UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
penangkapan proton. Protein yang tidak bermuatan tidak dapat bergerak pada medan listrik Fatchiyah, 2011.
Hampir semua protein mempunyai pH kurang dari 8,0. Oleh karena itu, pH buffer elektroforesis yang berkisar 8
–9 akan menyebabkan sebagian besar protein bermuatan negatif yang akan bergerak ke anoda Fatchiyah,
2011.
2.9.3 Buffer
Sistem buffer digunakan untuk mempertahankan pH didalam reservoir dan didalam medium penyangga, disamping itu sistem buffer
berfungsi sebagai elektrolit pembawa aliran listrik. Buffer yang digunakan harus berinteraksi dengan molekul yang dipisahkan dan pH yang digunakan
harus sesuai sehingga campuran molekul dapat dipisahkan satu sama lain tetapi tidak mengakibatkan denaturasi. pH dipilih berdasarkan jenis campuran
yang akan dipisahkan, umumnya pemisahan maksimal dapat dicapai pada titik isolistrik Bintang, 2010.
2.9.4 Medan Listrik
Sumber arus listrik yang stabil diperlukan untuk menghasilkan aliran listrik dengan voltase yang konstan. Kekuatan ionik medan listrik pada
kisaran 2 –8 V cm sesuai untuk suhu ruang. Apabila kekuatan medan magnet
lebih besar dari 10 V cm, maka akan terjadi kehilangan air yang besar karena proses penguapan akibat dari panas yang ditimbulkan. Larutan buffer
kemudian dialirkan kedalam tangki penyangga untuk menggantikan air yang hilang, dan ini mengakibatkan pergeseran pita
–pita. Pemanasan yang berlebih menyebabkan senyawa senyawa terdenaturasi. Metode
–metode pendinginan medium pemisahan dapat dilakukan, sehingga kekuatan medan 100V cm
dapat digunakan. Keuntungan elektroforesis pada voltase tinggi adalah terjadinya pemisahan yang cepat Bintang, 2010.
UIN Syarif Hidayatullah Jakarta
BAB III METODE PENELITIAN
3.1 Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di Pusat Laboratorim Terpadu PLT UIN Syarif Hidayatullah Jakarta, selama 4 bulan, terhitung bulan Desember 2014-
Maret 2015.
3.2 Bahan Penelitian
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah gelatin babi technical dan gelatin technical yang didapatkan dari PT. EMS Indonesia,
sampel kapsul lunak Pharmaton Formula, Obipluz, Omepros dan Nature E yang didapat dari Apotek Kimia Farma, jalan Ir. H. Juanda No. 111
Situgintung-ciputat, Tangerang Selatan, Banten. Bahan kimia yang digunakan larutan Akrilamid Bis 30;
2,67C; SDS 10
w v
, sampel buffer Tris HCl 0,5 M; Glycerol; SDS dan Bromophenol Blue, Tris HCl 0,5 M pH 6,8, gliserin, enzim pepsin from
porchine gastric mucosa, P7000-25G Sigma-aldrich, SDS Sodium Dodecyl Sulphate 10, aquades, Bromophenol Blue, 2-merkaptoethanol, Natrium
asetat, asam asetat glacial, Ammonium persulfate for electroforesis 98 sigma-ald A3678-25G, Coomasie Briliant blue R250 Bio-Rad, asam asetat
pekat, TEMED N,N,N;,N’ –tetra metil etilen diamin E.Merc, HCl 6N,
protein standar prestained broad range catalog 161-0317 Bio-Rad, Larutan Running buffer Tris basa, Glycerol dan SDS, larutan pewarna 0,1
commasie blue dalam larutan metanol : air : asam asetat 5:5:2, marker protein prestained SDS-PAGE standar broad range dari Bio-Rad dengan
