Pengamatan Rancangan percobaan Pemilihan tunas manggis Inokulasi Bakteri A. rhizogenes terhadap Tunas Manggis

f. Pengamatan

Peubah yang diamati meliputi saat munculnya tunas, jumlah tunas yang tumbuh dan persentase yang bertunas. Pengamatan dalam percobaan ini dilakukan tanpa mengeluarkan eksplan dari botol kultur. Tunas-tunas yang tumbuh tersebut digunakan untuk percobaan induksi perakaran eksplan tunas manggis secara in vitro. Percobaan B. Induksi perakaran eksplan tunas manggis dengan Agrobacterium rhizogenes melalui kultur in vitro Percobaan ini bertujuan untuk mendapatkan strain A. rhizogenes yang dapat menginduksi perakaran eksplan tunas manggis secara in vitro.

a. Rancangan percobaan

Percobaan ditata dalam Rancangan Acak Lengkap RAL perlakuan berupa transformasi beberapa strain A. rhizogenes pada ekspan manggis, yaitu : G = Kontrol WPM + 5 mgl IBA G 1 = 509 G 2 = ATCC-15834 G 3 = ATCC-8196 G 4 = 01-1724 G 5 = A4 G 6 = 07-2001 G 7 = R-1000 Setiap perlakuan diulang 10 kali, masing-masing botol kultur terdiri atas 3 eksplan dan setiap satuan percobaan terdiri atas 3 botol kultur. Kultur dipelihara dalam ruang kultur yang bertemperatur 26 o C dengan intensitas cahaya sekitar 1000 lux selama 16 jam.

b. Pemilihan tunas manggis

Tunas manggis dari media multiplikasi in vitro, dipilih yang berukuran tinggi ≥ 2,5 cm, berdaun sepasang dan bobot basah sekitar 1 g, dipotong bagian pangkalnya kemudian siap diinokulasi dengan A. rhizogenes.

c. Inokulasi Bakteri A. rhizogenes terhadap Tunas Manggis

Tunas manggis yang terpilih diinokulasikan dengan bakteri A. rhizogenes menurut metode Damiano et al. 1995 yang dimodifikasi Charity 2002. Eksplan manggis tanpa biji diinokulasi dengan cara, bagian dasar batang manggis dicelupkan dalam 0.5 ml suspensi bakteri A. rhizogenes OD 600 = 1.0 yang ditumbuhkan seperti Penelitian I, kemudian di vakum selama 15 menit. Untuk tunas manggis dengan biji inokulasi dilakukan dengan cara pangkal batang ditusuk menggunakan jarum steril yang sudah dicelupkan dalam suspensi bakteri A. rhizogenes. Setelah itu tunas dikeringkan dengan kertas saring dan dikulturkan dalam medium WPM disimpan selama 2 hari di ruang gelap, kemudian dicuci dengan akuades steril 5 kali, dikeringkan dengan kertas saring, direndam dalam 250 mgl cefotaxime selama 10 menit dan dikulturkan pada media WPM yang mengandung 500 mgl cefotaxime. Konsentrasi cefotaxime diturunkan secara bertahap menjadi 250 dan 100 mgl pada masing- masing subkultur sampai tidak terjadi kontaminasi.

d. Pembuatan media aklimatisasi

Dokumen yang terkait

Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Kulit Manggis (Garcinia mangostana L) terhadap Perubahan Kadar Enzim AST, ALT serta Perubahan Makroskopik dan Histopatologi Hati Mencit Jantan (Mus musculus L) strain DDW setelah diberi Monosodium Glutamate (MSG) diban

1 68 118

Pengaruh Penambahan Ekstrak Kulit Manggis (Garcinia X Mangostana L.) Terhadap Nilai Spf Krim Tabir Surya Kombinasi Avobenson Dan Oktil Metoksisinamat

4 100 106

Pengaruh Ekstrak Kulit Manggis (Garcinia mangostana L.) terhadap Gambaran Histopatologis Lambung Tikus (Rattus norvegicus L.) Jantan yang Dipapari Kebisingan

2 103 56

Pengaruh Ekstrak Kulit Manggis (Garcinia mangostana L.) terhadap Hitung Leukosit dan diferensiasi Leukosit Tikus (Rattus noevegicus L.) Jantan Setelah Dipapari Kebisingan

0 58 58

Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Kulit Buah Manggis (Garcinia Mangostana.L) Terhadap Perubahan Makroskopis, Mikroskopis dan Tampilan Immunohistokimia Antioksidan Copper Zinc Superoxide Dismutase (Cu Zn SOD) Pada Ginjal Mencit Jantan (Mus Musculus.L) Stra

3 48 107

Pengendalian Kutu Putih pada Buah Manggis (Garcinia mangostana L.) dengan Insektisida Botani

11 121 93

Evaluasi Lahan Untuk Pengembangan Tanaman Manggis (Garcinia mangostana L.) di Kabupaten Mandailing Natal

4 42 82

Pengaruh Ekstrak Kulit Manggis (Garcinia mangostana L.) Terhadap Fungsi Hati, Jumlah Eritrosit dan Kadar Hemoglobin Tikus (Rattus norvegicus) yang Dipapari dengan Karbon Tetraklorida (CCl4)

3 53 59

Peningkatan perakaran bibit manggis melalui inokulasi agrobacterium rhizogenes

0 22 143

Pertumbuhan Bibit Tanaman Manggis (Garcinia mangostana L.) Setelah Inokulasi dengan Berbagai Galur Agrobacterium rhizogenes

0 0 8