Penyiapan kultur sel HaCaT
bebas DPPH. Prosedur yang digunakan mengadaptasi metode yang dikemukakan oleh Nepote et al. 2005, Que et al. 2006, Villano et al.
2006, Stef et al. 2009. Uji ini menggunakan rancangan acak lengkap yang terdiri atas 4
perlakuan. Perlakuan 1 merupakan larutan ekstrak rimpang Temu Giring dengan konsentrasi akhir 100 ppm dalam metanol. Perlakuan 2 merupakan
larutan ekstrak rimpang Temu Ireng dengan konsentrasi akhir 100 ppm dalam metanol. Perlakuan 3 merupakan larutan ekstrak rimpang Temu Putih dengan
konsentrasi akhir 100 ppm dalam metanol. Perlakuan 4 merupakan larutan ekstrak daun Ki Urat dengan konsentrasi akhir 100 ppm dalam metanol.
Masing-masing perlakuan dilakukan 3 kali pengulangan. Setiap perlakuan diberikan larutan radikal DPPH dengan konsentrasi akhir 0.1 mM dalam
metanol, kemudian diinkubasi selama 40 menit. Absorbansi DPPH diukur pada 517 nm. Prosedur yang sama dilakukan terhadap blanko yang berupa larutan
metanol. Parameter yang diukur adalah kapasitas total antioksidan TAC yang dihitung dengan cara :
TAC
DPPH
= A
blanko
– A
sampel
A
blanko
x 100 Data persentase kapasitas total antioksidan dinyatakan sebagai rataan
dari 3 kali pengulangan. Data dianalisis dengan analisis sidik ragam satu arah One-way analysis of variance ANOVA menggunakan perangkat lunak SPSS
17.0. Perbedaan rataan persentase kapasitas total antioksidan diuji lanjut dengan uji Duncan.