37
BAB 3 METODE PENELITIAN
3.1 Desain Penelitian
Desain yang digunakan dalam penelitian adalah desain eksperimental laboratorium
3.2 Waktu dan Tempat
3.3.1 Waktu Penelitian
Penelitian dilakukan pada Bulan Maret - Agustus 2014 3.3.2
Tempat Penelitian
Penelitian dilakukan di laboratorium Animal House, laboratorium Biologi, dan laboratorium Pharmacy Drug Research PDR, gedung Fakultas Kedokteran dan
Ilmu Kesehatan UIN Syarif Hidayatullah, Jalan Kertamukti
Nomor 05
Pisangan Ciputat, Tangerang Selatan 15419
3.3 Populasi dan Sampel
3.3.1 Populasi
Hewan percobaan yang digunakan adalah mencit strain DDY Deutschland Denken Yoken yang diperoleh dari Departemen Patologi Fakultas
Kedokteran Hewan Institut Pertanian Bogor IPB. 3.3.2
Sampel 3.3.2.1.
Kriteria Inklusi
Mencit jantan strain DDY
Umur 8-12 minggu
Berat badan 25 - 35 gr
Sehat ditandai dengan bergerak lincah
3.3.2.2. Kriteria Eksklusi
Tampak sakit ditandai dengan gerakan lemas dan malas
Penurunan berat badan 10.
38
Mencit jantan strain DDY yang mati selama masa
percobaan
3.3.3 Besar Sampel
Berdasarkan Mead’s Resource Equation Formula yaitu:
E : Error Component 10-20 N : Jumlah individu percobaan sampel dalam semua kelompok
Dikurang 1 B : Blocking Component Dikurang 1 B=0
T : Jumlah kelompok terapi Dikurang 1 Maka N dapat ditentukan dengan sebagai berikut:
E = N – 0 – T
10 = N-1 – T-1 10 = N-1 – 2
10 = N -3 N
13 E = N
– 0 – T 1320 = N-1 – T-1
1320 = N-1 – 2 1320 = N-3
N
23 N = 13
– 23 kemudian dibagi menjadi 3 kelompok dengan jumlah yang sama. Didapatkan jumlah sampel tiap kelompok terkecil adalah 5
Pada percobaaan ini terdapat 3 kelompok mencit: 1.
Kelompok 1 : Kelompok mencit sehat Normal 2.
Kelompok 2 : Kelompok mencit yang diberikan injeksi gentamisin 5 mgkgBB.
3. Kelompok 3: Kelompok mencit yang diberikan ekstrak Nigella
sativa 1 gkgBB. E = N
– B - T
39
Besar sampel ditentukan sebesar 5 mencit per kelompok. Sehingga dibutuhkan jumlah mencit strain DDY sejumlah 15 ekor.
3.4 Alat dan Bahan Penelitian
3.4.1 Alat Penelitian
A. Alat – alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah
Pembuatan ekstrak: blender, timbangan analitik, timbangan jarum, gelas
ukur, botol kaca, wadah plastik, kain, tali, pemanas waterbath, rotari evaporator, pengaduk, freezer, dan alumunium foil.
Masa pemeliharaan hewan : timbangan untuk mengukur berat badan
mencit kandang, botol minuman dan tempat makanan, spuit1 cc
Pengambilan vesikula seminalis dan terminasi: alat bedah minor, kaca arloji, papan bedah, jarum pentul.
Pembuatan sediaan histologi:tip dan mikropipet 100 µm dan 1000 µm,
haemocytometer, deck glass, mikroskop, dan counter.
3.4.2 Bahan Penelitian
Bahan utama yang digunakan dalam penelitian adalah biji jintan hitam Nigella sativa yang didapatkan dari Balai Penelitian Tanaman Obat dan
Aromatik BALITRO. Bahan-bahan kimia yang digunakan adalah gentamisin injeksi 2 ml 40mgml yang dilarutkan dalam air distilasi aquabides menjadi 1
mgml, Na Cl 0,9, larutan george, dan etanol 70.
3.5 Identifikasi Variabel
3.5.1 Variabel Terikat
Variabel terikat pada penelitian ini adalah jumlah sperma mencit. 3.5.2
Variabel Bebas Variabel bebas pada penelitian ini adalah kelompok perlakuan hewan.