22
III. BAHAN DAN METODE PENELITIAN
3.1. Lokasi dan Waktu Penelitian
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Bioteknologi Tanah, Departemen Ilmu Tanah dan Sumberdaya Lahan Fakultas Pertanian IPB dan Laboratorium
Bioteknologi Lingkungan Indonesian Center for Biodiversity and Biotecnology ICBB, Cilubang Nagrak, Situgede, Kabupaten Bogor. Penelitian ini
dilaksanakan mulai Maret 2010 sampai dengan Oktober 2010.
3.2. Bahan dan Alat
Bahan yang digunakan untuk melangsungkan penelitian ini adalah isolat ganggang mikro koleksi ICBB dan beberapa jenis bahan kimia. Media biakan
ganggang mikro yang digunakan adalah media standar BG11 dan media M4. Media BG11 digunakan dalam tahap peremajaan dan media beberapa konsentrasi
media M4 digunakan dalam kultivasi isolat ganggang mikro. Tabel 5. Komposisi Media Standar
Alat-alat yang digunakan adalah erlenmeyer, autoklaf, gelas ukur, shaker, laminair flow, spektrofotometer, neraca analitik, pipet mikro, kertas saring, ruang
asam, penangas dan botol bening wadah biakan.
Media BG 11 Komposisi
gL Media M4
Komposisi gL
NaNO
3
1,5 NaNO
3
1,5 K
2
HPO
4
0,04 KH
2
PO
4
0,049 MgSO
4
.7H
2
O 0,02
MgSO
4
0,0366 CaCl
2
.2H
2
O 0,036
CaCl
2
0,0271 Citric Acid
0,006 Citric Acid
0,006 Fe-ammonium citrate
0,006 Fe-ammonium citrate
0,006 EDTA
0,001 EDTA
0,001 Na
2
CO
3
0,075 Na
2
CO
3
0,02 Hara Mikro
1 ml Hara Mikro
1 ml
Komposisi Hara Mikro Komposisi Hara Mikro
H
3
BO
3
2,86 H
3
BO
3
2,86 MnCl
2
.4H
2
O 1,81
MnCl
2
0,1485 ZnSO
4
.7H
2
O 0,222
ZnSO
4
0,1245 Na
2
MoO
4
.2H
2
O 0,079
Na
2
MoO
4
.2H
2
O 0,0506
CuSO
4
.5H
2
O 0,39
CuSO
4
0,0506 CoNO
3 2
.6H
2
O
0,049
CoCl
2
.6H
2
O 0,043
23
3.3. Rancangan Penelitian
Pengaruh perlakuan konsentrasi media terhadap pertumbuhan 4 isolat ganggang mikro dalam 50 ml media selama 31 hari ditetapkan berdasarkan nilai
OD dengan menggunakan rancangan acak lengkap dengan faktor tunggal. Satu perlakuan dengan 5 taraf 0,75 M4; M4; 1,25 M4; 1,50 M4; 1,75 M4 dan
diulang 3 kali sehingga didapat 15 unit percobaan untuk masing-masing isolat ganggang mikro.
Pengaruh perlakuan terhadap pertumbuhan ganggang mikro didasarkan hasil analisis keragaman ANOVA dengan membandingkan nilai F hitung
terhadap F Tabel pada selang kepercayaan 95 dan 99 dengan kaidah pengambilan keputusan sebagai berikut:
Y
ij
= µ + α
i
+ β
j
+ ε
ij
Y
ij
: nilai pengamatan pada perlakuan konsentrasi media ke-i dan ulangan ke-j µ
: rataan umum α
i
: pengaruh perlakuan konsentrasi media ke-i β
j
: pengaruh ulangan ke-j ε
ij
: pengaruh galat percobaan dari perlakuan konsentrasi media ke-i dan ulangan ke-j
i : perlakuan konsentrasi media ke-1, 2, 3, 4, dan 5
j : ulangan 1, 2, dan 3
Apabila nilai F hitung dari F Tabel, maka perlakuan tidak memberikan
pengaruh yang nyata.
Apabila nilai F hitung dari F Tabel, maka perlakuan memberikan pengaruh nyata. Perlakuan yang memberikan pengaruh nyata dianalisis
lanjut dengan uji Duncan DMRT.
24
3.4. Pelaksanaan Penelitian
Kategori