metode penetapan kadar yang dapat dilakukan oleh Andrianto (2009) adalah dengan modifikasi metode analisis multikomponen yang lebih praktis secara spektrofotometri ultraviolet dengan prinsip persamaan regresi berganda melalui perhitungan operasi matriks dengan metode pengamatan pada panjang gelombang berganda yang dipilih adalah 219 nm, 229 nm, 239 nm, 249 nm, dan 259 nm. Pemilihan panjang gelombang berdasarkan dari panjang gelombang yang mulai memberikan serapan sampai hampir tidak memberikan serapan, dimana konsentrasi larutan yang dipakai serapannnya memenuhi hukum Lambert dan Beer yaitu 0,2-0,8. Penentuan panjang gelombang analisis dengan memilih lima panjang gelombang secara variabel bebas (Andrianto, 2009).

Validasi metode dapat diartikan sebagai suatu prosedur yang digunakan untuk membuktikan bahwa metode analisis tersebut memberikan hasil seperti yang diharapkan dengan kecermatan dan ketelitian yang memadai. Parameter yang digunakan untuk validasi metode ini adalah akurasi dan presisi. Parameter yang dipakai adalah akurasi dan presisi karena dengan penilaian dari kedua parameter ini sudah cukup mewakili untuk menilai validitas metode spektrofotometri ultraviolet ini. Menurut Ermer dan McB. Miller (2005), validasi merupakan suatu bagian dari prosedur analisis yang tidak dapat dipisahkan. Menurut Harmita (2004), untuk menguji validasi metode dilakukan uji akurasi (ketepatan) dengan parameter persen perolehan kembali dan metode penambahan

baku (standard addition method) dan uji presisi (ketelitian) dengan parameter Relative Standard Deviation (RSD).

Berdasarkan uraian diatas, dalam penelitian ini akan dilakukan penetapan kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason pada sediaan tablet secara spektrofotometri ultraviolet dengan metode panjang gelombang berganda menggunakan pelarut metanol.

1.2Perumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang diatas maka perumusan masalah dalam penelitian ini adalah:

a. apakah pelarut metanol p.a dapat digunakan untuk analisis kadar campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason dengan menggunakan spektrofotometri ultraviolet metode panjang gelombang berganda?

b. apakah kadar campuran dekslorfeniramin maleat dan betametason dalam sediaan tablet yang ditetapkan dengan metode spektrofotometri UV metode panjang gelombang berganda memenuhi persyaratan kadar yang ditetapkan Farmakope Indonesia Edisi V (2014)?

1.3 Hipotesis

Berdasarkan perumusan masalah diatas, maka dibuat hipotesis sebagai berikut: a. pelarut metanol p.a dapat digunakan untuk analisis kadar campuran

deksklorfeniramin maleat dan betametason dengan menggunakan spektrofotometri UV metode panjang gelombang berganda.

b. kadar campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason dalam sediaan tablet yang ditetapkan menggunakan spektrofotometri ultraviolet metode

3.6.3 Pembuatan Larutan Standar ... 20

3.6.3.1 Pembuatan laturan standar dekslorfeniramin maleat ... 20

3.6.3.2 Pembuatan laturan standar betametason ... 21

3.6.4 Panjang Gelombang ... 21

3.6.5 Penetuan Harga Serapan ... 22

3.6.6 Penetuan Kadar Baku Dekslorfeniramin Maleat dan Betametason ... 22

3.6.7 Pembuatan Kadar Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason ... 22

3.6.8 Perhitungan Kadar Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason ... 23

3.6.9 Analisis Hasil ... 24

3.6.9.1 Akurasi ... 24

3.6.9.2 Presisi ... 24

3.6.9.3 Analisis data penetapan kadar secara statistik ... 24

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 26

4.1 Penentuan Kurva Serapan Maksimum ... 26

4.2 Hasil Penentuan Kurva Serapan Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat ... 27

4.3 Penentuan Panjang Gelombang Penelitian ... 29

4.4 Penentuan Serapan ... 30

4.5 Kadar Teoritis Baku Campuran Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason ... 35

4.6 Hasil Penentuan Kadar Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason dalam Sediaan Tablet ... 36

4.7 Hasil Perbandingan Spektrum Serapan Campuran Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason sebelum Baku dengan Sesudah Penambahan Baku ... 38

4.8 Kadar Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason

dengan Analisis statistik ... 40

4.9 Hasil Uji Validasi ... 41

4.8.1 Hasil uji akurasi ... 42

4.8.2 Hasil uji presisi ... 42

BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ... 44

5.1 Kesimpulan ... 44

5.2 Saran ... 44

DAFTAR PUSTAKA ... 45

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

2.1 Pemeriksaan analisis campuran betametason dan

deksklorfeniramin maleat ... 8 4.4 Data perhitungan serapan betametason pengulangan 1-6 ... 30 4.7 Data perhitungan serapan deksklorfeniramin maleat pengulangan

1-6 ... 32 4.13 Data hasil perhitungan kadar, metode matriks dan % koefisien

variasi ... 37 4.14 Rentang kadar deksklorfeniramin maleat dan betametason pada

tablet dengan analisis secara statistik ... 40 4.15 Data hasil uji akurasi matriks deksklorfeniramin maleat dan

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman 2.1 Struktur Betametason ... 6

2.2 Struktur Deksklorfeniramin Maleat ... 7 2.3 Diagram Spektrofotometer Ultraviolet-Visibel ... 12 2.4 Spektrum Absorbansi Senyawa X dan Y ... 14 2.5 Spektrum Absorbansi Senyawa X dan Y, Spektrum X

Bertumpang Tindih pada Spektrum Y ... 14

2.6 Spektrum Absorbansi Senyawa X dan Y saling Tumpang

Tindih ... 15 4.1 Spektrum Serapan Maksimum Betametason

Konsentrasi 11,0 μg/mL ... 26 4.2 Spektrum Serapan Maksimum Deksklorfeniramin

Maleat Konsentrasi 21,0 μg/mL ... 26 4.3 Spektrum Serapan Betametason dengan

Konsentrasi 5,0 μg/mL - 23,0 μg/mL ... 27 4.4 Spektrum Serapan Betametason dengan

Konsentrasi 10 μg/mL - 40,0 μg/mL ... 27 4.5 Spektrum Tumpang Tindih Deksklorfeniramin

Maleat Konsentrasi 40,0 µg/mL dan Betametason

5,0 µg/mL ... 28 4.6 Spektrum Tumpang tindih Lima titik Panjang

Gelombang yang akan Digunakan ... 29 4.7 Spektrum Campuran Deksklorfeniramin Maleat dan

Betametason ... 36

4.8 Spektrum Serapan Deksklorfeniramin Maleat dan

Betametason (Sebelum Metode Adisi Standar) ... 39

4.9 Spektrum Serapan Deksklorfeniramin Maleat dan

Betametason (Sesudah Adisi Metode Adisi Standar) ... 39

DAFTAR GAMBAR DALAM LAMPIRAN

Gambar Halaman

1 Sampel Tablet O® ... 47

2 Spektrofotometer UV-Vis (Shimadzu 1800) ... 49

3 Neraca analitik (Boeco) ... 49

4 Sonikator (Branson 1510) ... 49

5 Spektrum tumpang tindih serapan dari larutan standar deksklorfeniramin maleat dan betametason ... 63

6 Kurva tumpang tindih serapan deksklorfeniramin maleat dalam berbagai konsentrasi ... 63

7 Tumpang tindih spektrum serapan deksklorfeniramin maleat konsentrasi 40,0 µ g/mL dan betametason 5,0 µg/mL ... 63

8 Spektrum serapan dari larutan baku campuran deksklorfeniramin maleat dan betametason (pengulangan) ... 64

9 Spektrum serapan dari sampel deksklorfeniramin maleat dan betametason pada sediaan O® (pengulangan) ... 66

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1 Gambar Sediaan Tablet Ocuson® . ... 47

2 Komposisi Tablet Ocuson® ... 48

3 Gambar Alat ... 49

4 Bagan Alir Prosedur Penelitian ... 50

5 Perhitungan Kadar Teoritis dari Campuran Baku Betametason dan Deksklorfeniramin Maleat ... 56

6 Data Penimbangan Baku Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason serta Kadar Teoritis ... 59

7 Contoh Perhitungan Penetapan Kadar Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason dalam Sampel ... 60

8 Data Kadar Terukur Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason ... 62

9 Spektrum Tumpang Tindih Serapan dari Larutan Standart Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason ... 63

10 Spektrum Serapan dari Larutan Baku Campuran Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason ... 64

11 Spektrum Serapan dari Sampel Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason pada Sediaan Tablet O® ... 66

12 Perhitungan Operasi Matriks Kadar Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason %KV ... 68

13 Perhitungan Operasi Matriks dan %KV Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason ... 70

14 Perhitungan Statistik Deksklorfeniramin Maleat pada Tablet O® ... 71

15 Perhitungan Statistik Betametason pada Tablet O® ... 74

16 Perhitungan %KV Deksklorfeniramin Maleat dan Betametason ... 77