Seri Pengenceran BAHAN DAN METODE

25 2. Dua koloni yang bertumpuk dihitung satu koloni. 3. Beberapa koloni yang berhubungan dihitung satu koloni. 4. Dua koloni yang berhimpitan dan masih dapat dibedakan dihitung dua koloni. 5. Koloni yang terlalu besar lebih dari setengah luas cawan tidak dihitung 6. Koloni yang besar kurang dari setengah luas cawan dihitung satu koloni. 25 Jumlah koloni yang ada dalam contoh cawan petri tersebut dapat dihitung dengan menggunakan rumus sebagai berikut. Koloni per ml = jumlah koloni per cawan x 1

c. Metode MPN

faktor pengenceran Selanjutnya hasil tersebut dikonversi ke dalam jumlah mikrob dalam 1 gram berat kering mutlak sampel. Metode yang digunakan untuk menetapkan jumlah Azospirillum adalah metode most probable number MPN, sedangkan medium yang digunakan adalah medium semi padat yang mengandung agar 0,3-0,4 sehingga menjadi sedikit kenyal, tidak padat dan tidak begitu cair. Medium semi padat dibuat dengan tujuan agar mikrob dapat tumbuh dengan optimum pada kondisi oksigen rendah, karena Azospirillum merupakan bakteri yang bersifat mikroaerofilik. Prosedur kerja : Setelah dibuat seri pengenceran, suspensi tanah diinokulasikan pada medium semi padat NFB. Bila diduga populasi mikrob yang diamati cukup rendah maka pengenceran lebih rendah yang digunakan. Tabung-tabung yang diinokulasi diinkubasi selama 14 hari pada suhu 28 C . Adanya kekeruhan dan pembentukan lapisan tipis berbentuk cincinpelikel pada 3-4 ml dibawah permukaan medium dalam tabung menunjukkan adanya pertumbuhan Azospirillum.

d. Identifikasi koloni

: Koloni yang terdapat pada masing-masing cawan petri diidentifikasi. Syarat identifikasi untuk menentukan jenis mikrob adalah sebagai berikut : 1. Gambaran tentang populasi fungi dalam cawan petri umumnya berbentuk spora berada dalam bentuk dorman dan dari miselium yang aktif tumbuh. 2. Koloni Rhizobium dihitung dengan memperhatikan ciri-ciri sebagai berikut : bengkak, mengkilap, opak-semi tembus cahaya dan berlendir. Formatt ed: No bullets or numbering Formatt ed: Not Different first page header Formatt ed: I ndent: Left: 0 cm, Hanging: 0,75 cm, Numbered + Level: 1 + Numbering Style: a, b, c, … + Start at: 1 + Alignment: Left + Aligned at: 1,27 cm + I ndent at: 1,9 cm Formatt ed: Space Before: 6 pt Formatt ed: Justified, I ndent: Left: 0 cm, First line: 1,25 cm, Space Before: 6 pt Formatt ed: Font: Bold Formatt ed: I ndent: Left: 0 cm, Hanging: 0,75 cm, Space Before: 8 pt Formatt ed: I ndent: Left: 0 cm, First line: 1,25 cm Formatt ed: Font: Bold Formatt ed: I ndent: Left: 0 cm, Hanging: 0,75 cm, Space Before: 8 pt, Numbered + Level: 1 + Numbering Style: a, b, c, … + Start at: 1 + Alignment: Left + Aligned at: 1,27 cm + I ndent at: 1,9 cm Formatt ed: English U.S. Formatt ed: Font: Not Bold Formatt ed: I ndent: First line: 1,25 cm