Penetapan eritema Orientasi penetapan lama penyinaran UV A Orientasi penetapan waktu pengamatan eritema Orientasi penetapan waktu pemberian kontrol positif Orientasi penetapan lama masa pemberian ampas wortel

70, diambil dan ditimbang 2 gram untuk kemudian diberikan selama 4 jam dan disesuaikan pada lama masa pemberian yang telah ditentukan.

2. Penyiapan hewan uji

Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah kelinci putih betina, usia 4 – 6 bulan, tidak sedang mengandung dan mempunyai berat 1,5 – 2 kg. Sebelum digunakan, pada bagian punggung kelinci dicukur bulunya hingga bersih sesuai daerah yang ditentukan yaitu 4 cm 2 dan diadaptasikan dalam kandang secara individual selama 10 hari. Selama adaptasi kelinci hanya diberi makan rumput dan kangkung.

3. Penetapan eritema

Eritema yang akan diamati terlebih dahulu ditetapkan dengan memberi nilai skala dan skor sesuai dengan warna merah yang terbentuk dan tingkat keparahannya.

4. Orientasi penetapan lama penyinaran UV A

Sembilan daerah kulit punggung kelinci seluas 4 cm 2 , yang telah dibersihkan bulunya, dibagi menjadi 3 kelompok. Masing–masing kelompok diradiasi dengan lampu TL UV A, λ 352 nm dengan lama penyinaran masing- masing 3, 6, dan 10 jam. Eritema yang terbentuk diamati pada jam ke 0, 24, 48, dan 72 dan dicatat dalam bentuk skor sesuai dengan skala eritema yang telah ditetapkan. Lama penyinaran UV A penginduksi eritema ditetapkan pada kelompok penyinaran yang dapat menimbulkan eritema kuat.

5. Orientasi penetapan waktu pengamatan eritema

Lima daerah kulit punggung kelinci yang sudah disiapkan seperti sebelumnya diradiasi dengan UV A selama 10 jam. Selanjutnya kelima daerah tersebut di amati pada jam ke-0, 12, 24, 36, dan 48. Waktu pengamatan eritema ditetapkan pada saat eritema maksimal terbentuk.

6. Orientasi penetapan waktu pemberian kontrol positif

Sebanyak sembilan daerah kulit uji 4 cm 2 dibagi menjadi 3 kelompok. Tiap kelompok diolesi tipis-tipis krim hidrokortison asetat Bufacort® dengan variasi waktu pemberian 15, 30, dan 60 menit sebelum diradiasi dengan UV A selama 10 jam. Selanjutnya eritema diamati pada jam ke-24. Dosis pemberian kontrol positif yang dipilih adalah pemberian yang lebih efektif dalam menghambat terbentuknya eritema.

7. Orientasi penetapan lama masa pemberian ampas wortel

Delapan belas daerah kulit punggung kelinci dibagi dalam 6 kelompok. Tiap kelompok diberikan ampas wortel dengan cara ditempelkan menggunakan plester dan kain kasa selama 4 jam. Lama masa pemberian yang digunakan adalah 1, 2, 3, 4, 5 dan 6 hari. Selanjutnya untuk setiap kelompok diradiasi UV A selama 10 jam dan diamati eritemanya pada jam ke-24.

8. Pengujian efek anti inflamasi