Kerangka Teori Kerangka Konsep

37

BAB 3 METODE PENELITIAN

3.1 Desain Penelitian

Desain yang digunakan dalam penelitian adalah desain eksperimental laboratorium

3.2 Waktu dan Tempat

3.3.1 Waktu Penelitian

Penelitian dilakukan pada Bulan Maret - Agustus 2014 3.3.2 Tempat Penelitian Penelitian dilakukan di laboratorium Animal House, laboratorium Biologi, dan laboratorium Pharmacy Drug Research PDR, gedung Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah, Jalan Kertamukti Nomor 05 Pisangan Ciputat, Tangerang Selatan 15419

3.3 Populasi dan Sampel

3.3.1 Populasi

Hewan percobaan yang digunakan adalah mencit strain DDY Deutschland Denken Yoken yang diperoleh dari Departemen Patologi Fakultas Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor IPB. 3.3.2 Sampel 3.3.2.1. Kriteria Inklusi  Mencit jantan strain DDY  Umur 8-12 minggu  Berat badan 25 - 35 gr  Sehat ditandai dengan bergerak lincah

3.3.2.2. Kriteria Eksklusi

 Tampak sakit ditandai dengan gerakan lemas dan malas  Penurunan berat badan 10. 38  Mencit jantan strain DDY yang mati selama masa percobaan

3.3.3 Besar Sampel

Berdasarkan Mead’s Resource Equation Formula yaitu: E : Error Component 10-20 N : Jumlah individu percobaan sampel dalam semua kelompok Dikurang 1 B : Blocking Component Dikurang 1 B=0 T : Jumlah kelompok terapi Dikurang 1 Maka N dapat ditentukan dengan sebagai berikut: E = N – 0 – T 10 = N-1 – T-1 10 = N-1 – 2 10 = N -3 N 13 E = N – 0 – T 1320 = N-1 – T-1 1320 = N-1 – 2 1320 = N-3 N 23 N = 13 – 23 kemudian dibagi menjadi 3 kelompok dengan jumlah yang sama. Didapatkan jumlah sampel tiap kelompok terkecil adalah 5 Pada percobaaan ini terdapat 3 kelompok mencit: 1. Kelompok 1 : Kelompok mencit sehat Normal 2. Kelompok 2 : Kelompok mencit yang diberikan injeksi gentamisin 5 mgkgBB. 3. Kelompok 3: Kelompok mencit yang diberikan ekstrak Nigella sativa 1 gkgBB. E = N – B - T 39 Besar sampel ditentukan sebesar 5 mencit per kelompok. Sehingga dibutuhkan jumlah mencit strain DDY sejumlah 15 ekor.

3.4 Alat dan Bahan Penelitian

3.4.1 Alat Penelitian

A. Alat – alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah  Pembuatan ekstrak: blender, timbangan analitik, timbangan jarum, gelas ukur, botol kaca, wadah plastik, kain, tali, pemanas waterbath, rotari evaporator, pengaduk, freezer, dan alumunium foil.  Masa pemeliharaan hewan : timbangan untuk mengukur berat badan mencit kandang, botol minuman dan tempat makanan, spuit1 cc  Pengambilan vesikula seminalis dan terminasi: alat bedah minor, kaca arloji, papan bedah, jarum pentul.  Pembuatan sediaan histologi:tip dan mikropipet 100 µm dan 1000 µm, haemocytometer, deck glass, mikroskop, dan counter.

3.4.2 Bahan Penelitian

Bahan utama yang digunakan dalam penelitian adalah biji jintan hitam Nigella sativa yang didapatkan dari Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik BALITRO. Bahan-bahan kimia yang digunakan adalah gentamisin injeksi 2 ml 40mgml yang dilarutkan dalam air distilasi aquabides menjadi 1 mgml, Na Cl 0,9, larutan george, dan etanol 70.

3.5 Identifikasi Variabel

3.5.1 Variabel Terikat

Variabel terikat pada penelitian ini adalah jumlah sperma mencit. 3.5.2 Variabel Bebas Variabel bebas pada penelitian ini adalah kelompok perlakuan hewan.