39
BAB III METODOLOGI PENELITIAN
3.1. Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan di Laboratorium Mikologi BPPT dan Laboratorium Bahan Alam Pusat Penelitian Kimia LIPI Puspiptek, Serpong serta
Pusat Laboratorium Terpadu UIN Syarif Hidayatullah Jakarta. Penelitian dilaksanakan mulai bulan Oktober 2009 hingga Januari 2010.
3.2. Alat dan Bahan 3.2.1. Alat
Alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah spektrofotometer UV- Visibel Hitachi U-2001, ultra sentrifugator Beckman, sentrifius Sigma 201m,
spektrofotometer FTIR spectrum one Perkin Elmer, freez-drying telstar iyoalfa 15
,
blender, waterbath, vortex mixer, neraca analitik, magnetik stirer dan beberapa alat-alat glassware seperti beaker glass, tabung glass uji dengan tutup
ukuran 20 x 125 mm dan 16 x 125 mm, tabung glass uji tanpa tutup ukuran 16 x 100 mm, erlenmeyer, gelas ukur dan pipet ukur dan alat-alat lainnya.
3.2.2. Bahan
Bahan yang digunakan berupa jamur tiram putih Pleorotus Ostreatus yang diperoleh di pasar tradisional Ciputat. Jamur tiram yang digunakan adalah
jamur tiram yang masih segar fresh. Standar β-glukan sigma ȕ-glucan from
barley, C
6
H
10
O
5 n
9041-22-9 powder, glucose 95 sebagai standar untuk uji
39
40
kemurnian dengan FTIR, Yeast sebagai standar dalam pengukuran megazyme. Selain itu juga digunakan bahan-bahan lain selain bahan penunjang, antara lain :
Kits megazyme :
1. Botol 1 : Exo-1,3-Glucanase 100 UmL plus β-Glucosidase 20UmL,
stabil selama 4 tahun pada suhu 4
o
C = 2 mL 2.
Botol 2 : Amyloglucosidase 1630 UmL plus larutan invertase 50 vv dalam gliserol, stabil selama 2 tahun pada suhu 2
o
C atau 4 tahun pada suhu - 20
o
C. = 20 mL 3.
Botol 3 : Reagent buffer glukosa, stabil selama 2tahun pada 4
o
C atau 4 tahun pada suhu -20
o
C. = 50 mL 4.
Botol 4 : Glucose determination reagent, stabil selama 4 tahun pada suhu - 20
o
C 5.
Botol 5 : larutan standar D-Glukosa dalam 0,2 wv asam benzoat, stabil selama 4 tahun pada suhu ruang = 5mL, 1.00 mgmL
6. Botol 6 : Kontrol β-glukan, stabil selama 5 tahun pada temperature
ruang. = ~2 g
Reagent :
1. Buffer Sodium asetat 200 mM, pH 5.0
2. Buffer Sodium asetat 1,2 M, pH 3.8
3. Potasium Hidroksida KOH 2M
4. Asam Hidroklorida 37 vv, ~10M
41
3.3. Prosedur Kerja
Kategori