28
3.8.1 Uji Pendahuluan
Percobaan pada tahap pendahuluan ini bertujuan untuk mencari kisaran konsentrasi krisis bahan uji yang akan digunakan untuk penentuan LC
50
. Hewan uji sebanyak 6 kelompok. Setiap kelompok terdiri dari 10 ekor ikan dan
dimasukkan ke dalam akuarium yang berisi 15 L air dengan konsentrasi bahan uji adalah 0,1, 1, 10, 100, 1000 ppm ditambah kontrol 0 ppm.
Tabel 3.1 Konsentrasi Uji Pendahuluan
Kelompok Jumlah Ikan ekor
Konsentrasi ppm Kontrol
10 Akuarium 1
10 0,1
Akuarium 2 10
1 Akuarium 3
10 10
Akuarium 4 10
100 Akuarium 5
10 1000
Keterangan : a. kelompok Kontrol
: diberi air tawar 0 ppm b. kelompok Akuarium 1
: diberi EBP konsentrasi 0,1 ppm c. kelompok Akuarium 2
: diberi EBP konsentrasi 1 ppm d. kelompok Akuarium 3
: diberi EBP konsentrasi 10 ppm e. kelompok Akuarium 4
: diberi EBP konsentrasi 100 ppm f. kelompok Akuarium 5
: diberi EBP konsentrasi 1000 ppm Selama percobaan berlangsung hewan uji diberi makan. Pengamatan
dilakukan selama 7 hari dengan 2 kali pengulangan dan ikan yang mati dicatat. Pengujian dihentikan setelah mencapai hari ke-7. Hewan uji yang mati pada
waktu pengamatan segera dikeluarkan dari media uji untuk menghindari kemungkinan perubahan kualitas air yang bukan disebabkan oleh bahan uji.
Hewan uji diamati tiap konsentrasi dan dihitung secara kumulatif dalam tiap hari.
Universitas Sumatera Utara
29 Amati pula tingkah laku hewan uji dalam wadah yang diberi perlakuan
Rumampuk, dkk., 2010. Setelah diberikan bahan uji kemudian diamati gejala toksisitas dan dilihat
jumlah kematian hewan yang terjadi. Kemudian ditentukan konsentrasi yang akan digunakan sebagai acuan untuk melakukan penentuan LC
50
.
3.8.2 Penentuan LC
50
Konsentrasi yang digunakan pada penentuan LC
50
adalah sebagai berikut :
Tabel 3.2 Konsentrasi Penentuan LC
50
Kelompok Jumlah Ikan ekor
Konsentrasi ppm Kontrol
10 Akuarium 1
10 2
Akuarium 2 10
10 Akuarium 3
10 50
Akuarium 4 10
250 Akuarium 5
10 1250
Akuarium 6 10
6250 Keterangan :
a. kelompok kontrol : diberi air tawar 0 ppm
b. kelompok Akuarium 1 : diberi EBP konsentrasi 2 ppm
c. kelompok Akuarium 2 : diberi EBP konsentrasi 10 ppm
d. kelompok Akuarium 3 : diberi EBP konsentrasi 50 ppm
e. kelompok Akuarium 4 : diberi EBP konsentrasi 250 ppm
f. kelompok Akuarium 5 : diberi EBP konsentrasi 1250 ppm
g. kelompok Akuarium 6 : diberi EBP konsentrasi 6250 ppm
Setelah kisaran konsentrasi krisis ekstrak biji pepaya diketahui, maka dipilih tujuh konsentrasi sama dengan uji pendahuluan yaitu 2, 10, 50, 250, 1250,
6250 ppm ditambah kontrol 0 ppm. Ketujuh konsentrasi tersebut selanjutnya digunakan dalam penentuan LC
50
Abel, 1991 dalam Rumampuk, dkk., 2010.
Universitas Sumatera Utara
30 Hewan uji sebanyak 10 individu dimasukkan ke dalam setiap wadah
percobaan 7 wadah uji yang berisi 15 L air dan bahan uji dengan konsentrasi yang telah ditentukan, setiap perlakuan dan pengamatan dilakukan selama 7 hari
dengan 3 kali ulangan dan ikan yang mati dicatat. Hewan uji diamati pada tiap konsentrasi dan dihitung secara kumulatif dalam tiap hari.
3.9 Pengamatan
Kategori