26
BAB III METODOLOGI PENELITIAN
A. Jenis dan Rancangan Penelitian
Penelitian ini termasuk jenis penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola satu arah.
B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional
1. Variabel penelitian
a. Variabel bebas.
Konsentrasi ekstrak etanol daun
M. tanarius
konsentrasi 5, 10, 20, 40, dan 80.
b. Variabel tergantung.
Aktivitas antibakteri ekstrak etanol
M. tanarius
yang dilihat dari diameter zona hambat dalam milimeter mm.
c. Variabel pengacau terkendali.
Asal daun
M. tanarius
, waktu inkubasi, suhu inkubasi. d.
Variabel pengacau tak terkendali. Suhu pengeringan simplisia, tetesan embun saat inkubasi.
2. Definisi operasional
a. Ekstrak etanol daun
M. tanarius
. Ekstrak serbuk daun
M. tanarius
yang disari menggunakan etanol 70 dan dihilangkan pelarutnya dengan pemanasan di atas penangas air pada suhu 50-
60˚C hingga kental lalu ditimbang hingga bobot tetap dan
disimpan pada suhu 4˚C. b.
Zona hambat. Daerah jernih di sekitar lubang sumuran yang telah diteteskan ekstrak etanol daun
M. tanarius
yang menandakan tidak terdapat pertumbuhan bakteri dinyatakan dalam milimeter mm.
c. Aktivitas antibakteri. Kemampuan ekstrak etanol daun
M. tanarius
untuk menghambat atau membunuh pertumbuhan bakteri
S. pyogenes
yang dibandingkan dengan kontrol negatif. d.
Kontrol negatif. Pelarut yang digunakan untuk melarutkan ekstrak etanol daun
M. tanarius
ketika diteteskan dalam media yaitu aquadest steril, hasilnya akan digunakan sebagai pembanding.
e. Kontrol positif. Suspensi antibiotik Amoxicilin dengan konsentrasi
25 mgmL yang telah terbukti mampu menghambat maupun
membunuh pertumbuhan bakteri
S. pyogenes
yang hasilnya digunakan sebagai pembanding ekstrak etanol daun
M. tanarius.
C. Bahan Penelitian
Daun
M. tanarius
yang diperoleh dari kebun obat Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang dipanen pada bulan Juli 2013. Media Nutrient
Agar NA Oxoid, Nutrient Broth NB Oxoid,
Blood Agar Plate
BAP
Larutan Mac Farland 0,5, kultur murni
S. pyogenes
ATCC 19615 yang diperoleh dari Balai Kesehatan, Yogyakarta EQAM Belgia. Etanol 70 teknis, aquadest
steril, suspensi antibiotik Amoxicilin Indofarma. Kalium hidroksida LP, natrium hidroksida, asam klorida, natrium klorida 2, gelatin 1, Bourchadat LP, dan
Mayer LP. Silika gel 60F
254
, asam asetat, air, etil asetat, asam formiat, toluene, rutin, asam gallat, besi III klorida, dan sitroborat.
D. Alat Penelitian
Kategori