23
digojog, kemudian didiamkan pada suhu kamar selama 5 menit. Selanjutnya
ditambahkan 2.5 ml larutan 6 Na
2
CO
3
, digojog dengan vortex dan didiamkan pada suhu kamar selama 30 menit. Absorbansi dibaca pada panjang gelombang
750 nm menggunakan spektrofotometer UV-Vis.
Total Fenol Sampel Padat
Bakso ikan yang sudah dihaluskan ditimbang sebanyak 1 g dan ditambahkan akuades sebanyak 100 ml, disaring, dan filtratnya ditampung dalam
erlenmeyer. Selanjutnya dikerjakan seperti sampel cair.
Pembuatan Kurva Standar
Sebanyak 1 g fenol murni ditimbang, dimasukkan dalam gelas beker, dilarutkan dengan akuades kemudian dimasukkan ke dalam labu takar 100 ml dan
volumenya dijadikan tepat. Larutan tersebut dipipet masing-masing 0.1 sampai 0.6 ml, selanjutnya dikerjakan seperti sampel cair.
3.7.3. Penentuan total plate count TPC Fardiaz 1993
Prinsip dari pengamatan ini adalah menentukan populasi bakteri yang terdapat pada bahan yang memberikan gambaran tentang bagaimana tingkat
kesegaran produk tersebut, karena bakteri merupakan faktor utama penyebab pembusukan bahan. Tahap pertama pada pengujian ini adalah tahap persiapan.
Mula-mula sampel dihancurkan, ditimbang secara aseptis sebanyak 5 g, dan dimasukkan dalam 45 ml NaCl 0.85 steril. Larutan yang diperoleh adalah
pengenceran 1:10. Kedua adalah tahap inokulasi. Larutan 1:10 dari tahap persiapan kemudian diambil 1 ml untuk dimasukan kedalam cawan petri steril,
kemudian ditambahkan larutan media agar yang telah steril bersuhu 45 C
sebanyak 15 ml dan dibiarkan selama 15–20 menit sampai agar memadat. Proses ini dilakukan juga dengan cara yang sama pada larutan dengan pengenceran 1:100
sampai 1:1000 000, secara duplo. Ketiga adalah tahap inkubasi. Setelah media yang telah diinokulasi memadat, kemudian cawan petri diinkubasi pada suhu 37
C dengan posisi terbalik selama 48 jam. Perhitungan jumlah bakteri berdasarkan ISO Standards for microbiological methods Harrigan 1998, yaitu:
d n
n c
N .
1 ,
2 1
24 Dimana:
∑c : jumlah seluruh koloni bakteri pada semua cawan yang mengandung 30– 300 koloni
n
1
: jumlah cawan petri yang masuk perhitungan pada pengenceran pertama n
2
: jumlah cawan petri yang masuk perhitungan pada pengenceran berikutnya
d : faktor pengenceran pertama
3.7.4. Nilai pH AOAC 1995
Penetapan nilai pH dilakukan setelah pH-meter ORION-410A dikalibrasi terlebih dahulu. Sampel ditimbang sebanyak 10 g, dicampurkan dengan 100 ml
akuades, diblender kemudian disaring. Setelah itu elektroda dibilas dengan akuades dan dikeringkan. Elektroda dicelupkan ke dalam filtrat sampai beberapa
saat, hingga diperoleh pembacaan yang stabil, kemudian pH sampel dapat dicatat.
3.7.5. Kadar air AOAC 1995
