Pada posisi piston tabung suntik di bagian distal, jarum diinsersi ke dalam massa tumor.
2. Piston semprit cepat ditarik dan tekanan negatif akan menyebabkan materi tertarik ke dalam jarum.
3. Jarum digerakkan dengan cepat ke muka dan ke belakang supaya materi cukup terisap.
4. Supaya jarum ditarik dari lesi, tekanan dalam semprit harus dibuat sama dengan tekanan diluar semprit dengan membiarkan melepaskan
piston kembali sendirinya pada posisi terdahulu. 5. Sempit dengan jarum ditarik dari lesi.
6. Jarum dilepaskan dari semprit, piston ditempatkan pada bagian tengah semprit.
7. Jarum kembali diletakkan pada semprit dan aspirat yang ada di dalam ujung jarum disemprot diteteskan ke atas kaca objek dengan menekan
piston.
18
3.7.2. Prosedur pewarnaan sitologi dengan Diff-Quik Stain Set
1. Celupkan sediaan ke dalam larutan fiksatif selama 5 detik 5 kali celup masing-masing satu detik. Kelebihannya biarkan mengalir.
2. Celupkan sediaan ke dalam larutan I selama 5 detik 5 kali celup masing-masing satu detik. Kelebihannya biarkan mengalir.
3. Celupkan sediaan ke dalam larutan I selama 5 detik 5 kali celup masing-masing satu detik. Kelebihannya biarkan mengalir.
Reno Keumalazia Kamarlis : Tampilan imunositokimia HER2neu pada biopsi aspirasi jarum halus penderita kanker payudara, 2009
USU Repository © 2008
4. Cuci sediaan dengan air destilasi atau air diionisasi. 5. Keringkan dan siap untuk dibaca.
3.7.2. Prosedur kerja Imunositokimia HER2neu pada sediaan hapus
1. Buat sediaan hapus, fiksasi dalam metanol absolut. 2. Cuci dalam air mengalir selama 5 menit.
3. Bloking endogen peroksida metanol + H2O2 selama 30 menit. 4. Cuci dalam air mengalir selama 5 menit.
5. Pretreatment
dengan Tris EDTA pada microwave
: -
Cook I, power level high selama 5 menit
- Cook II, power level warm
selama 5 menit Dinginkan selama lebih kurang 45 menit
6. Cuci dalam PBS pH 7,4 sebanyak 3x, masing-masing selama 5 menit.
7. Tandai populasi sel dengan Pap pen. 8. Teteskan antibodi primer dengan pengenceran 150, diamkan selama
overnight .
9. Cuci dengan PBS pH 7,4 selama 5 menit atau sampai bersih. 10. Teteskan Envision plus, diamkan selama 30 – 45 menit.
11. Cuci dengan PBS pH 7,4 + Twin 20 selama 5 menit atau sampai bersih.
12. Teteskan kromogen DAB, diamkan selama 10 menit. 13. Cuci dengan air mengalir selama 5 menit.
14. Counterstain
dengan Hematoxyilin Mayers selama 5 – 10 menit.
Reno Keumalazia Kamarlis : Tampilan imunositokimia HER2neu pada biopsi aspirasi jarum halus penderita kanker payudara, 2009
USU Repository © 2008
15. Cuci dengan air mengalir selama 5 menit. 16. Masukkan ke dalam larutan litium karbonat jenuh 5 dalam
akuades. 17. Birukan dalam air mengalir.
18. Dehidrasi alkohol 80, alkohol 96, alkohol absolut, alkohol absolut masing-masing selama 5 menit.
19. Clearing
xylol I, xylol II, xylol III masing-masing selama 5 menit. 20
. Mounting , tutup dengan entelan.
21. Sediaan siap untuk dibaca.
3.8. Alat-alat penelitian dan bahan penelitian 3.8.1. Alat-alat penelitian
