commit to user
32
D. Karakterisasi Fitase
1. Pertumbuhan bakteri terhadap aktivitas fitase
Kurva pertumbuhan bakteri terhadap aktivitas fitase diperlukan untuk mengetahui tingkat pertumbuhan optimum dari isolat bakteri agar dapat
menghasilkan fitase dengan aktivitas yang optimal. Dengan kata lain, menentukan lama waktu inkubasi isolat bakteri EN 10, EN 16, dan EN 6 agar dapat
menghasilkan enzim fitase dalam jumlah yang terbesar. Waktu inkubasi ini yang nantinya akan digunakan sebagai patokan untuk menginkubasi isolat bakteri yang
akan dikarakterisasi lebih lanjut, agar isolat bakteri tersebut menghasilkan aktivitas enzim yang optimal. Pengaruh pertumbuhan bakteri terhadap aktivitas
fitase dilakukan dengan cara menguji aktivitas fitase dari ketiga isolat bakteri tiap 2 jam dimulai dari inkubasi bakteri pada jam ke-6. Hasil pengujian menunjukkan
bahwa ketiga isolat bakteri tersebut mencapai titik puncak aktivitas fitase pada waktu inkubasi 20 jam Gambar 17, Lampiran 4.
Gambar 17. Kurva pertumbuhan bakteri terhadap aktivitas fitase dari isolat EN 10, EN 16, dan EN 6.
0.25 0.26
0.27 0.28
0.29 0.3
0.31 0.32
0.33 0.34
0.35
6 8
10 12
14 16
18 20
22 24
A kt
iv it
a s
Fi ta
se U
m l
Waktu inkubasi bakteri jam
EN 10 EN 16
EN 6
commit to user
33
Pertumbuhan bakteri membentuk suatu kurva sigmoid. Pada fase pertama pertumbuhan berjalan lambat, kemudian terjadi pertumbuhan secara eksponensial
hingga pada saat tertentu terjadi pertumbuhan stasioner dan kemudian mengalami penurunan pertumbuhan. Pada penelitian ini, pertumbuhan bakteri mencapai
puncak tertinggi menghasilkan fitase pada waktu inkubasi 20 jam, dan pada jam inkubasi selebihnya akan mengalami penurunan aktivitas fitase. Setelah
mengetahui titik puncak pertumbuhan bakteri dalam menghasilkan fitase yang optimal, selanjutnya pada pengujian karakteristik fitase dari 3 isolat tertinggi
mengambil biakan bakteri yang telah diinkubasi selama 20 jam agar menghasilkan pengujian yang optimal pula.
2. Optimalisasi suhu fitase