2.6.1.1 Jenis Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
Kromatografi cair kinerja tinggi KCKT dapat dibagi menjadi beberapa metode, yakni: kromatografi fase normal normal phase chromatography,
kromatografi fase balik reversed-phase chromatography, kromatografi penukar ion ion-exchange chromatography dan kromatografi eksklusi ukuran size
exclusion chromatography Kazakevich and Lobrutto, 2007. Kromatografi fase balik merupakan kebalikan dari kromatografi fase
normal. Kromatografi fase balik menggunakan fase diam yang bersifat nonpolar, dan fase geraknya yang relatif lebih polar daripada fase diam. Fase diam yang
umum digunakan adalah oktadesilsilan ODS atau C18. Hampir 90 senyawa kimia dapat dianalisis dengan kromatografi jenis ini Meyer, 2004; Kazakevich
and Lobrutto, 2007.
2.6.1.2 Proses Pemisahan dalam Kolom Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
Pemisahan analit dalam kolom kromatografi berdasarkan pada aliran fase gerak yang membawa campuran analit melalui fase diam dan perbedaan interaksi
analit dengan permukaan fase diam sehingga terjadi perbedaan waktu perpindahan setiap komponen dalam campuran Kazakevich and Lobrutto, 2007.
Menurut Meyer 2004 seperti yang ditunjukkan proses pemisahan yang terjadi di dalam kolom dapat dilihat pada gambar 1 yaitu contohnya, campuran
dua komponen dimasukkan ke dalam sistem kromatografi partikel ● dan ▲
Gambar 1.1a. Di mana komponen ▲ cenderung menetap di fase diam dan
komponen ● lebih cenderung di dalam fase gerak Gambar 1.1b.
Universitas Sumatera Utara
Gambar 1.1. Ilustrasi proses pemisahan yang terjadi di dalam kolom
KCKT. Masuknya eluen fase gerak yang baru ke dalam kolom akan
menimbulkan kesetimbangan baru, molekul sampel dalam fase gerak diadsorpsi sebagian oleh permukaan fase diam berdasarkan pada koefisien distribusinya,
sedangkan molekul yang sebelumnya diadsorpsi akan muncul kembali di fase gerak Gambar 1.1c. Setelah proses ini terjadi berulang kali, kedua komponen
akan terpisah. Komponen ● yang lebih suka dengan fase gerak akan berpindah
lebih cepat daripada komponen ▲ yang cenderung menetap di fase diam,
sehingga komponen ● akan muncul terlebih dahulu dalam kromatogram,
kemudian diikuti oleh komponen ▲ Gambar 1.1d Meyer, 2004.
2.6.1.3 Istilah Umum Kromatografi Cair Kinerja Tinggi 2.6.1.3.1 Waktu Tambat
Kategori