0,1 ml untuk 3 tabung berisi LBSS. Inkubasi dengan suhu 37
7. Menghitung jumlah tabung reaksi yang positif ditandai dengan
adanya gas pada tabung durham atau kekeruhan. Melihat daftar MPN untuk menghitung jumlah bakteri per ml kemudian kalikan
dengan 1pengenceran ditengah. C
selama 2 x 24 jam.
b. Uji Penegasan
1. Alat : 1. Jarum Ose
2. Pembakar Bunsen 3. Incubator
4. Cawan petri 5. Tabung reaksi
2. Media 1. Brila Green Laktose Bile Broth BGLBB
3. Cara Kerja : 1.
Mensterilkan jarum ose terlebih dahulu. 2.
Mengambil sampel pada uji pendugaan yang positif dengan menggunakan jarum ose.
3. Kemudian, diinokulasikan pada media BGLBB.
4. Setelah itu menginkubasi selama 2x24 jam pada suhu 37
C.
Universitas Sumatera Utara
5. Diamati terbentuknya gas pada setiap tabung, jumlah tabung
BGLBB yang positif gas dicatat dan hasilnya dirujuk ke tabel MPN.
c. Uji pelengkap
1. Mensterilkan jarum ose terlebih dahulu.
2. Mengambil sampel pada uji penegasan yang positif dengan
menggunakan jarum ose. 3.
Kemudian diinokulasi lagi pada media EMB Agar. 4.
Setelah itu menginkubasi selama 2x24 jam pada suhu 37 5.
Diamati koloni hijau metalik. C.
3.6.2.3 Pemeriksaan bakteri Salmonella pada daging sapi
1. Alat dan Bahan
a. Alat
1.
Cawan petri
2.
Tabung reaksi
3.
Pipet serologi
4.
Pinset
5.
Jarum okulasi ose
6.
Alu dan lumpang
7.
Pembakar bunsen
8.
Timbangan
9.
Magnetic stirrer
10.
vortex
Universitas Sumatera Utara
11.
Inkubator
12.
Penangas air
13.
Autoclave
14.
Lemari steril clean benchi
15.
Lemari pendingin 2.
Media : SSA Salmonella shigella Agar 3.
Cara kerja Setiap proses pengujian selalu disertai dengan menggunakan
kontrol positif, metode yang digunakan dalam perhitungan kandungan Salmonella sp. ini adalah sebagai berikut :
1. Menimbang sampel daging sebanyak 25 gram secara aseptik
kemudian ditambahkan 100 Nacl steril dan dimasukkan ke dalam tabung erlenmeyer.
2. kemudian ambil 1 ml suspensi diatas masukkan ke dalam 9 ml Nacl
steril untuk memperoleh pengenceran 10
1
3. Dari pengenceran 10
.
1
4. Menginkubasi pada temperatur 35
diambil 1 ml dan disebarkan pada media SS Agar.
5. Kemudian diamati apakah ada koloni putih dengan bintik hitam.
C selama 24 jam ± 2 jam.
3.6.2.4 Pemeriksaan bakteri Staphylococcus aureus pada daging sapi
1. Alat a. Alat :
1. Serologikal pipet
Universitas Sumatera Utara
2. Alu dan lumpang 3. Tabung Reaksi
4. Cawan petri 5. Pro pipet
6. Gelas ukur 2. Media : MSA Manitol Salt Agar
3. Cara kerja pembiakan bakteri Staphylococcus aureus 1.
Menimbang sampel daging sebanyak 10 gram secara aseptik kemudian ditambahkan 90 Nacl steril dan dimasukkan ke dalam
tabung erlenmeyer. 2.
kemudian ambil 1 ml suspensi diatas masukkan ke dalam 9 ml Nacl steril untuk memperoleh pengenceran 10
1
3. Pengenceran 10
.
1
4. Kemudian ambil 1 ose dan goreskan ke dalam cawan petri yang telah
berisi media M.S.A. diambil 1 ml.
5. Kemudian masukkan ke inkubator selama 24 jam pada suhu 37
6. Kemudian amati apakah ada koloni berwarna kuning.
c.
3.7 Metode Pengukuran
