Gambar 3. Kurva serapan derivat pertama sampai derivat keempat
2.4.2 Metode Spektrofotometri Derivatif
Ada tiga metode spektrofotometri derivatif yang sering digunakan dalam anlisa kuantitatif antara lain metode zero crossing, metode peak to peak dan
metode multivariate spectrrophotometric calibration. Panjang gelombang zero crossing adalah panjang gelombang dimana senyawa tersebut mempunyai serapan
nol dan menjadi panjang gelombang analisis untuk zat lain dalam campurannya.
Gambar 4. Kurva sederhana aplikasi zero crossing z
Panjang gelombang peak to peak ditentukan dari penggabungan spektrum derivatif larutan baku dan sampel analit. Dari hasil penggabungan spektrum
derivatif tersebut, dicari daerah panjang gelombang dimana terdapat spektrum yang saling berimpit satu sama lain secara total Hayun, 2006.
2.4.3 Penggunaan Spektrofotometri Derivatif
Spektrofotometri derivatif banyak digunakan untuk zat-zat dalam suatu campuran yang spektrumnya saling mengganggu atau
tumpang tindih overlapping dimana zat-zat tersebut dapat larut dalam pelarut yang sama serta
Universitas Sumatera Utara
memiliki serapan maksimum pada panjang gelombang yang berdekatan. Sebagai contoh penetapan kadar campuran pseuoefedrin HCl, triprolidin HCl dan
dekstrometorfan HBr Watson, 2007, penetapan kadar efedrin dan zat warna dalam sediaan sirup Cairns, 2008, penetapan kadar campuran parasetamol dan
ibuprofen Hassan, 2008, penetapan kadar campuran parasetamol, kafein dan salisilamid Wulandari, 2006,
penetapan kadar dekstrometorfan HBr dan gliserilguaiakolat dalam sediaan tablet dan sirup obat batuk, campuran tetrasiklin
dan oksitetrasiklin, penetapan kadar teofilin dan efedrin HCl dalam sediaan tablet, penetapan kadar campuran vitamin B kompleks Hayun,2006. Selain dalam
bidang farmasi, spektrofotometri derivatif telah diaplikasikan secara luas di dalam analisis lingkungan, klinik, forensik, biomedik, dan industri Skujins and
Varian, 2006.
2.4.4 Komponen Spektrofotometer Derivatif
Komponen-komponen pada spektrofotometer UVVis biasa sama dengan komponen pada spektrofotometer derivatif. Alat spektrofotometer harus
dilengkapi dengan peralatan sedemikian rupa untuk dapat menghasilkan spektrum derivatif Ditjen POM, 1995. Biasanya spektrofotometer telah mempunyai
software untuk mengolah data yang dapat dioperasikan malalui komputer yang telah terhubung dengan spektrofotometer Moffat, 2007.
2.5 Validasi Metode Analisis
