Dewi, dkk., 2002 dan Handayani, dkk., 2003 telah menemukan residu antibiotika dengan menggunakan metode mikrobiologi, berupa golongan
antibiotika tetrasiklin, penisilin, aminoglikosida, dan makrolida pada sampel produk asal hewan baik daging segar maupun daging olahan yang diambil dari
pasar tradisional dan rumah potong hewan di wilayah Kabupaten Badung Bali, Nusa Tenggara Barat dan Nusa Tenggara Timur.
Hasil penelitian Karlina, 2011 telah menemukan residu kloramfenikol pada telur yang beredar di Sumatera Utara sebesar 0,0752 - 0,1937 µgg secara
analisa KCKT, dimana kadar yang diperoleh melebihi persyaratan yang ditetapkan oleh pemerintah. Kristina 2011 menemukan kadar tetrasiklin yang
melebihi batas kadar yang ditetapkan oleh pemerintah dalam daging ayam yang diambil dari pasar swalayan di kota Medan secara spektrofotometer UV sebesar
4,9141 dan 8,5556 µgg. Hal lain yang perlu diingat adalah bahwa antibiotika tidak dapat
seluruhnya diekskresi dari jaringan tubuh ternak, seperti : daging, air susu dan telur. Hal ini berarti sebagian antibiotika masih tertahan dalam jaringan tubuh
sebagai bentuk residu.
2.4 Batas Toleransi Residu Antibiotik
Keamanan pangan asal ternak berkaitan erat dengan pengawasan pemakaian antibiotika dan “obat hewan” yang tergolong obat keras perlu
memperhatikan waktu henti sehingga diharapkan residu tidak ditemukan lagi atau berada di bawah Batas Maksimum Residu BMR. Berdasarkan Standar Nasional
Indonesia SNI No. 01-6366-2000, batas maksimum residu antibiotika dalam makanan yang masih boleh dikonsumsi untuk antibiotika amoksisilin, ampisilin
Universitas Sumatera Utara
dan kloramfenikol adalah 0,01 µgg dan batas maksimum residu antibiotika tetrasiklin adalah 0,1 ugg.
2.5 Penentuan Residu Antibiotik dalam Sampel Makanan
Metode penentuan multi-residu yang semakin penting, untuk kontrol residu dalam produk makanan. Metode ini menguntungkan dibandingkan dengan
metode residu untuk senyawa tunggal karena metode ini lebih mudah dilakukan dan lebih murah dalam hal penggunaan pereaksi.
Analisa multi-residu dalam sampel makanan dapat dilakukan melalui 2 cara yaitu penentuan secara kualitatif skrining dan penentuan secara kuantitatif
konfirmasi Shankar et al, 2010. Metode analisa untuk melakukan uji kualitatif terhadap residu dalam
sampel makanan memiliki kriteria seperti metode memberikan hasil yang akurat, memiliki sensitifitas yang baik ,reprodusibel, biaya pengerjaannya murah,
kemampuan untuk mendeteksi analit yang akan dianalisis Shankar et al, 2010. Telah banyak penelitian mengenai metode analisa multiresidu untuk golongan
antibiotika dengan menggunakan LCMS. O’Keeffe, 1999 telah mengembangkan metode penentuan multiresidu sulfonamide, antibiotika golongan β-laktam dan
tetrasiklin pada telur secara KCKT-MS. Penelitian ini memperoleh hasil bahwa metode ini sangat sensitif karena dapat mendeteksi keberadaan residu pada kadar
50-300 ppb part per billion. Metode multiresidu untuk residu obat hewan di produk makanan
dilaporkan oleh Zhou et.al, 2006 berhasil menggunakan kromatografi cair spektrometri massa dengan mengembangkan metode untuk penentuan secara
bersamaan 30 jenis antibiotika yang terdapat pada daging yang dikonsumsi oleh
Universitas Sumatera Utara
manusia. Fang et al, 2007 telah melakukan uji kualiatif dan uji kuantitatif residu kloramfenikol yang terdapat pada madu, udang, dan daging ayam menggunakan
alat KCKT-MS. Hasil penelitian menunjukkan bahwa metode yang digunakan dapat mendeteksi keberadaan residu antibiotika dengan batas deteksi hingga 100
ppb. Prosedur penyiapan sampel sangat menentukan dalam analisa secara
kromatografi Rohman, 2009. Penyiapan sampel dari bahan yang memiliki matriks yang komplek seperti daging, ginjal atau hati sangat diperlukan supaya
hasil uji kualitatif memiliki sensitifitas yang baik Shankar, 2010. Ekstraksi pada sampel bertujuan mengurangi atau menghilangkan adanya partikulat dari matriks
sampel sehingga akan mengganggu proses analisa terutama menggunakan analisa secara kromatografi Rohman, 2009.
Penyiapan sampel dari daging biasanya dimulai dengan tahap pemotongan, menghaluskan sampel, menghomogenisasi, dan ekstraksi dengan
larutan organik Shankar, 2010.
2.6 Teori Kromatografi