23
2.4.1. Prinsip Kerja Spektrofotometri UV-Visibel
Prinsip kerja dari spektrofotometri UV-Visibel adalah adanya interaksi antara radiasi pada rentang panjang gelombang 200-800 nm yang dilewatkan
terhadap suatu senyawa. Elektron-elektron pada ikatan di dalam molekul menjadi tereksitasi sehingga menempati keadaan kuantum yang lebih tinggi dan dalam
proses menyerap sejumlah energi yang melewati larutan tersebut. Semakin longgar elektron tersebut ditahan di dalam ikatan molekul, maka semakin panjang
panjang gelombang energi lebih rendah radiasi yang diserap Watson, 2005. Suatu spektrometer UV-Visibel bekerja pada daerah panjang gelombang
sekitar 200 nm pada ultra-violet dekat sampai sekitar 800 nm pada infra-merah sangat dekat. Lompatan elektron yang mungkin menyerap sinar pada daerah itu
jumlahnya terbatas. Warna-warna utama dari spektrum sinar tampak adalah:
Gambar 9. Warna pada spektrum sinar tampak Warna-warna dari spektrum sinar tampak lebih jelasnya dapat dilihat pada
tabel 4 dibawah ini :
24
Pa Pr
Po Pt
Tabel 4. Rentang panjang gelombang pada sinar tampak
Warna Panjang gelombang nm
Ungu 380 – 435
Biru 435 – 500
Sian biru pucat 500 – 520
Hijau 520 – 565
Kuning 565 – 590
Oranye 590 – 625
Merah 625 – 740
Gambar 10. Prinsip kerja cahaya yang terabsorpsi
Po = Pa + Pt + Pr dimana:
Po = intensitas sinar yang masuk Pa = intensitas sinar yang diabsorbsi
Pr = intensitas sinar yang dipantulkan Pt = intensitas sinar yang diteruskan
Ketika panjang gelombang cahaya melalui larutan kimia yang diujikan, sebagian cahaya tersebut akan diabsorbsi oleh larutan. Berdasarkan hukum
Lambert Beer’s 1852, secara kuantitatif absorbsi ini dinyatakan sebagai berikut : Log I
I
T
= ε . L. C
25
dimana I
= Intensitas cahaya sebelum melewati sampel I
T
= Intensitas cahaya setelah melewati sampel ε
= Koefisien ekstingsi, konstanta yang tergantung dari senyawa substansi dan panjang gelombang yang digunakan untuk análisis
L = Panjang atau jarak cahaya yang melewati sampel
C = Konsentrasi dari larutan yang dianalisa
2.4.2. Instrumentasi Spektrofotometer UV-Visibel