Efektivitas Campuran Meniran Phyllanthus niruri dan Bawang Putih Allium sativum dalam Pakan untuk Pengendalian Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Ikan Lele Dumbo Clarias sp.

EFEKTIVITAS CAMPURAN MENIRAN Phyllanthus niruri DAN BAWANG PUTIH Allium sativum DALAM PAKAN UNTUK PENGENDALIAN INFEKSI BAKTERI Aeromonas hydrophila

PADA IKAN LELE DUMBO Clarias sp.

EKA HIDAYATHUS SHOLIKHAH

DEPARTEMEN BUDIDAYA PERAIRAN FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2009

PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN SUMBER INFORMASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa Skripsi yang berjudul :

EFEKTIVITAS CAMPURAN MENIRAN Phyllanthus niruri DAN

BAWANG PUTIH Allium sativum DALAM PAKAN UNTUK

PENGENDALIAN INFEKSI BAKTERI Aeromonas hydrophila PADA IKAN LELE DUMBO Clarias sp.

adalah benar merupakan hasil karya yang belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi mana pun. Semua sumber data dan informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir Skripsi ini.

Bogor, November 2009

EKA HIDAYATHUS SHOLIKHAH C14054257

RINGKASAN

EKA HIDAYATHUS SHOLIKHAH. Efektivitas Campuran Meniran

Phyllanthus niruri dan Bawang Putih Allium sativum dalam Pakan untuk Pengendalian Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Ikan Lele Dumbo

Clarias sp. Dibimbing oleh DINAMELLA WAHJUNINGRUM dan TATAG

BUDIARDI.

Ikan lele Clarias sp. merupakan ikan yang hidup di perairan tawar dan sudah dibudidayakan secara komersial oleh masyarakat Indonesia terutama di Pulau Jawa. Budidaya ikan lele berkembang pesat dikarenakan ikan ini mempunyai beberapa kelebihan, yaitu dapat dibudidayakan di lahan dan sumber air yang terbatas dengan padat tebar tinggi, mempunyai pertumbuhan yang cepat, teknologi budidaya relatif mudah dikuasai oleh masyarakat, pemasarannya relatif mudah dan mempunyai nilai ekonomis yang tinggi. Namun demikian pada budidaya ikan lele sering ditemukan penyakit MAS (Motile Aeromonad Septicaemia) yang disebabkan oleh bakteri Aeromonas hydrophila. Penggunaan bahan alami daun meniran Phyllanthus niruri dan bawang putih Allium sativum

diharapkan dapat menjadi alternatif pengganti antibiotik dalam mengobati penyakit yang disebabkan oleh bakteri. Oleh karena itu penelitian ini bertujuan untuk menganalisis efektivitas penggunaan campuran ekstrak daun meniran dan bawang putih dalam pakan untuk pengendalian infeksi bakteri Aeromonas hydrophila pada ikan lele dumbo.

Penelitian ini terdiri dari dua tahap yaitu uji LD50 dan uji in vivo. Uji LD50 menghasilkan konsentrasi bakteri A. hydrophila 108 cfu/ml dapat mematikan 50% populasi ikan uji dalam waktu satu minggu. Dosis yang digunakan adalah meniran 5 ppt dan bawang putih 20 ppt untuk pencegahan, sedangkan dosis untuk pengobatan adalah meniran 10 ppt dan bawang putih 40 ppt.

Hasil uji in vivo menunjukkan respon makan perlakuan pencegahan yang lebih baik dibandingkan perlakuan pengobatan dan kontrol positif. Pertambahan bobot rata-rata perlakuan pencegahan sebesar 7,2995 ± 1,00% dan pengobatan sebesar 6,2303 ± 1,81%, kontrol positif sebesar 1,8732 ± 0,58. Rata-rata skor gejala klinis perlakuan pencegahan lebih kecil jika dibandingkan perlakuan pengobatan dan kontrol positif. Mortalitas perlakuan pencegahan sebesar 41,67 ± 21,52%, pengobatan sebesar 54,17 ± 20,97 dan kontrol positif sebesar 66,67 ± 23,57. Pengamatan organ dalam menunjukkan perlakuan pencegahan normal, mendekati kontrol negatif, sedangkan perlakuan pengobatan terjadi perubahan warna organ dalam, mendekati kontrol negatif. Kualitas air yang terukur sebelum dan setelah uji in vivo masih termasuk dalam kisaran toleransi ikan lele dumbo.

Dari hasil penelitian ini didapatkan kesimpulan bahwa perlakuan pencegahan dengan campuran ekstrak meniran 5 ppt dan bawang putih 20 ppt cukup efektif dalam mencegah infeksi A. hydrophila dibandingkan dengan pengobatan dengan campuran ekstrak meniran 10 ppt dan bawang putih 40 ppt.

EFEKTIVITAS CAMPURAN MENIRAN Phyllanthus niruri DAN BAWANG PUTIH Allium sativum DALAM PAKAN UNTUK PENGENDALIAN INFEKSI BAKTERI Aeromonas hydrophila

PADA IKAN LELE DUMBO Clarias sp.

EKA HIDAYATHUS SHOLIKHAH

SKRIPSI

Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Perikanan pada Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan

Institut Pertanian Bogor

DEPARTEMEN BUDIDAYA PERAIRAN FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2009

Judul Skripsi : Efektivitas Campuran Meniran Phyllanthus niruri dan Bawang Putih Allium sativum dalam Pakan untuk Pengendalian Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Ikan Lele Dumbo Clarias sp

Nama Mahasiswa : Eka Hidayathus Sholikhah Nomor Pokok : C14054257

Disetujui Komisi Pembimbing

Dr. Dinamella Wahjuningrum Dr. Tatag Budiardi NIP. 19700521 199903 2 001 NIP. 19631002 199702 1 001

Diketahui

Dekan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan

Prof. Dr. Indra Jaya NIP. 19610410 198601 1 002

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur Penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala rahmat dan karunia-Nya sehingga skripsi ini berhasil diselesaikan. Skripsi ini merupakan hasil penelitian yang dilaksanakan sejak bulan Maret 2009 sampai dengan

Agustus 2009, dengan judul “Efektivitas Campuran Meniran Phyllanthus niruri

dan Bawang Putih Allium sativum dalam Pakan untuk Pengendalian Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Ikan Lele Dumbo Clarias sp”.

Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada :

1. Orangtua, adikku, dan keluarga besarku tercinta atas doa dan dukungannya selama penulis menyelesaikan skripsi ini

2. Ibu Dr. Dinamella Wahjuningrum dan Bapak Dr. Tatag Budiardi selaku pembimbing skripsi yang telah banyak memberikan arahan dan bimbingan kepada penulis sampai penyelesaian skripsi

3. Ibu Ir. Mia Setiawati, M.Si selaku dosen tamu yang memberikan arahan untuk kesempurnaan skripsi ini

4. Pak Ranta, Bang Abe, Pak Aam, Pak Endang, Pak Henda, Mas Khotib, Pak Mar, Mbak Yuli, Kang Asep atas kerjasamanya yang baik dalam menyelesaikan skripsi

5. Temen-teman BDP’42, LKI Crews (Anet, Majek, Dewi, Mama Uy, Teteh, Tante, Icha, Tyas, Sopi, Evan, Arif dan Wika) terimakasih kalian selalu ada buatku, (Dindong, Nadew, Bunda, Jijah, Vika, Pay, Mb nita, Jeje, Angga, Dowe, Gawang) atas bantuan dan semangat yang telah kalian berikan.

BDP’41 (mb Ayu, mas Agung, mb Dewi, teh Windu, mas Dodi), BDP’43 dan

’44 (Tya, Ide, Hendar, Bachtiar), S2 dan S3 (Bu Sury, Bu Muly, Pak Narto,

Bu Ibar, Bu Ayu, Pak Henky) terimakasih atas bantuannya dan kerjasamanya. Ekyers (Ita, Iin, Danto, Arin, Vita, Vivi, Sabti, Itha, Betari, Bani, Ayu, Oci, Mbambel) keceriaan dan uluran tangan kalian selama ini membuatku semangat.

Semoga karya ilmiah ini bermanfaat khususnya bagi penulis dan juga semua pihak yang membutuhkan. Terima kasih.

Bogor, November 2009 Penulis

DAFTAR RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Rembang tanggal 3 Oktober 1986 dari Ayah Suroto dan Ibu Hamidah. Penulis merupakan anak pertama dari dua bersaudara.

Pendidikan formal yang dilalui penulis adalah TK Islam Bhakti Lasem dan lulus tahun 1993, kemudian penulis melanjutkan pendidikan di SDN Soditan 01 Lasem dan lulus tahun 1999. Penulis melanjutkan pendidikan di SMPN 1 Lasem dan lulus tahun 2002, serta melanjutkan pendidikan di SMAN 1 Rembang dan lulus pada tahun 2005. Pada tahun yang sama penulis lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Seleksi Penerimaan Mahasiswa Baru (SPMB) dan memilih Program Studi Teknologi dan Manajemen Perikanan Budidaya, Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan.

Selama mengikuti perkuliahan, penulis pernah melakukan praktek lapang di PT CPB (Central Pertiwi Bahari) Rembang, Jawa Tengah. Penulis menjadi asisten mata kuliah Dasar-dasar Mikrobiologi Organisme Akutik semester genap 2008/2009. Selain itu penulis juga aktif menjadi pengurus Himpunan Mahasiswa Akuakultur (HIMAKUA) bagian divisi Public Care Center periode 2006/2007 dan 2007/2008. Tugas akhir dalam pendidikan tinggi diselesaikan dengan menulis skripsi yang berjudul “Efektivitas Campuran Meniran Phyllanthus niruri dan Bawang Putih Allium sativum dalam Pakan untuk Pengendalian Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Ikan Lele Dumbo Clarias sp”.

DAFTAR ISI

Halaman

DAFTAR TABEL ... ix

DAFTAR GAMBAR ... x

DAFTAR LAMPIRAN ... xii

I. PENDAHULUAN ... 1

1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Tujuan ... 2

II. TINJAUAN PUSTAKA ... 3

2.1 Ikan Lele Dumbo Clarias sp ... 3

2.2 Bawang Putih Allium sativum ... 4

2.3 Meniran Phyllanthus niruri... ... 7

2.4 Bakteri Aeromonas hydrophila ... 10

2.5 Bahan Antibakteri ... 12

2.6 Kualitas Air ... 12

III. BAHAN DAN METODE ... 15

3.1 Waktu dan Tempat ... 15

3.2 Alat dan Bahan ... 15

3.3 Metode Penelitian ... 15

3.3.1 Penyediaan Bakteri Uji ... 15

3.3.2 Regenerasi Bakteri Uji ... 16

3.3.3 Uji LD50 ... 16

3.3.4 Penyiapan Bahan dan Ekstrak ... 17

3.3.5 Persiapan Wadah dan Ikan Uji ... 18

3.3.6 Penyediaan Pelet Uji ... 19

3.3.7 Uji In Vivo ... 19

3.4 Parameter yang Diamati ... 20

3.4.1 Respon Makan Ikan ... 20

3.4.2 Pertambahan Bobot Tubuh ... 20

3.4.3 Kematian Ikan ... 21

3.4.4 Gejala Klinis dan Pengukuran Diameter Klinis ... 21

3.4.5 Pengamatan Organ Dalam ... 22

3.4.6 Kualitas Air ... 22

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ... 23

4.1 Hasil ... 23

4.1.1 Identifikasi Bakteri Uji ... 23

4.1.2 Uji LD50 ... 23

4.1.3 Uji In Vivo ... 23

4.1.3.1 Respon Makan Ikan Uji ... 23

4.1.3.2 Pertambahan Bobot Ikan Uji ... 25

4.1.3.3 Mortalitas Ikan Uji ... 26

4.1.3.5 Pemeriksaan Organ Dalam Ikan Uji... 33

4.1.3.6 Kualitas Air ... 34

4.2 Pembahasan ... 35

V. KESIMPULAN ... 42

5.1 Kesimpulan ... 42

5.2 Saran ... 42

DAFTAR PUSTAKA ... 43

DAFTAR TABEL

Halaman

1. Komposisi kimia bawang putih per 100 gram ... 6

2. Beberapa penelitian yang telah dilakukan untuk melihat efektifitas bawang putih ... 7

3. Efek pH terhadap organisme budidaya ... 13

4. Perhitungan skor kelainan klinis ... 21

5. Hasil identifikasi bakteri A. hydrophila ... 23

6. Pengamatan organ dalam ikan lele dumbo ... 33

EFEKTIVITAS CAMPURAN MENIRAN Phyllanthus niruri DAN BAWANG PUTIH Allium sativum DALAM PAKAN UNTUK PENGENDALIAN INFEKSI BAKTERI Aeromonas hydrophila

PADA IKAN LELE DUMBO Clarias sp.

EKA HIDAYATHUS SHOLIKHAH

DEPARTEMEN BUDIDAYA PERAIRAN FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2009

PERNYATAAN MENGENAI SKRIPSI DAN SUMBER INFORMASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa Skripsi yang berjudul :

EFEKTIVITAS CAMPURAN MENIRAN Phyllanthus niruri DAN

BAWANG PUTIH Allium sativum DALAM PAKAN UNTUK

PENGENDALIAN INFEKSI BAKTERI Aeromonas hydrophila PADA IKAN LELE DUMBO Clarias sp.

adalah benar merupakan hasil karya yang belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan tinggi mana pun. Semua sumber data dan informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam Daftar Pustaka di bagian akhir Skripsi ini.

Bogor, November 2009

EKA HIDAYATHUS SHOLIKHAH C14054257

RINGKASAN

EKA HIDAYATHUS SHOLIKHAH. Efektivitas Campuran Meniran

Phyllanthus niruri dan Bawang Putih Allium sativum dalam Pakan untuk Pengendalian Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Ikan Lele Dumbo

Clarias sp. Dibimbing oleh DINAMELLA WAHJUNINGRUM dan TATAG

BUDIARDI.

Ikan lele Clarias sp. merupakan ikan yang hidup di perairan tawar dan sudah dibudidayakan secara komersial oleh masyarakat Indonesia terutama di Pulau Jawa. Budidaya ikan lele berkembang pesat dikarenakan ikan ini mempunyai beberapa kelebihan, yaitu dapat dibudidayakan di lahan dan sumber air yang terbatas dengan padat tebar tinggi, mempunyai pertumbuhan yang cepat, teknologi budidaya relatif mudah dikuasai oleh masyarakat, pemasarannya relatif mudah dan mempunyai nilai ekonomis yang tinggi. Namun demikian pada budidaya ikan lele sering ditemukan penyakit MAS (Motile Aeromonad Septicaemia) yang disebabkan oleh bakteri Aeromonas hydrophila. Penggunaan bahan alami daun meniran Phyllanthus niruri dan bawang putih Allium sativum

diharapkan dapat menjadi alternatif pengganti antibiotik dalam mengobati penyakit yang disebabkan oleh bakteri. Oleh karena itu penelitian ini bertujuan untuk menganalisis efektivitas penggunaan campuran ekstrak daun meniran dan bawang putih dalam pakan untuk pengendalian infeksi bakteri Aeromonas hydrophila pada ikan lele dumbo.

Penelitian ini terdiri dari dua tahap yaitu uji LD50 dan uji in vivo. Uji LD50 menghasilkan konsentrasi bakteri A. hydrophila 108 cfu/ml dapat mematikan 50% populasi ikan uji dalam waktu satu minggu. Dosis yang digunakan adalah meniran 5 ppt dan bawang putih 20 ppt untuk pencegahan, sedangkan dosis untuk pengobatan adalah meniran 10 ppt dan bawang putih 40 ppt.

Hasil uji in vivo menunjukkan respon makan perlakuan pencegahan yang lebih baik dibandingkan perlakuan pengobatan dan kontrol positif. Pertambahan bobot rata-rata perlakuan pencegahan sebesar 7,2995 ± 1,00% dan pengobatan sebesar 6,2303 ± 1,81%, kontrol positif sebesar 1,8732 ± 0,58. Rata-rata skor gejala klinis perlakuan pencegahan lebih kecil jika dibandingkan perlakuan pengobatan dan kontrol positif. Mortalitas perlakuan pencegahan sebesar 41,67 ± 21,52%, pengobatan sebesar 54,17 ± 20,97 dan kontrol positif sebesar 66,67 ± 23,57. Pengamatan organ dalam menunjukkan perlakuan pencegahan normal, mendekati kontrol negatif, sedangkan perlakuan pengobatan terjadi perubahan warna organ dalam, mendekati kontrol negatif. Kualitas air yang terukur sebelum dan setelah uji in vivo masih termasuk dalam kisaran toleransi ikan lele dumbo.

Dari hasil penelitian ini didapatkan kesimpulan bahwa perlakuan pencegahan dengan campuran ekstrak meniran 5 ppt dan bawang putih 20 ppt cukup efektif dalam mencegah infeksi A. hydrophila dibandingkan dengan pengobatan dengan campuran ekstrak meniran 10 ppt dan bawang putih 40 ppt.

EFEKTIVITAS CAMPURAN MENIRAN Phyllanthus niruri DAN BAWANG PUTIH Allium sativum DALAM PAKAN UNTUK PENGENDALIAN INFEKSI BAKTERI Aeromonas hydrophila

PADA IKAN LELE DUMBO Clarias sp.

EKA HIDAYATHUS SHOLIKHAH

SKRIPSI

Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Perikanan pada Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan

Institut Pertanian Bogor

DEPARTEMEN BUDIDAYA PERAIRAN FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN

INSTITUT PERTANIAN BOGOR 2009

Judul Skripsi : Efektivitas Campuran Meniran Phyllanthus niruri dan Bawang Putih Allium sativum dalam Pakan untuk Pengendalian Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Ikan Lele Dumbo Clarias sp

Nama Mahasiswa : Eka Hidayathus Sholikhah Nomor Pokok : C14054257

Disetujui Komisi Pembimbing

Dr. Dinamella Wahjuningrum Dr. Tatag Budiardi NIP. 19700521 199903 2 001 NIP. 19631002 199702 1 001

Diketahui

Dekan Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan

Prof. Dr. Indra Jaya NIP. 19610410 198601 1 002

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur Penulis panjatkan kepada Allah SWT atas segala rahmat dan karunia-Nya sehingga skripsi ini berhasil diselesaikan. Skripsi ini merupakan hasil penelitian yang dilaksanakan sejak bulan Maret 2009 sampai dengan

Agustus 2009, dengan judul “Efektivitas Campuran Meniran Phyllanthus niruri

dan Bawang Putih Allium sativum dalam Pakan untuk Pengendalian Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Ikan Lele Dumbo Clarias sp”.

Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada :

1. Orangtua, adikku, dan keluarga besarku tercinta atas doa dan dukungannya selama penulis menyelesaikan skripsi ini

2. Ibu Dr. Dinamella Wahjuningrum dan Bapak Dr. Tatag Budiardi selaku pembimbing skripsi yang telah banyak memberikan arahan dan bimbingan kepada penulis sampai penyelesaian skripsi

3. Ibu Ir. Mia Setiawati, M.Si selaku dosen tamu yang memberikan arahan untuk kesempurnaan skripsi ini

4. Pak Ranta, Bang Abe, Pak Aam, Pak Endang, Pak Henda, Mas Khotib, Pak Mar, Mbak Yuli, Kang Asep atas kerjasamanya yang baik dalam menyelesaikan skripsi

5. Temen-teman BDP’42, LKI Crews (Anet, Majek, Dewi, Mama Uy, Teteh, Tante, Icha, Tyas, Sopi, Evan, Arif dan Wika) terimakasih kalian selalu ada buatku, (Dindong, Nadew, Bunda, Jijah, Vika, Pay, Mb nita, Jeje, Angga, Dowe, Gawang) atas bantuan dan semangat yang telah kalian berikan.

BDP’41 (mb Ayu, mas Agung, mb Dewi, teh Windu, mas Dodi), BDP’43 dan

’44 (Tya, Ide, Hendar, Bachtiar), S2 dan S3 (Bu Sury, Bu Muly, Pak Narto,

Bu Ibar, Bu Ayu, Pak Henky) terimakasih atas bantuannya dan kerjasamanya. Ekyers (Ita, Iin, Danto, Arin, Vita, Vivi, Sabti, Itha, Betari, Bani, Ayu, Oci, Mbambel) keceriaan dan uluran tangan kalian selama ini membuatku semangat.

Semoga karya ilmiah ini bermanfaat khususnya bagi penulis dan juga semua pihak yang membutuhkan. Terima kasih.

Bogor, November 2009 Penulis

DAFTAR RIWAYAT HIDUP

Penulis dilahirkan di Rembang tanggal 3 Oktober 1986 dari Ayah Suroto dan Ibu Hamidah. Penulis merupakan anak pertama dari dua bersaudara.

Pendidikan formal yang dilalui penulis adalah TK Islam Bhakti Lasem dan lulus tahun 1993, kemudian penulis melanjutkan pendidikan di SDN Soditan 01 Lasem dan lulus tahun 1999. Penulis melanjutkan pendidikan di SMPN 1 Lasem dan lulus tahun 2002, serta melanjutkan pendidikan di SMAN 1 Rembang dan lulus pada tahun 2005. Pada tahun yang sama penulis lulus seleksi masuk IPB melalui jalur Seleksi Penerimaan Mahasiswa Baru (SPMB) dan memilih Program Studi Teknologi dan Manajemen Perikanan Budidaya, Departemen Budidaya Perairan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan.

Selama mengikuti perkuliahan, penulis pernah melakukan praktek lapang di PT CPB (Central Pertiwi Bahari) Rembang, Jawa Tengah. Penulis menjadi asisten mata kuliah Dasar-dasar Mikrobiologi Organisme Akutik semester genap 2008/2009. Selain itu penulis juga aktif menjadi pengurus Himpunan Mahasiswa Akuakultur (HIMAKUA) bagian divisi Public Care Center periode 2006/2007 dan 2007/2008. Tugas akhir dalam pendidikan tinggi diselesaikan dengan menulis skripsi yang berjudul “Efektivitas Campuran Meniran Phyllanthus niruri dan Bawang Putih Allium sativum dalam Pakan untuk Pengendalian Infeksi Bakteri Aeromonas hydrophila pada Ikan Lele Dumbo Clarias sp”.

DAFTAR ISI

Halaman

DAFTAR TABEL ... ix

DAFTAR GAMBAR ... x

DAFTAR LAMPIRAN ... xii

I. PENDAHULUAN ... 1

1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Tujuan ... 2

II. TINJAUAN PUSTAKA ... 3

2.1 Ikan Lele Dumbo Clarias sp ... 3

2.2 Bawang Putih Allium sativum ... 4

2.3 Meniran Phyllanthus niruri... ... 7

2.4 Bakteri Aeromonas hydrophila ... 10

2.5 Bahan Antibakteri ... 12

2.6 Kualitas Air ... 12

III. BAHAN DAN METODE ... 15

3.1 Waktu dan Tempat ... 15

3.2 Alat dan Bahan ... 15

3.3 Metode Penelitian ... 15

3.3.1 Penyediaan Bakteri Uji ... 15

3.3.2 Regenerasi Bakteri Uji ... 16

3.3.3 Uji LD50 ... 16

3.3.4 Penyiapan Bahan dan Ekstrak ... 17

3.3.5 Persiapan Wadah dan Ikan Uji ... 18

3.3.6 Penyediaan Pelet Uji ... 19

3.3.7 Uji In Vivo ... 19

3.4 Parameter yang Diamati ... 20

3.4.1 Respon Makan Ikan ... 20

3.4.2 Pertambahan Bobot Tubuh ... 20

3.4.3 Kematian Ikan ... 21

3.4.4 Gejala Klinis dan Pengukuran Diameter Klinis ... 21

3.4.5 Pengamatan Organ Dalam ... 22

3.4.6 Kualitas Air ... 22

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ... 23

4.1 Hasil ... 23

4.1.1 Identifikasi Bakteri Uji ... 23

4.1.2 Uji LD50 ... 23

4.1.3 Uji In Vivo ... 23

4.1.3.1 Respon Makan Ikan Uji ... 23

4.1.3.2 Pertambahan Bobot Ikan Uji ... 25

4.1.3.3 Mortalitas Ikan Uji ... 26

4.1.3.5 Pemeriksaan Organ Dalam Ikan Uji... 33

4.1.3.6 Kualitas Air ... 34

4.2 Pembahasan ... 35

V. KESIMPULAN ... 42

5.1 Kesimpulan ... 42

5.2 Saran ... 42

DAFTAR PUSTAKA ... 43

DAFTAR TABEL

Halaman

1. Komposisi kimia bawang putih per 100 gram ... 6

2. Beberapa penelitian yang telah dilakukan untuk melihat efektifitas bawang putih ... 7

3. Efek pH terhadap organisme budidaya ... 13

4. Perhitungan skor kelainan klinis ... 21

5. Hasil identifikasi bakteri A. hydrophila ... 23

6. Pengamatan organ dalam ikan lele dumbo ... 33

DAFTAR GAMBAR

Halaman

1. Ikan lele Clarias sp... 3

2. Bawang putih Allium sativum... 5

3. Meniran Phylanthus niruri... ... 7

4. Skema metode penelitian (uji in vivo)………... 20

5. Respon makan ikan lele dumbo selama perlakuan... 24

6. Pertambahan bobot rata-rata ikan lele dumbo Clarias sp. (%) selama perlakuan... 25

7. Akumulasi mortalitas ikan lele dumbo Clarias sp. (%) setelah penginfeksian bakteri A. hydrophila selama perlakuan ... 26

8. Ikan lele perlakuan kontrol negatif tidak mengalami kelainan klinis hingga akhir perlakuan... 27

9. Ikan lele mengalami kelainan klinis berupa radang pada daerah bekas suntikan pada jam ke-7... 27

10. Ikan lele perlakuan kontrol positif mengalami kematian dengan kelainan klinis berupa radang, mata menonjol dan buta, sirip mengalami hiperemia pada hari ke-1 setelah penginfeksian bakteri A. hydrophila... 28

11. Ikan lele perlakuan kontrol positif mengalami kelainan klinis berupa hemoragi pada hari ke-1 setelah penginfeksian bakteri A. hydrophila... 28

12. Ikan lele perlakuan kontrol positif mengalami kelainan klinis berupa tukak pada hari ke-3 setelah penginfeksian bakteri A.hydrophila... 29

13. Ikan lele perlakuan kontrol positif mengalami kelainan klinis berupa tukak pada hari ke-6 setelah penginfeksian bakteri A.hydrophila... 29

14. Ikan lele perlakuan kontrol positif mengalami penyembuhan tukak pada hari ke-9 setelah penginfeksian bakteri A. hydrophila... 29

15. Ikan lele perlakuan pengobatan mengalami kelainan klinis berupa hemoragi pada hari ke-1 setelah penginfeksian bakteri A.hydrophila... 30

16. Ikan lele perlakuan pengobatan mengalami kelainan klinis berupa tukak pada hari ke-3 setelah penginfeksian bakteri A.hydrophila... 30

17. Ikan lele perlakuan pengobatan mengalami penyembuhan tukak pada hari ke-9 setelah penginfeksian bakteri A.hydrophila ...30

18. Ikan lele perlakuan pencegahan mengalami kelainan klinis berupa radang pada hari ke-1 setelah penginfeksian bakteri A.hydrophila... 31

19. Ikan lele perlakuan pencegahan mengalami kelainan klinis berupa tukak pada hari ke-3 setelah penginfeksian bakteri A.hydrophila... 31

20. Ikan lele perlakuan pencegahan mengalami penyembuhan total pada hari ke-9 setelah penginfeksian bakteri A.hydrophila... 32

21. Skor gejala klinis ikan lele dumbo selama perlakuan setelah penginfeksian bakteri A. hydrophila... 33 22. Organ dalam ikan lele pada setiap perlakuan... 34

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman 1. Penyiapan media bakteri Aeromonas hydrophila ... 48 2. Perhitungan nilai LD50... 49 3. Bobot tubuh rata-rata ikan lele awal, tengah dan akhir perlakuan ... 50 4. Pertambahan bobot rata-rata ikan selama perlakuan ... 51 5. Mortalitas ikan lele selama perlakuan ... 52 6. Kualitas air selama perlakuan ... 53 7. Kelainan klinis dan diameter kelainan klinis ikan lele kontrol positif

setelah diinfeksi bakteri A. hydrophila……….. 55

8. Kelainan klinis dan diameter kelainan klinis ikan lele perlakuan

pencegahan setelah diinfeksi bakteri A. hydrophila……….. 56

9. Kelainan klinis dan diameter kelainan klinis ikan lele perlakuan

pengobatan setelah diinfeksi bakteri A. hydrophila………... 57 10. Skor rata-rata kelainan klinis ikan lele kontrol positif setelah diinfeksi

bakteri A. hydrophila………. 58 11. Skor rata-rata kelainan klinis ikan lele perlakuan pencegahan setelah

diinfeksi bakteri A. hydrophila……….. 59

12. Skor rata-rata kelainan klinis ikan lele perlakuan pengobatan setelah

I.PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang

Ikan lele Clarias sp. merupakan ikan yang hidup di perairan tawar yang sudah dibudidayakan secara komersial oleh masyarakat Indonesia terutama di Pulau Jawa. Budidaya lele berkembang pesat dikarenakan ikan lele mempunyai beberapa kelebihan, yaitu dapat dibudidayakan di lahan dan sumber air yang terbatas dengan padat tebar tinggi, mempunyai pertumbuhan yang cepat, teknologi budidaya relatif mudah dikuasai oleh masyarakat, pemasarannya relatif mudah dan modal usaha yang dibutuhkan relatif rendah serta mempunyai nilai ekonomis yang tinggi (Anonim, 2003). Menurut Mahyuddin (2007), produksi lele ukuran konsumsi secara nasional mengalami kenaikan sebesar 18,3% per tahun dari 24.991 ton (1999) menjadi 57.740 ton (2003). Revitalisasi lele sampai dengan akhir tahun 2009 ditargetkan mencapai produksi 175.000 ton atau meningkat rata-rata 21,64% per tahun. Untuk daerah Jabotabek, konsumsi ikan lele mencapai 100 ton lele per hari (Anonim, 2007). Hal ini mengakibatkan pemeliharaan ikan lele dikembangkan secara intensif.

Peningkatan produksi ikan lele secara intensif seringkali mengalami resiko, salah satunya adalah timbulnya penyakit. Penyakit yang biasanya menyerang ikan lele adalah penyakit MAS (Motile Aeromonad Septicemia). Penyakit ini, diakibatkan oleh infeksi bakteri Aeromonas hydrophila (Roberts, 1993 dalam Woo et al., 2002). Serangan bakteri ini mematikan ikan lele Clarias

sp. di Jawa Barat dan Jawa Timur, setelah 3 bulan penyakit ini muncul di Indonesia (Oswald dan Hulse, 1982) dengan jangka waktu antara 24-48 jam dalam kondisi akut (Paperna, 1996).

Penanggulangan penyakit MAS pada awalnya banyak yang menggunakan antibiotik, misalnya oxytetracycline, streptomysin, atau kloramfenikol yang disuntikkan atau dicampurkan dalam pakan. Penggunaan antibiotik tersebut mengakibatkan dampak yang negatif, menjadikan bakteri A. hydrophila dan bakteri-bakteri di lingkungan menjadi resisten terhadap antibiotik, dan musnahnya bakteri menguntungkan yang sensitif (Mariyono dan Sundana, 2002 dalam Ayuningtyas, 2009). Selain itu, antibiotik dapat menimbulkan residu pada

ikan dan akan membahayakan kesehatan konsumen apabila dikonsumsi. Oleh karena itu dibutuhkan alternatif penanggulangan penyakit MAS yang efektif dan tidak menimbulkan efek yang negatif bagi pembudidaya maupun konsumen serta ramah lingkungan.

Indonesia merupakan negara agraris yang memiliki iklim tropis dengan kekayaan alam yang luar biasa dan beragam jenis tanaman terdapat di negara ini. Salah satunya adalah tanaman jenis herba, yaitu tanaman yang berkhasiat obat. Contoh tanaman yang termasuk didalamnya adalah meniran dan bawang putih.

Meniran Phyllanthus niruri merupakan jenis tanaman obat yang dapat bermanfaat untuk menurunkan panas, obat batuk, radang, batu ginjal, susah buang air kecil, disentri, sakit ayan, hepatitis, rematik. Selain itu meniran dapat mencegah berbagai macam infeksi virus dan bakteri serta mendorong sistem kekebalan tubuh. Hal ini dikarenakan terdapat kandungan flavonoid, alkaloid, tanin, dan vitamin C (Triarsari, 2009).

Bawang putih mempunyai zat aktif yaitu alisin dan minyak atsiri yang diduga sebagai antibakteri untuk menekan bakteri yang merugikan, dengan demikian akan memberikan peluang pertumbuhan mikroorganisme yang menguntungkan di dalam saluran pencernaan secara optimum.

Berdasarkan hasil penelitian Ayuningtyas (2009), ekstrak daun meniran 5 ppt dan bawang putih 20 ppt dapat menghambat pertumbuhan bakteri A. hydrophila pada ikan lele dumbo dengan metode injeksi. Dalam penerapan di lapangan, metode tersebut kurang efisien. Untuk itu diperlukan penelitian untuk menguji keefektifan ekstrak daun meniran dan bawang putih sebagai bahan antibakteri yang diberikan dengan metode pencampuran lewat pakan.

1.2 Tujuan

Penelitian ini bertujuan untuk menganalisis efektivitas penggunaan campuran ekstrak daun meniran dan bawang putih dalam pakan untuk pengendalian infeksi bakteri Aeromonas hydrophila pada ikan lele dumbo.

II. TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Ikan Lele Dumbo (Clarias sp.)

Ikan lele merupakan ikan yang hidup di perairan tawar. Klasifikasi ikan lele dumbo menurut Saanin (1989) adalah sebagai berikut

Kingdom : Animalia Filum : Chordata Kelas : Pisces Subkelas : Telestoi Ordo : Ostariophysi Subordo : Siluroidae Famili : Clariidae Genus : Clarias

Spesies : Clarias sp.

Gambar 1. Ikan lele Clarias sp.

Ikan lele hidup di perairan tawar dan tenang seperti danau, waduk, telaga, genangan-genangan kecil seperti kolam ikan. Ikan lele mempunyai organ insang tambahan yang memungkinkan ikan ini mengambil oksigen dari udara di luar air. Oleh karena itu, ikan lele dapat bertahan hidup di perairan yang mengandung sedikit oksigen. Ikan lele juga relatif tahan terhadap pencemaran bahan-bahan organik. Ikan lele hidup dengan baik di dataran rendah sampai daerah perbukitan yang tidak terlalu tinggi. Apabila suhu tempat hidupnya terlalu dingin, misalnya di bawah 20 oC, pertumbuhannya agak lambat. Pada ketinggian di atas 700 m seperti di daerah pegunungan, pertumbuhan ikan lele kurang begitu baik (Suyanto, 2006).

Menurut Khairuman dan Amri (2002), kualitas air yang dianggap baik untuk kehidupan lele adalah perairan dengan suhu 20-30°C, oksigen terlarut (DO) minimum 3 mg/l, derajat keasaman (pH) 6,5-8, kandungan karbondioksida (CO2) kurang dari 15 ppm, NH3 sebesar 0,05 mg/l, NO2 sebesar 0,25 mg/l dan NO3 sebesar 250 mg/l, serta konsumsi ammonia total maksimum 1 mg/l.

Ikan lele bersifat nokturnal yaitu aktif pada malam hari atau lebih menyukai tempat yang gelap. Pada siang hari ikan lele lebih suka berdiam di dalam lubang-lubang atau tempat aliran air yang tenang. Oleh karena itu, ikan lele aktif mencari makan pada malam hari. Ikan lele bersifat karnivora (pemakan daging) ikan lele juga memakan sisa-sisa bahan organik yang membusuk dan kotoran manusia (Suyanto, 2006).

2.2 Bawang Putih (Allium sativum)

Bawang putih (Allium sativum) adalah tanaman rempah yang berasal dari Asia Tengah, diantaranya Cina dan Jepang yang beriklim subtropis. Kemudian bawang putih menyebar ke seluruh Asia, Eropa, dan akhirnya ke seluruh dunia. Di Indonesia bawang putih masuk melalui jalur perdagangan internasional sejak berabad-abad lampau, dimulai dari daerah pesisir dan semakin lama meluas ke daerah pedalaman (Palungkun dan Budiarti, 1992). Di beberapa daerah di Indonesia, bawang putih dikenal dengan nama lasun (Aceh), dasun (Minangkabau), lasuna (Batak), bawang bodas (Sunda), bawang ksihong (Dayak) dan incuna (Nusa Tenggara). Menurut Tjitrosoepoemo (1994), klasifikasi bawang putih adalah sebagai berikut :

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta Sub divisi : Angiospermae Kelas : Monocotyledonae Ordo : Liliflorae

Famili : Liliceae Genus : Allium

Gambar 2. Bawang putih Allium sativum

Bawang putih adalah tanaman berbentuk rumput, memiliki umbi berwarna putih yang aromanya sangat menyengat. Daunnya panjang berbentuk pipih (tidak berlubang). Helai daun seperti pita dan melipat kearah panjang dengan membuat sudut pada permukaan bawahnya. Kelopak daun kuat, tipis, dan membungkus kelopak daun yang lebih muda sehingga membentuk batang semua yang tersembul keluar. Bunganya hanya sebagian keluar atau sama sekali tidak keluar karena sudah gagal tumbuh pada waktu masih berupa tunas bunga (Palungkun dan Budiarti, 2001).

Bawang putih termasuk tanaman rempah yang bernilai ekonomis tinggi karena memiliki beragam kegunaan. Bawang putih tidak hanya dimanfaatkan sebagai bumbu masak, tetapi dapat dimanfaatkan sebagai tanaman apotek hidup. Secara tradisional, berbagai bangsa di dunia telah menggunakan bawang putih dalam beragam ramuan obat. Pemakaiannya sebagian besar masih bersifat empiris, artinya digunakan secara turun-temurun berdasarkan pengalaman belaka. Di zaman modern, khasiat bawang putih telah dibuktikan secara ilmiah.

Khasiat bawang putih berhubungan erat dengan zat kimia yang dikandungnya. Zat-zat kimia tersebut sebagian besar masuk dalam golongan minyak atsiri. Menurut Surahman (1984), minyak atsiri adalah suatu zat yang mudah menguap pada suhu kamar sehingga disebut terpenoid essential oils.

Minyak atsiri dapat digunakan sebagai pewangi, penyedap, antibakteri dan antijamur.

Bawang putih mempunyai bau yang sangat tajam ketika dimemarkan atau dihancurkan akibat dari zat alisin, yang diduga juga sebagai antibakteri. Zat yang

terkandung dalam tanaman bawang putih utuh adalah zat aliin. Ketika bawang putih dihancurkan, zat aliin akan terpecah menjadi alisin, amonia, dan piruvat. Selain sebagai antibakteri, dapat juga meningkatkan pertumbuhan dengan cara menekan bakteri yang merugikan dan memberikan peluang pertumbuhan mikroorganisme yang menguntungkan di dalam saluran pencernaan secara optimum sehingga pemanfaatan makanan untuk pertumbuhan dapat maksimum (Bidura, 1999 dalam Sunanti, 2007).

Allicin adalah salah satu zat aktif yang diduga dapat membunuh kuman-kuman penyakit (bersifat antibakteri). Allicin berperan ganda membunuh bakteri, yaitu bakteri Gram positif maupun Gram negatif karena mempunyai gugus amino para amino benzoat (Palungkun dan Budiarti, 2001). Menurut Barnes et al. (2002), hasil uji in vitro bawang putih terhadap beberapa bakteri yang sensitif telah menunjukkan hasil yang signifikan. Bakteri yang diujikan adalah

Staphylococcus aureus, S. faecalis, Escherichia coli, Proteus mirabilis, Salmonella typhi, Aeromonas, Vibrio cholerae dan Bacillus subtilis. Selain itu bawang putih juga mempunyai aktivitas sebagai anti fungi terhadap Microsporum, Epidermophyton, Trichophyton, Rhodotorula, Eryptococcus neoformans dan

Candida.

Allicin pertama kali ditemukan oleh C.V. Cacalito pada tahun 1944, zat ini berupa minyak tidak berwarna yang secara kimia tidak stabil dengan dayaguna antibiotik. Menurut Cavalito dalam Watanabe (2001), satu miligram allicin

mempunyai suatu daya kemampuan sebanding dengan 15 unit standar penisilin.

Allicin juga dapat bergabung dengan protein dan mengubah strukturnya agar protein tersebut mudah dicerna. Kemampuan allicin untuk bergabung dengan protein akan mendukung daya antibiotiknya, karena allicin menyerang protein mikroba dan akhirnya membunuh mikroba tersebut.

Tabel 1. Komposisi kimia bawang putih per 100 gram

Kandungan Jumlah (gram)

Air 66,2-71 gram

Energi 95-122 kal

Protein 4,5-7 gram

Lemak 0,2-0,3 gram

Karbohidrat 23,1-24,6 gram

Ca 26-42 mg

P 15-109 mg

K 346 mg

Sumber : Palungkun dan Budiarti (2001)

Berikut ini adalah penelitian yang telah dilakukan untuk melihat efektifitas bawang putih sebagai bahan antibakteri dan antivirus :

Tabel 2. Beberapa penelitian yang telah dilakukan untuk melihat efektifitas bawang putih

No

Konsentrasi bawang putih (g/l)

Obyek Metode

pemberian Pustaka

1 300 ikan mas penyuntikan Puspitaningtyas (2006)

2 6 dan 20 udang

vaname perendaman Agustian (2007) 3 25 ikan patin penyuntikan Normalina (2007) 4 20 ikan lele penyuntikan Ayuningtyas (2009) 5 20 Ikan lele pakan (oral) penelitian ini

2.3 Meniran Phyllanthus niruri

Meniran merupakan tanaman yang dapat tumbuh di daerah tropis yang tumbuh liar. Adapun klasifikasinya adalah sebagai berikut (Syamsuhidayat dan Hutapea, 1990):

Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta Sub divisi : Angiospermae Kelas : Dicotyledonae Bangsa : Geraniales Suku : Euphorbiaceae Marga : Phyllanthus

Jenis : Phyllanthus niruri

Gambar 3. Meniran Phyllanthus niruri (inzet)

Meniran dapat tumbuh di atas tanah berbatu, di lapangan rumput dengan ketinggian 1.000 m di atas permukaan laut. Tanaman ini berupa rumput-rumputan, tingginya 30-40 cm dan memiliki bunga jantan dan betina (Yuliani dan Hernani, 1988). Tanaman ini bercabang terpencar, cabang mempunyai daun tunggal yang berseling dan tumbuh mendatar dari batang pokok. Batangnya berwarna hijau, bentuk daunnya bulat telur sampai bundar memanjang, panjang daun 5 mm sampai 10 mm, lebar 2,5 mm sampai 5 mm. Meniran mempunyai akar tunggang. Meniran mempunyai bunga berwarna putih, tunggal dan menggantung dekat tangkai anak daun. Buah berbentuk bulat dengan diameter sekitar 2 mm sampai 2,5 mm, berwarna hijau keunguan dengan biji kecil, keras dan berwarna cokelat.

Meniran Phyllanthus niruri merupakan jenis tanaman obat yang dapat bermanfaat untuk menurunkan panas, obat batuk, radang, batu ginjal, susah buang air kecil, disentri, sakit ayan, hepatitis, rematik. Selain itu, meniran dapat mencegah berbagai macam infeksi virus dan bakteri serta mendorong sistem kekebalan tubuh. Hal ini dikarenakan terdapat kandungan flavonoid, alkaloid, saponin, tanin, dan vitamin C (Triarsari, 2009).

Flavonoid merupakan senyawa golongan polifenol yang larut dalam air. Flavonoid terdapat dalam semua tumbuhan hijau sehingga selalu ditemukan pada setiap ekstrak tumbuhan (Markham, 1988), misalnya terdapat pada bagian biji, kulit buah, daun dan daun bunga dari tanaman. Senyawa ini jarang ditemukan dalam bentuk tunggal pada tumbuhan melainkan dalam bentuk campuran. Senyawa fenol dari tumbuhan memiliki kemampuan untuk membentuk kompleks dengan protein melalui ikatan hidrogen, sehingga dapat merusak membran sel bakteri. Flavonoid bersifat antibakteri dan antioksidan serta mampu meningkatkan kerja sistem imun karena leukosit sebagai pemakan antigen lebih cepat dihasilkan dan sistem limfoid lebih cepat diaktifkan (Rahman, 2008).

Alkaloid merupakan senyawa metabolit sekunder terbesar yang terdapat dalam tumbuhan terutama pada bagian biji, daun, ranting dan kulit kayu (Herwig, 1979 dalam Ayuningtyas, 2009). Alkaloid bersifat toksik terhadap mikroba, sehingga efektif membunuh bakteri dan virus (Naim, 2004), namun dapat beracun bagi ikan. Pada jumlah tertentu alkaloid tidak selalu beracun bagi ikan karena dapat bekerja secara sinergis dengan senyawa lainnya. Alkaloid dapat berfungsi sebagai antibakteri yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri Gram positif dan Gram negatif.

Tannin merupakan senyawa polifenol yang dapat larut dalam air, gliserol, methanol, hidroalkoholik, propilena glikol tetapi tidak larut dalam benzene, kloroform eter, petroleum eter dan karbon disulfide (Harborne, 1987). Selanjutnya dinyatakan bahwa tannin mempunyai sifat fisika dan kimia antara lain rasanya sepat dan berfungsi sebagai antibakteri dan astringent atau menciutkan dinding usus yang rusak karena asam atau bakteri.

Saponin merupakan senyawa yang diduga sebagai senyawa antibakteri karena memiliki kemampuan dalam menghambat fungsi membran sel sehingga

merusak permeabilitas membran yang mengakibatkan dinding sel rusak atau hancur. Keberadaan saponin dalam tumbuhan dapat juga dimanfaatkan sebagai obat bagi manusia.

Menurut Mela (2007), hampir semua bagian dari tanaman meniran berkhasit obat. Hasil penelitian menyebutkan bahwa meniran memiliki aktivitas imunomodulator yang berperan membuat sistem imun lebih aktif dalam menjalankan fungsinya, menguatkan sistem imun tubuh (imunostimulator) atau menekan reaksi sistem imun yang berlebihan (imunosupresan). Dengan demikian, kekebalan atau daya tahan tubuh selalu optimal sehingga tetap sehat ketika diserang virus, bakteri, dan mikroba lainnya. Kandungan kimia yang bermanfaat dari meniran adalah flavonoid. Pada tanaman lainnya kandungan flavonoid sebenarnya juga ada, bedanya pada meniranaktivitas peningkatan sistem imunnya ternyata lebih baik. Sebagai imunomodulator, meniran tidak semata-mata berefek meningkatkan sistem imun, namun juga menekan sistem imun apabila aktivitasnya berlebihan. Jika aktivitas sistem imun berkurang, maka kandungan flavonoid dalam meniran akan mengirimkan sinyal intraseluler pada reseptor sel untuk meningkatkan aktivitasnya. Sebaliknya, jika sistem imun kerjanya berlebihan, maka meniran berkhasiat dalam mengurangi kerja sistem imun tersebut. Jadi, meniran berfungsi sebagai penyeimbang sistem imun.

Menurut Suprapto (2006), flavonoid pada meniran banyak ditemukan di bagian akar dan daun. Flavonoid pada meniran menempel pada sel imun dan memberikan sinyal intraseluler atau rangsangan untuk mengaktifkan kerja sel imun lebih baik. Selain itu, meniran berfungsi juga sebagai senyawa antioksidan yang mampu merangsang kekebalan tubuh.

Berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh pihak BBAT (Balai Budidaya Air Tawar) Sukabumi, dengan pemberian ekstrak meniran 10 g/kg pakan terhadap ikan mas yang diinfeksi virus KHV dapat meningkatkan kelangsungan hidup. Hal ini disebabkan adanya peningkatan daya tahan tubuh ikan mas yang ditandai meningkatnya jumlah leukosit yang berfungsi sebagai pertahanan non spesifik (Ciptoroso et al., 2006). Penelitian Ayuningtyas (2009) juga diketahui bahwa ekstrak meniran 5 ppt mampu mencegah infeksi yang disebabkan oleh bakteri

2.4 Bakteri Aeromonas hydrophila

Bakteri Aeromonas hydrophila merupakan bakteri gram negatif, berbentuk batang pendek dengan ukuran 1,0-1,5 x 0,7-0,8 µm. Tumbuh baik pada perairan yang mengandung bahan organik tinggi. A. hydrophila tumbuh optimum pada suhu 20-30oC (Kabata, 1985). Berdasarkan Austin dan Austin (1986), bakteri ini mampu tumbuh pada suhu 37oC. Selain itu bakteri ini juga bersifat fakultatif aerobik (dapat hidup dengan atau tanpa oksigen) yang mengubah karbohidrat menjadi asam dan gas, tidak berspora, oksidatif fermentatif (mampu memanfaatkan karbohidrat atau glukosa, bersifat motil (bergerak aktif) karena memiliki flagel (Monotrichous flagella) yang keluar dari salah satu kutubnya, koloni bakteri ini pada media agar berwarna putih kekuningan, bentuk bulat cembung, oksidase sitokrom dan reaksi katalase positif (Skinner dan Carr, 1976). Bakteri ini senang hidup di lingkungan perairan bersuhu 15-30oC dan pH antara 5,5-9 (Ghufran dan Kordi, 2004).

Pada beberapa kasus, kematian ikan akibat infeksi A. hydrophila tidak ditandai dengan kerusakan pada organ eksternal. Kerusakan dapat terjadi sebagai akibat infeksi lokal pada tempat luka atau penempelan oleh parasit. Infeksi A. hydrophila dapat merupakan asosiasi dengan parasit, luka atau patogen lain. Akibatnya seperti dikemukakan oleh Austin dan Austin (1986), bahwa bakteri ini akan semakin patogen dan membahayakan sistem kekebalan ikan budidaya.

A. hydrophila merupakan bakteri penyebab penyakit MAS (Motile

Aeromonad Septicemia) (Irianto, 2005). Menurut Amlachler (1961) dalam Sniezko dan Axelrod (1971), serangan bakteri ini dapat terjadi dalam empat tingkat berbeda, sebagai berikut :

1. Laten, tidak memperlihatkan gejala penyakit, namun pada organ dalam terdapat bakteri penyebab penyakit.

2. Kronis, terlihat gejala tukak, bisul-bisul, dan abses yang perkembangannya berlangsung lama.

3. Sub akut, terlihat gejala dropsi, lepuh, dan pendarahan pada sisik.

4. Akut, merupakan septisemia yang fatal, infeksi cepat dengan akibat tanda-tanda penyakit yang terlihat.

Ikan yang terinfeksi A. hydrophila memperlihatkan tanda-tanda berupa tingkah laku ikan tidak normal, berenang lambat, megap-megap di permukaan air, dan nafsu makan menurun. Tanda lainnya seperti sirip rusak, kulit kering dan kasar, lesi kulit yang berkembang menjadi tukak, dan mata menonjol (exophthalmus), serta terkadang perut menggembung berisi cairan kemerahan. Penyakit ini bersifat musiman dan meningkat selama musim panas serta berhubungan dengan populasi ikan yang mengalami stres (Kabata, 1985). Kelainan klinis berupa hiperemia merupakan bentuk perlawanan terhadap adanya bakteri patogen sehingga terjadi mobilisasi sel darah putih. Sel darah putih tersebut berfungsi sebagai imun pertahanan non spesifik yang akan melokalisasi dan mengeliminasi patogen dengan cara fagositosis (Anderson, 1974). Menurut Suzuki dan Lida (1992) dalam Darmanto (2003), hiperemia akan diikuti oleh reaksi peradangan yaitu berupa tanda kemerahan di daerah sekitar luka yang merupakan reaksi mempertahankan diri pada daerah infeksi atau luka. Menurut Oliver et al. (1981) dalam Riyanto (1993), patogen A. hydrophila mendegradasi jaringan organ tubuh serta mengeluarkan toksik yang disebarkan ke seluruh tubuh melalui aliran darah sehingga menimbulkan warna kemerahan pada tubuh ikan.

Reaksi radang merupakan reaksi mencegah masuknya mikroorganisme di sekitar tempat infeksi. Peradangan terjadi di daerah sekitar masuknya patogen. Hal ini dikarenakan komponen yang lain berperan dalam proses pertahanan seluler seperti leukosit akan memfagositosis patogen tersebut (Anderson, 1974). Reaksi peradangan meliputi tiga tahap, yaitu : (1) terjadinya peningkatan suplai darah ke daerah sekitar luka atau infeksi; (2) bertambahnya sifat permeabilitas pipa kapiler darah; (3) terjadinya proses migrasi leukosit yang keluar dari kapiler dan masuk ke dalam jaringan secara merata.

Bakteri A. hydrophila menghasilkan enzim dan toksin yang dikenal dengan ekstraseluler atau ECP (Extra Celluler Product) yang mengandung sedikitnya aktivitas hemolisis dan protease yang merupakan penyebab patogenisitas pada ikan (Angka, 1997 dalam Angka, 2005). Apabila disuntikkan ke tubuh ikan, produk ekstraseluler ini dapat menimbulkan kematian dan perubahan jaringan. Selain menghasilkan eksotoksin, bakteri A. hydrophila juga memproduksi endotoksin yang terdiri dari protein, lipid dan polisakarida. Endotoksin ini juga

berperan salam penentuan tingkat patogenitas bakteri (Brenden dan Huizinga, 1986 dalam Riyanto, 1993).

Karakteristik bakteri A. hydrophila di perairan sangat beragam yang disebabkan oleh perbedaan produksi endotoksin dan eksotoksin yang tidak sama untuk setiap galurnya (Angka, 2005). Munro (1992) dalam Hanafi (2006) mengatakan bahwa endotoksin atau lipopolisakarida (LPS) dari bakteri Gram negatif adalah toksik karena dapat menginduksi berbagai kondisi patologi, termasuk shock, hemoragik, fever, dan kematian.

2.5 Bahan Antibakteri

Bahan antibakteri adalah suatu senyawa kimia yang dapat menghambat pertumbuhan ataupun membunuh bakteri. Kualitas atau kemampuan daya antibakterial ini ditentukan oleh aktivitas dan spektrum zat tersebut terhadap bakteri (Agustian, 2007). Antibiotik yang bisa digunakan dengan baik, adalah antibiotik yang memiliki sifat toksisitas selektif setinggi mungkin. Sifat toksisitas selektif artinya zat antibakteri tersebut harus toksik untuk bakteri tetapi tidak toksik untuk inang (host). Bila ada zat antibakteri yang sangat toksik untuk bakteri tetapi membahayakan untuk inang bukan kriteria antibakteri yang baik, bahkan dianggap beracun. Karena dasar pengobatan terhadap suatu penyakit adalah usaha untuk menyembuhkan penyakit tersebut tanpa mengakibatkan adanya bahaya ataupun adanya efek samping yang merugikan pengguna suatu obat-obatan.

Kemampuan suatu zat antibakteri dalam menghambat pertumbuhan bakteri dipengaruhi oleh berbagai faktor, antara lain (1) Konsentrasi zat antibakteri, (2) Waktu kontak dengan zat antibakteri, (3) Suhu lingkungan, (4) Sifat-sifat bakteri (jenis, umur, konsentrasi, dan keadaan bakteri), (5) Sifat-sifat fisik dan kimia makanan termasuk kadar air, pH, dan jenis senyawa di dalamnya (Davidson and Branen, 1993 dalam Agustian, 2007).

Zat antibakteri yang terdapat dalam tanaman khususnya rempah-rempah juga dapat dimanfaatkan untuk menghambat pertumbuhan jasad renik. Rempah-rempah memiliki kemampuan untuk mensintesis komponen aroma seperti phenol dan turunannya yang selain berfungsi sebagai pembentuk aroma juga mampu digunakan sebagai penghambat mikroorganisme, serangga, dan tanaman lain

(Cowan, 1985). Salah satu jenis rempah-rempah yang telah diketahui mengandung zat antibakteri adalah bawang putih.

2.6 Kualitas Air

Kualitas air merupakan faktor penting untuk mendukung kehidupan ikan. Kualitas air yang kurang baik dapat menyebabkan ikan mudah terserang penyakit. Suhu dapat diartikan sebagai derajat panas suatu perairan. Suhu sangat berpengaruh terhadap organisme di perairan dengan perannya sebagai controlling

faktor bagi perairan. Suhu sangat berperan dalam mengendalikan kondisi ekosistem perairan. Suhu juga mempengaruhi kelarutan oksigen dalam perairan. Ikan tropis tumbuh dengan baik pada suhu air antar 25-32oC (Boyd, 1982). Suhu air media pemeliharaan yang optimal berada dalam kisaran 28-30oC. Menurut Taufik (1984) dalam Ayuningtyas (2009), pada temperatur yang tinggi, bakteri A. hydrophila dan Pseudomonas fluorescens akan lebih menyerang ikan, karena temperatur ini ikan mengalami stres sehingga daya tahan tubuhnya akan menurun. Oksigen terlarut merupakan faktor yang dibutuhkan oleh ikan. Kandungan oksigen terlarut kurang dari 1 mg/l akan mematikan ikan dan pada kandungan antara 1-5 mg/l cukup mendukung kehidupan ikan. Kandungan oksigen lebih dari 5 mg/l merupakan kandungan yang menyebabkan pertumbuhan normal ikan (Boyd, 1982). Bakteri A. hydrophila, A. salmonicida, dan P. fluorescens dapat menyerang ikan dengan kondisi air dengan kadar oksigen terlarut rendah (Taufik, 1984 dalam Ayuningtyas, 2009).

Power of Hidrogen (pH) didefinisikan sebagai logaritma negatif dari aktivitas ion hidrogen (Dewi, 2007). Beberapa faktor yang mempengaruhi pH di perairan yaitu aktivitas fotosintesis, suhu, dan terdapatnya anion dan kation (Safitri, 2007). Efek pH terhadap organisme budidaya (Boyd, 1982) dapat dilihat pada Tabel 3.

Tabel 3. Efek pH terhadap organisme budidaya

pH Efek Terhadap Organisme

<4 Mati

5 tidak bereproduksi, pertumbuhan terhambat 6 pertumbuhan terhambat

7 pertumbuhan baik 8 pertumbuhan baik 9 pertumbuhan terhambat

10 tidak bereproduksi, pertumbuhan terhambat >11 Mati

Sumber : Boyd (1982)

Perairan kolam yang produktif dan ideal bagi kehidupan ikan dan organisme lain adalah perairan dengan pH 6,5-9 (Boyd, 1982). Pada pH antara 4-6,5 dan pH antara 9-11 pertumbuhan ikan akan lambat. Kematian ikan akan terjadi umumnya ketika perairan berubah menjadi sangat asam (pH < 4) atau menjadi sangat basa (pH < 11). Menurut Boyd (1982), kisaran pH 6,5-9,0 merupakan kondisi yang baik untuk pertumbuhan ikan.

Menurut Boyd (1982), zat beracun yang berbahaya bagi kehidupan ikan lele adalah amonia. Amonia yang tinggi akan meningkatkan konsumsi oksigen pada jaringan dan menyebabkan kerusakan pada insang serta mengurangi kemampuan darah dalam mentransportasi oksigen. Amonia merupakan racun bagi ikan. Konsentrasi amonia yang ideal dalam air bagi kehidupan ikan tidak boleh melebihi 1 ppm, karena jika konsentrasinya berlebih akan menghambat daya serap hemoglobin dalam darah. Batas konsentrasi kandungan amonia yang dapat mematikan kehidupan ikan lele adalah antara 0,1-0,3 mg/liter air.

III. BAHAN DAN METODE

3.1 Waktu dan Tempat

Penelitian ini dilakukan pada bulan Maret – Agustus 2009. Tempat penelitian di Laboratorium Kesehatan Ikan, Departemen Budidaya Perikanan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan, Institut Pertanian Bogor.

3.2 Alat dan Bahan

Alat-alat yang digunakan pada penelitian ini, meliputi akuarium sebanyak 12 buah, peralatan aerasi, seser, kain lap, syringe, termometer, pH-meter, spektrofometer, erlenmeyer, eppendorf, cawan petri, pipet volumetrik, mikropipet, tabung reaksi, jarum ose, batang penyebar, penangas air, water shaker, sentrifus, kertas saring Whatman No. 42, alat bedah, mikroskop, inkubator, bunsen dan autoklaf.

Bahan yang digunakan adalah ikan lele dengan ukuran panjang 11-13 cm, pelet, putih telur, isolat bakteri Aeromonas hydrophila, ekstrak bawang putih Allium sativum, ekstrak daun meniran Phyllanthus niruri, TSA (Tripticase Soy Agar), LB (Luria Bertani), larutan PBS (Phosphat Buffer Saline) steril dan akuades.

3.3 Metode Penelitian

3.3.1 Penyediaan Bakteri Uji

Bakteri uji yang digunakan adalah Aeromonas hydrophila. Bakteri tersebut disuntikkan secara intramuskuler pada tiga ekor ikan lele untuk menguji virulensinya. Setelah itu dilakukan reisolasi bakteri dengan menggoreskan jarum ose ke bagian ginjal kemudian dibiakkan di media TSA dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu kamar. Koloni bakteri tunggal yang tumbuh, diisolasi di media TSA dengan teknik empat kuadran kemudian diinkubasi selama 24 jam. Untuk mendapatkan biakan murni maka setiap koloni bakteri yang tumbuh terpisah dan berlainan morfologinya diisolasi kembali ke dalam media TSA miring dan diinkubasi pada suhu kamar selama 24 jam. Karakterisasi yang dilakukan meliputi pengamatan morfologi koloni secara visual, meliputi warna, elevasi dan tepian sel. Uji yang dilakukan meliputi pewarnaan Gram, uji motilitas, uji oksidase dan fermentase, uji katalase, uji oksidase dan uji gelatinase. Identifikasi yang digunakan berdasarkan Bergey’s Mannual of Determination

3.3.2 Regenerasi Bakteri Uji

Bakteri yang diuji diregenerasi terlebih dahulu sebelum digunakan. Bakteri stok dari kultur primer dibiakkan dalam agar miring yaitu sebanyak satu ose digoreskan ke agar miring dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 27oC. Sebanyak satu ose bakteri diambil dari biakan terbaru berumur 24-48 jam dan diinokulasikan ke dalam Erlenmeyer yang berisi 25 ml media LB, kemudian diinkubasi selama 24 jam dengan suhu 27oC pada

water shaker.

3.3.3 Uji LD50

Penentuan tingkat virulensi bakteri dilakukan dengan menghitung nilai LD50 nya.

Hal ini penting untuk mengetahui konsentrasi bakteri yang digunakan. Untuk uji LD50

digunakan akuarium yang disusun untuk empat perlakuan. Masing-masing dengan kepadatan 105 sampai 109 cfu/ml secara intramuskuler sebanyak 0,1 ml/ekor pada seluruh ikan sesuai dengan label kepadatan bekteri pada setiap akuarium. Pengamatan dilakukan dengan label mengamati jumlah ikan yang masih hidup dan mati sampai hari ke tujuh. Kemudian dilakukan perhitungan untuk mengetahui nilai LD50 yaitu konsentrasi pada saat

3.3.4 Penyediaan Bahan dan Ekstrak

Proses penyediaan daun meniran adalah sebagai berikut : Daun meniran dibersihkan dari kotoran

Daun meniran dikeringkan di udara terbuka tanpa terkena sinar matahari (Harbone, 1987 dalam Ayuningtyas, 2008).

Daun meniran diblender

Diayak dengan saringan halus

Bubuk daun meniran

Sedangkan untuk bawang putih adalah sebagai berikut : Bawang putih dibersihkan dari kulitnya

Bawang putih diiris tipis

Bawang putih dikeringkan di udara terbuka tanpa terkena sinar matahari (± 3 hari)

Bawang putih dioven (suhu 60oC, ± 1 jam)

Bawang putih diblender

Diayak dengan saringan halus

Bubuk bawang putih

Berdasarkan penelitian Ayuningtyas (2008), dosis daun meniran yang efektif untuk pencegahan adalah 5 ppt dan untuk pengobatan adalah 10 ppt. Cara pembuatannya yaitu sebagai berikut, untuk pencegahan bubuk daun meniran sebanyak 50 g dilarutkan dengan akuades steril sebanyak 10 ml, sehingga didapatkan konsentrasi 5 mg/ml sedangkan untuk pengobatan bubuk daun meniran sebanyak 100 mg dilarutkan dengan akuades steril sebanyak 10 ml, sehingga didapatkan konsentrasi 10 mg/ml. Campuran antara bubuk

meniran dan akuades tersebut direbus pada suhu 90oC selama 30 menit (Sopiana, 2005). Ekstrak tersebut kemudian divortex supaya homogen dan disaring dengan kertas Whatmann.

Dosis bawang putih yang efektif untuk pencegahan adalah 20 ppt dan untuk pengobatan adalah 40 ppt. Cara pembuatan larutan, untuk pencegahan adalah dengan melarutkan bubuk bawang putih sebanyak 200 mg kedalam akuades steril sebanyak 10 ml, sehingga didapatkan konsentrasi 20 mg/ml sedangkan untuk pengobatan adalah dengan melarutkan bubuk bawang putih sebanyak 400 mg kedalam akuades steril sebanyak 10 ml, sehingga didapatkan konsentrasi 40 mg/ml. Ekstrak tersebut kemudian divortex supaya homogen disaring dengan kertas Whatman.

3.3.5 Persiapan Wadah dan Ikan Uji

Akuarium dicuci dengan sabun dan dibilas serta diisi air. Kemudian dimasukkan larutan klorin 100 ppm ke dalam akuarium dan diaerasi kuat selama 24 jam. Setelah itu dibilas lagi dengan air. Akuarium dilengkapi dengan penutup yang terbuat dari kain kasa agar ikan tidak melompat ke luar serta ditutup dengan plastik hitam di sekeliling akuarium agar ikan tidak stres. Tiap akuarium diisi 6 ekor ikan uji.

Ikan uji yang akan digunakan memiliki panjang 11-13 cm. Mula-mula ikan direndam dengan konsentrasi 30 ppm larutan garam selama 5 menit untuk menghilangkan ektoparasit. Setelah itu ikan diaklimatisasi terlebih dahulu agar ikan terbiasa hidup dalam akuarium uji selama 3 hari dengan pemberian pakan berupa pelet apung berkadar protein 28%. Jumlah pakan yang diberikan sebanyak 3% dari berat badan ikan per hari dengan frekuensi pemberian 2x sehari pada pagi dan sore hari.

3.3.6 Penyediaan Pelet Uji

Pelet yang diberikan ditimbang terlebih dahulu sesuai dengan biomassa masing-masing ikan yang berada dalam akuarium. FR yang digunakan adalah 3% dari biomassa. Rumus yang digunakan :

Biomassa = Nt Wt

Jumlah pakan = FR Biomassa

Keterangan : Nt = Jumlah ikan (ekor) Wt = Berat rata-rata (gram)

Jumlah ekstrak yang diberikan, yaitu meniran : bawang putih = 1 : 2, sedangkan jumlah ekstrak daun meniran dan bawang putih yang dicampur ke pakan adalah 0,1 ml/g

pakan. Setelah ekstrak tercampur dengan pakan, pelet dibalut dengan putih telur sebagai perekat, kemudian diangin-anginkan sebelum diberikan ke ikan.

3.3.7 Uji In Vivo

Pengujian in vivo dilakukan untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak meniran dan bawang putih lewat pakan terhadap respon kekebalan tubuh ikan lele setelah diinfeksi A. hydrophila. Dari uji ini dapat dilihat potensi meniran dan bawang putih sebagai imunostimulan. Perlakuan yang diberikan berupa :

1. Kontrol negatif : disuntik dengan PBS pada hari ke-8

2. Kontrol positif : disuntik bakteri A. hydrophila sebanyak 0,1 ml/ekor pada hari ke-8

3. Perlakuan pencegahan : diberikan pakan uji seminggu sebelum disuntik bakteri

A. hydrophila sebanyak 0,1 ml/ekor pada hari ke-8

4. Perlakuan pengobatan : disuntik bakteri A. hydrophila sebanyak 0,1 ml/ekor pada hari ke-8, diberikan pakan uji pada hari ke-10 sampai hari ke-17

Masing-masing perlakuan dilakukan sebanyak empat kali ulangan dan diamati selama 9 hari setelah uji tantang dengan parameter yang diamati meliputi respon makan ikan, pertambahan bobot, kematian ikan uji, gejala klinis dan pengamatan organ dalam.

Pemberian pakan uji Injeksi A. hydrophila

Pencegahan

0 8 17

Injeksi A. hydrophila Pemberian pakan uji

Pengobatan

0 8 10 17

Injeksi A. hydrophila

Kontrol Positif

0 8 17

Injeksi PBS

Kontrol Negatif

0 8 17

Gambar 4. Skema metode penelitian (uji in vivo)

3.4 Parameter Yang Diamati 3.4.1 Respon Makan Ikan

Pengamatan respon makan ikan dilakukan setiap hari selama 16 hari dimulai pada saat ikan diberi perlakuan sampai hari ke-16 setelah infeksi dengan melihat reaksi ikan uji pada saat diberi makan dan sisa pakan yang tersisa.

3.4.2 Pertambahan Bobot Tubuh

Pengukuran bobot rata-rata dilakukan pada awal, tengah dan akhir perlakuan dengan menggunakan timbangan digital dengan ketelitian 0,001. Ikan pada masing-masing akuarium ditimbang biomassanya, kemudian dihitung nilai rataan bobot setiap perlakuan dan pertambahan bobotnya.

Pertambahan bobot ikan dihitung dengan rumus (Zonneveld et al., 1991 dalam Ayuningtyas, 2008):

Pertambahan bobot (%) =

Wo Wo Wt

x 100%

Keterangan : Wt = bobot rata-rata akhir (gram) Wo = bobot rata-rata awal (gram) 3.4.3 Kematian Ikan

Pengamatan terhadap kematian ikan dilakukan setiap hari hingga akhir perlakuan setelah penginfeksian dengan bakteri A. hydrophila. Tingkat kematian ikan uji dihitung dengan rumus (Effendi, 1979 dalam Ayuningtyas, 2008 ) :

Mortalitas (%) = Jumlah ikan yang mati (ekor) x 100% Jumlah populasi (ekor)

3.4.4 Gejala Klinis dan Pengukuran Diameter Klinis

Pengamatan terhadap gejala klinis dilakukan setiap hari setelah ikan diinfeksi dengan bakteri A. hydrophila. Pengukuran diameter klinis dilakukan dengan mengukur luas kelainan klinis dengan menggunakan penggaris, kemudian data yang telah diperoleh diberi skor.

Nilai skor kelainan yang menunjukkan tingkat keparahan infeksi dilakukan dengan ketentuan seperti tertera pada Tabel 4.

Tabel 4. Perhitungan skor kelainan klinis

Gejala klinis Kisaran diameter Kategori Skor

Radang = 1

0,1 - 0,4 cm R1 1 x 1 = 1 1,5 - 2,4 cm R2 2 x 1 = 2 2,5 - 3,4 cm R3 3 x 1 = 3 3,5 - 4,4 cm R4 4 x 1 = 4

Hemoragi = 2

0,1 - 0,4 cm HE1 1 x 2 = 2 1,5 - 2,4 cm HE2 2 x 2 = 4 2,5 - 3,4 cm HE3 3 x 2 = 6 3,5 - 4,4 cm HE4 4 x 2 = 8

Tukak = 3

0,1 - 0,4 cm T1 1 x 3 = 3 1,5 - 2,4 cm T2 2 x 3 = 6 2,5 - 3,4 cm T3 3 x 3 = 9 3,5 - 4,4 cm T4 4 x 3 = 12

Sembuh = 0 - SM 0

Normal = 0 - N 0

Mati = 4 - M 4

3.4.5 Pengamatan Organ Dalam

Pada akhir perlakuan dilakukan pengamatan organ dalam yang bertujuan untuk mengetahui kelainan yang terjadi dengan cara membandingkan perubahan morfologi dan warna organ dalam ikan perlakuan pencegahan, pengobatan dan kontrol positif dengan perlakuan kontrol negatif. Satu ekor ikan uji diambil secara acak dari setiap perlakuan kemudian dibedah dan diamati organ dalamnya.

3.4.6 Kualitas Air

Parameter kualitas air yang akan diamati meliput pengukuran suhu, pH, DO (oksigen terlarut) dan TAN (total ammonium nitrogen). Pengukuran parameter kualitas air dilakukan pada awal dan akhir penelitian.

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil

4.1.1 Identifikasi Bakteri Uji

Hasil pengujian bakteri A. hydrophila asal laboratorium kesehatan menunjukkan bahwa bakteri tersebut virulen karena ikan uji mengalami gejala kelainan klinis yaitu radang sampai tukak. Hasil uji biokimia bakteri uji maupun bakteri reisolasi menunjukkan bahwa bakteri tersebut adalah bakteri A. hydrophila

(Tabel 5) (Aoki, 1999).

Tabel 5. Hasil identifikasi bakteri A. hydrophila

Isolat Morfologi koloni Uji biokimia

warna elevasi tepian Gram motilitas O/F katalase oksidase Gelatinase Murni krem cembung halus - + F + + + reisolasi krem cembung halus - + F + + +

4.1.2 Uji LD50

Hasil pengujian LD50 pada bakteri A. hydrophila yang disuntikkan ke ikan lele dumbo didapatkan konsentrasi bakteri sebanyak 108 cfu/ml (Lampiran 2). Konsentrasi tersebut dapat menyebabkan kematian populasi ikan lele dumbo sebanyak 50% dalam waktu 7 hari.

4.1.3 Uji In Vivo

4.1.3.1 Respon Makan Ikan Uji

Berdasarkan pengujian, didapatkan hasil bahwa ikan uji pada 7 hari sebelum penyuntikan memiliki respon makan yang sangat baik untuk semua kontrol (kontrol negatif, kontrol positif, perlakuan pencegahan maupun perlakuan pengobatan). Namun setelah ikan disuntik dengan bakteri maupun PBS pada hari ke-8, tidak menunjukkan adanya nafsu makan. Hal ini dikarenakan ikan mengalami stres akibat penyuntikan. Keadaan tersebut tidak berlangsung lama, keesokan harinya (hari ke-9) ikan uji mulai mengalami peningkatan nafsu makan, walaupun hanya sedikit dan tidak pada semua ikan uji. Respon makan berangsur baik sampai pada akhir perlakuan.

Pada kontrol negatif, nafsu makan ikan sangat baik sampai akhir perlakuan. Hanya saja pada saat setelah disuntik PBS, ikan tidak menunjukkan respon makan sama sekali. Namun pada keesokan harinya (hari ke-9) sampai pada akhir perlakuan, respon ikan kembali normal.

Pada perlakuan kontrol positif, ikan tidak menunjukkan nafsu makan setelah disuntik dengan bakteri A. hydrophila. Pada hari ke-9 paska penginfeksian, ikan uji tetap masih tidak menunjukkan respon makan. Kemudian pada hari ke-10 sampai hari ke-13, baru menunjukkan adanya respon makan namun hanya sedikit. Pada hari ke-14 sampai akhir perlakuan, nafsu makan ikan berangsur-angsur baik.

Pada perlakuan pencegahan, ikan uji juga tidak menunjukkan respon makan setelah disuntik (hari ke-8). Pada hari ke-9, ikan mulai menunjukkan respon makan namun hanya sedikit dan berlangsung sampai hari ke-10. Pada hari ke-11, respon makan mulai membaik. Respon makan mengalami peningkatan menjadi sangat baik pada hari ke-12 sampai akhir perlakuan.

Pada perlakuan pengobatan, ikan uji terlihat tidak nafsu makan pada hari ke-8 setelah penyuntikan. Pada hari ke-9, ikan mulai ada nafsu makan namun hanya sedikit sampai hari ke-11. Pada hari ke-12 sampai akhir perlakuan, nafsu makan ikan sangat baik.

4.1.3.2 Pertambahan Bobot Ikan Uji

Pertambahan bobot ikan uji dapat dilihat pada Gambar 6. Dapat dilihat pada gambar tersebut, bahwa semua perlakuan (kontrol negatif, kontrol positif, perlakuan pencegahan, perlakuan pengobatan) rata-rata mengalami peningkatan bobot tubuh sampai pada tengah perlakuan (hari ke-8).

Pada perlakuan kontrol negatif, rata-rata bobot tubuh mengalami peningkatan paling tinggi yaitu sebesar 12,69 ± 0,87% dari rata-rata pada awal perlakuan sebesar 10,60 ± 0,59 gram. Sedangkan peningkatan dari awal perlakuan sampai tengah perlakuan sebesar 5,93 ± 0,24%.

Gambar 6. Pertambahan bobot rata-rata ikan lele dumbo Clarias sp. (%) selama perlakuan

Pada perlakuan kontrol positif, rata-rata bobot tubuh mengalami peningkatan sampai pada tengah perlakuan saja, yaitu sebesar 5,20 ± 0,64% dari bobot awalnya adalah 10,42 ± 0,67 gram. Setelah diinfeksi dengan bakteri A. hydrophila (hari ke-8), ikan mengalami penurunan bobot tubuh sampai akhir perlakuan. Rata-rata bobot tubuh menurun sebesar 1,87 ± 0,58%, dari bobot rata-rata sebelum penginfeksian yaitu sebesar 10,97 ± 0,15 gram.

Pada perlakuan pencegahan, bobot rata-rata ikan uji pada awal perlakuan yaitu 10,64 ± 0,51 gram dan ikan uji mengalami peningkatan bobot rata-rata sebesar 2,49 ± 0,34% sampai pada tengah perlakuan (hari ke-8). Setelah penginfeksian bakteri A. hydrophila, rata-rata bobot tubuh ikan mengalami peningkatan yang lebih tinggi dari sebelumnya yaitu sebesar 7,30 ± 1,00%. Ikan

Lampiran 7. Kelainan klinis dan diameter kelainan klinis ikan lele kontrol positif setelah diinfeksi bakteri

A. hydrophila

Keterangan :

MR

= Mati dengan kelainan klinis berupa radang

HE

= Hemoragi

T

= Tukak

MT

= Mati dengan kelainan klinis berupa tukak

Angka dalam kurung

= Panjang kelainan klinis (cm)

Hari ke-

Diameter klinis ikan ke-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24

9 MR

(1,8) HE (1,6) MR (2,0) HE (0,4) MR (2,1) HE (1,4) HE (1,0) HE (1,7) HE (2) HE (2,3) HE (0,5) HE (0,8) HE (2,5) HE (1,7) HE (1,3) HE (1,4) HE (2) HE (2) HE (0,8) HE (2) HE (2) HE (1,8) HE (2,2) HE (2,2)

10 - T

(2,3) - T (0,7) -

T (1,5) T (0,9) T (1) T (2) MT (2,8) T (0,7) T (3) MT (2,5) T (2,5) T (1,6) T (1,7) T (2,3) T (2,4) T (1,3) T (2,8) MT (1,5) MT (2,5) MT (2,5) T (2,5)

11 - MT

(2,3) - T (0,6) -

T (1,4) T (0,7) T (1) MT (2,3) -

T (0,7)

MT (3,5) -

MT (2,7) T (1,7) MT (3,0) T (2) T (2,5) T (1,5) MT

(3,5) - - -

MT (3,0)

12 - - - T

(0,5) - T (1,3)

T (0,7)

T

(1) - -

T

(0,7) - - -

T (1,8) -

T (1,8)

T (2,5)

T

(1,3) - - - - -

13 - - - T

(0,4) - T (1,2)

T (0,7)

T

(0,6) - -

T

(0,6) - - -

T (1,3) -

T (1,6)

T (2,1)

T

(1) - - - - -

14 - - - T

(0,4) - T (1,2)

T (0,6)

T

(0,6) - -

T

(0,6) - - -

T (1,1) -

T (1,6)

T (2,1)

T

(1) - - - - -

15 - - - T

(0,2) - T (1,2)

T (0,6)

T

(0,6) - -

T

(0,6) - - -

T (1,1) -

T (1,6)

T (2)

T

(1) - - - - -

16 - - - T

(0,2) - T (1)

T (0,5)

T

(0,6) - -

T

(0,6) - - -

T (1) -

T (1,5)

T (1,9)

T

(0,9) - - - - -

17 - - - T

(0,2) - T (0,9)

T (0,5)

T

(0,6) - -

T

(0,6) - - -

T (1) -

T (1,5)

T (1,9)

T

Lampiran 8. Kelainan klinis dan diameter kelainan klinis ikan lele perlakuan pencegahan setelah diinfeksi bakteri

A. hydrophila

Hari ke-

Diameter klinis ikan ke-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24

9 HE (1,2) T (0,2) HE (1) HE (1,3) MR (1) HE (1,4) MH (1,3) HE (1,8) HE (0,6) HE (1) R (0,3) MR (2,2) HE (1,8) HE (1,6) HE (1,3) HE (1,5) HE (1,5) HE (1.3) HE (1,5) HE (2,7) HE (1,4) HE (0,8) HE (0,7) HE (0,7) 10 MT

(2) T (0,5) T (1) T (1,7) -

MT (2,2) -

MT (2,5) T (1,4) T (0,8) T (0,3) -

T (1,8) T (2,5) T (2,8) T (2) T (2,7) T (1,3) T (1) MT (3) T (1,3) T (1,3) T (1,9) T (1,9) 11 - T

(0,4) T (1,1)

T

(1,6) - - - - MT (2,5)

T (0,8)

T (0,3) -

T (1,7) T (1,9) T (1,8) T (2) MT (3,3) T (1,4) T (0,9) -

T (1,1) T (1,5) T (2,8) T (2,3) 12 - T

(0,4) T (0,8)

T

(1,5) - - - - - T (0,7)

T (0,3) -

T (1,7) T (1,5) T (1,7) T (1,7) -

T (1,4)

T (0,8) -

T (1,2) T (1,1) T (1,5) T (1,7) 13 - T

(0,3) T (0,7)

T

(1,4) - - - - - T (0,6)

T (0,3) -

T (1,7) T (1,4) T (1,2) T (1,7) -

T (1,4)

T (0,8) -

T (1,2) T (0,8) T (1,5) T (1,7) 14 - T

(0,3) T (0,6)

T

(1,3) - - - - - T (0,6)

T (0,3) -

T (1,7) T (1,4) T (1,2) T (1,7) -

T (1,4)

T (0,7) -

T (1,1) T (0,8) T (1,5) T (1,7) 15 - T

(0,3) T (0,6)

T

(1,1) - - - - - T (0,6)

T (0,3) -

T (1,7) T (1,2) T (1,2) T (1,7) -

T (1,4)

T (0,6) -

T (1,1) T (0,7) T (1,5) T (1,5) 16 - SM SM _(1,1) T - - - SM SM - _(1,6) T _(1,2) T _(1,2) T _(1,6) T - _(1,2) T _(0,6) T - ₍₁₎ T _(0,7) T _(1,1) T _(1,3) T

17 - SM SM T

(1) - - - SM SM -

T (1,6) T (1,1) T (1) T (1,6) -

T

(1) SM - T (1) T (0,7) T (1,1) T (1,1)

Keterangan : HE

= Hemoragi

MH

= Mati dengan kelainan klinis berupa Hemoragi

T

= Tukak

MT

= Mati dengan kelainan klinis berupa tukak

SM

= Sembuh

Lampiran 9. Kelainan klinis dan diameter kelainan klinis ikan lele perlakuan pengobatan setelah diinfeksi bakteri

A. hydrophila

Hari ke-

Diameter klinis ikan ke-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24

9 HE (0,8) MR (1,5) HE (2,5) MR (2) MR (2,1) MH (3) HE (1) HE (1) HE (0,7) HE (1,5) HE (2,4) HE (0,6) HE (1,2) HE (2,2) HE (1,3) HE (1,1) HE (0,8) HE (1,2) HE (1,5) HE (1,5) HE (1,4) HE (0,6) HE (1,9) HE (2) 10 T

(1,5) - T

(2,6) - - - MT (1,5) T (1,4) T (0,7) MT (1,5) MT (3) T (1,2) T (1,6) T (2,5) T (1,5) T (1,5) T (1,3) MT (1,3) T (1,5) MT (2,9) T (1,7) MT (0,8) T (1,5) MT (2) 11 T

(1,5) - MT

(3) - - - - T (1,4)

T

(1,3) - - T (1,2) T (1,5) MT (3,5) T (1,5) T (1,5) T (1,3) -

T (1,6) -

T (1,9) -

T (0,9) - 12 T

(1,2) - - - - T (1,1)

T

(0,7) - - T (1,2)

T (1,4) -

T (1,2)

T (1,2)

T (1,2) -

T (1,6) -

T (1,9) -

T (0,8) - 13 T

(1) - - - -

T (1)

T

(0,6) - - T (1,1)

T (1,2) -

T (1,1)

T (1)

T (1,2) -

T (1,3) -

T (1,5) -

T (0,7) - 14 T

(1) - - - -

T (1)

T

(0,6) - - T (1)

T (1,1) -

T (1,1)

T (1)

T (1,1) -

T (1,3) -

T (1,4) -

T (0,7) - 15 T

(0,9) - - - - T (1)

T

(0,5) - - T (1)

T (1,1) -

T (1,1)

T (1)

T (1,1) -

T (1,3) -

T (1,2) -

T (0,7) - 16 _(0,9) T - - - ₍₁₎ T _(0,3) T - - ₍₁₎ T ₍₁₎ T - ₍₁₎ T ₍₁₎ T _(1,1) T - _(1,3) T - _(1,2) T - _(0,6) T -

17 T

(0,9) - - - - T

(1) SM - - T (1)

T (0,9) -

T (0,9)

T (1)

T (1,1) -

T (1) -

T

(1) - SM -

Keterangan : MR

= Mati dengan kelainan klinis berupa radang

HE

= Hemoragi

MH

= Mati dengan kelainan klinis berupa Hemoragi

T

= Tukak

MT

= Mati dengan kelainan klinis berupa tukak

SM

= Sembuh

Lampiran 10. Skor rata-rata kelainan klinis ikan lele kontrol positif setelah diinfeksi bakteri

A. hydrophila

Hari ke-

Skor kelainan klinis ikan ke-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Jumlah Rata-rata

9

4 4 4 2 4 3 3 4 4 4

3

3

6

4

3

3

4

4

3

4

4

4

4

4

89

3,708

10

- 8 - 6 - 8 6 6 8 4

6 12 4

8

8

8

8

8

6 12 4

4

4 12

150

7,143

11

- 4 - 6 - 6 6 6 4

-

6

4

-

4

8

4

8 12 8

4

-

-

-

4

94

5,875

12

- - - 6 - 6 6 6 -

-

6

-

-

-

8

-

8 12 6

-

-

-

-

-

64

7,111

13

- - - 4 - 6 6 6 -

-

6

-

-

-

6

-

8

8

6

-

-

-

-

-

56

6,222

14

- - - 4 - 6 6 6 -

-

6

-

-

-

6

-

8

8

6

-

-

-

-

-

56

6,222

15

- - - 4 - 6 6 6 -

-

6

-

-

-

6

-

8

8

6

-

-

-

-

-

56

6,222

16

- - - 4 - 6 6 6 -

-

6

-

-

-

6

-

8

8

6

-

-

-

-

-

56

6,222

17

- - - 4 - 6 6 6 -

-

6

-

-

-

6

-

8

8

6

-

-

-

-

-

56

6,222

Lampiran 11. Skor rata-rata kelainan klinis ikan lele perlakuan pencegahan setelah diinfeksi bakteri

A. hydrophila

Hari ke-

Skor kelainan klinis ikan ke-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Jumlah Rata-rata

9

3 4 3 3 4 3 4 4 3 3

1

4

4

4

3

4

4

3

4

6

3

3

3

3

83

3,458

10

4 6 6 8 - 4 - 4 6 6

4

-

8

8

8

8

8

6

6

4

6

6

6

6

128

6,095

11

- 4 6 8 - - - - 4 6

4

-

8

8

8

8

4

6

6

-

6

8

8

6

108

6,353

12

- 4 6 8 - - - - -

6

4

-

8

8

8

8

-

6

6

-

6

6

8

6

98

6,533

13

- 4 6 6 - - - - -

4

4

-

8

6

6

8

-

6

6

-

6

6

8

4

88

5,867

14

- 4 4 6 - - - - -

4

4

-

8

6

6

8

-

6

6

-

4

6

6

4

82

5,467

15

- 4 4 6 - - - - -

4

4

-

8

6

6

8

-

6

4

-

4

6

6

4

80

5,333

16

- 0 0 6 - - - - -

0

0

-

8

6

6

8

-

6

4

-

4

6

6

4

64

4,267

17

- 0 0 6 - - - - -

0

0

-

8

6

6

8

-

6

0

-

4

6

6

4

60

4,000

Lampiran 12. Skor rata-rata kelainan klinis ikan lele perlakuan pengobatan setelah diinfeksi bakteri

A. hydrophila

Hari ke-

Skor kelainan klinis ikan ke-

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 Jumlah Rata-rata

9

3 4 6 4 4 3 3 3 3 4

4

3

3

4

3

3

3

3

4

4

3

4

4

4

86

3,583

10

12 - 12 - - - 4 6 6 4

4

6

8 12 8

8

6

4

8

4

8

4

8

4

136

6,800

11

8

-

4

- - - - 6 6

-

-

6

8

4

8

8

6

-

8

-

8

-

8

-

88

6,769

12

8

-

-

- - - - 6 6

-

-

6

8

-

8

8

6

-

8

-

8

-

8

-

80

7,273

13

6

-

-

- - - - 6 6

-

-

6

6

-

6

6

6

-

6

-

8

-

6

-

68

6,182

14

6

-

-

- - - - 6 6

-

-

6

6

-

6

6

6

-

6

-

6

-

6

-

66

6,000

15

6

-

-

- - - - 6 6

-

-

6

6

-

6

6

6

-

6

-

6

-

6

-

66

6,000

16

6

-

-

- - - - 6 6

-

-

6

6

-

6

6

6

-

6

-

6

-

6

-

66

6,000

17

6

-

-

- - - - 6 0

-

-

6

6

-

6

6

6

-

6

-

6

-

0

-

54

4,909