BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN
3.1 Waktu dan Tempat Penelitian
Penelitian ini dimulai pada Juni 2010 dan berakhir pada Februari 2011. Tempat kegiatan pemeliharaan dan perlakuan hewan coba, yaitu di Fasilitas
Kandang Hewan Percobaan Bagian Patologi, FKH IPB. Kegiatan pembuatan dan pengamatan preparat histologi dilaksanakan di Laboratorium Histopatologi
Bagian Patologi, Departemen Klinik, Reproduksi dan Patologi, Fakultas Kedokteran Hewan, Institut Pertanian Bogor.
3.2 Bahan dan Alat
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini, yaitu hewan coba mencit Mus musculus
berumur 4 minggu sebanyak 72 ekor 36 ekor jantan dan 36 ekor
betina. Bahan yang digunakan dalam pemeliharaan mencit pada penelitian ini adalah pakan berupa pelet pakan mencit komersial, air mineral isi ulang untuk
minum mencit, desinfektan, anthelmintik Albendazole
®
5 produksi Sanbe dosis 10 mgkg bobot badan, antibiotik Clavamox
®
25 mg kg bobot badan Gambar 11 dan anti protozoa Flagyl
®
30 mgkg bobot badan. Proses pembuatan preparat histologi dan pewarnaan HE Haematoxylin Eosin dibutuhkan Buffer Neutral
Formalin BNF 10, NaCl fisiologis, aquadest, alkohol konsentrasi bertingkat
70, 80, 90, 96, alkohol absolut, xylol, HE, lithium karbonat, perekat albumin, dan parafin. Pewarnaan PAS dibutuhkan reagen schiff, air sulfit, Gill’s
haematoxylin , larutan periodic acid 1, dan aquadest. Bahan perlakuan berupa
ekstrak minyak jintan hitam dan kombinasi ekstrak minyak jintan hitam dan madu dengan dosis yang berbeda untuk masing-masing perlakuan.
Alat yang dipergunakan selama penelitian ini berlangsung diantaranya, yaitu box plastik sebagai kandang dengan ukuran panjang 34.5 cm, lebar 28 cm, tinggi
12 cm, anyaman jaring kawat penutup kandang, kain alas, botol minum yang dilengkapi saluran air, box pakan, dispenser, sonde lambung 1.5 x 80 mm, spoit
1 ml Gambar 10, sarung tangan, masker, sikat, hanger, timbangan digital Precisa 3000 D, kertas label, tissue gulung, gelas ukur 50 ml, dan lemari
pendingin. Alat nekropsi yang digunakan adalah 1 paket alat bedah gunting kecil, pinset, dan scalpel, kantung plastik hitam, spidol waterproof permanen, 1 gulung
aluminium foil, 7 buah sterofoam, jarum pentul, dan botol plastik. Pembuatan preparat menggunakan tissue cassete, pensil, Sakura
®
automatic tissue processor, mikrotom, pencetak parafin, parafin blok console, pinset anatomis, gelas objek,
gelas penutup, inkubator, mikroskop cahaya, digital electronic eyepiece camera, satu set komputer, dan perangkat lunak Image J
®
for Microsoft.
Gambar 10 Sonde lambung dan spoit.
Gambar 11 Antibiotik Clavamox
®
.
3.3 Metode Penelitian 3.3.1 Persiapan Laboratorium dan Kandang
Kategori