dengan cara menambahkan 20 µl larutan stok aspirin 2 x 10
-1
M ke dalam organ bath 40,0 ml yang telah berisi larutan tirode.
3.9 Tahapan Pengujian
3.9.1 Preparasi organ
Marmut jantan ditimbang dan kemudian marmut dikorbankan dengan cara dislokasi tulang belakang kepala cervix. Dilakukan pembedahan pada bagian
abdomen, kulit bagian abdomen dipotong dengan menggunakan gunting. Usus dibersihkan dari lapisan mesenteric yang melindunginya. Saat jaringan sudah
rileks, dipotong segmen usus bagian bawah yang mendekati caecum sepanjang 2-3 cm. Dengan menggunakan jarum kedua ujung potongan usus diikat dengan
benang pada arah yang berlawanan. Benang bagian bawah usus diikatkan pada batang penahan jaringan dan benang bagian atas usus dihubungkan ke transduser
daya Lampiran 28 halaman 100. Jaringan usus halus dimasukkan kedalam organ bath yang berisi larutan tirode, dengan suhu larutan dipertahankan 37 ºC sambil
diaerasi dengan karbogen secara terus menerus. Jaringan yang telah terisolasi diinkubasi selama 30 menit dengan pergantian larutan tirode setiap 10 menit.
Dibiarkan beberapa saat sampai kondisi ritmik yang optimal Vogel, et al., 2002.
3.9.2 Pengujian kontraksi seri konsentrasi asetilkolin terhadap otot polos
ileum
Pengujian terhadap agonis muskarinik dilakukan untuk mengukur batas maksimum yang dapat ditunjukkan terhadap kontraksi ileum marmut, guna untuk
mendapatkan konsentrasi submaksimum atau Effective Concentration EC
80
asetilkolin. Pengukuran dilakukan secara bertingkat dengan pemberian kumulatif asetilkolin sehingga diperoleh konsentrasi di dalam organ bath 10
-8
sampai
Universitas Sumatera Utara
3 x 10
-3
M Tabel 3.1. Ileum marmut yang telah diekuilibrasi selama 45 menit dengan pergantian larutan tirode tiap 15 menit diberikan larutan asetilkolin
dengan konsentrasi didalam organ bath 10
-8
sampai 3 x 10
-3
M otot polos ileum
marmut menunjukkan respons kontraksi maksimum. Tabel 3.1
Pemberian asetilkolin secara kumulatif pada organ bath volume 40 ml.
Konse ntrasi larutan baku Ase tilkolin M
Volume yang ditambahkan ke dalam
organ bath μl
Konse ntrasi Ase tilkolin dalam
organ bath M
2x10
-6
200 1x10
-8
2x10
-6
400 3x10
-8
2x10
-5
140 1x10
-7
2x10
-5
400 3x10
-7
2x10
-4
140 1x10
-6
2x10
-4
400 3x10
-6
2x10
-3
140 1x10
-5
2x10
-3
400 3x10
-5
2x10
-2
140 1x10
-4
2x10
-2
400 3x10
-4
2x10
-1
140 1x10
-3
2x10
-1
400 3x10
-3
3.9.3 Pengujian efek relaksasi ekstrak etanol daun Pugun Tanoh pada
