F. Penentuan KHM dan KBM Ekstrak Etanolik Daun Salam dengan Metode Dilusi Padat
Pengujian ini dilakukan untuk mengetahui konsentrasi minimal ekstrak etanolik daun salam yang dibutuhkan untuk mendapatkan efek daya antibakteri
terhadap Streptococcus mutans. Konsentrasi larutan uji yang digunakan dalam metode dilusi ini mengacu pada hasil uji difusi sumuran. Sebagai perlakuan
digunakan 8 konsentrasi larutan uji, yaitu 15, 18, 20, 22, 24, 26, 28, dan 30 mgmL Lampiran 7. Penentuan kosentrasi larutan uji tersebut didasarkan pada
pengujian sebelumnya yang dilakukan dengan menggunakan konsentrasi 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, dan 9 mgmL dimana pada hasil pengamatan tidak didapatkan media
pertumbuhan yang jernih. Oleh karena itu, konsentrasi larutan uji dinaikkan untuk mendapatkan hasil media yang jernih dengan tidak adanya pertumbuhan bakteri.
Penilaian uji ini berdasarkan tingkat kekeruhan yang dihasilkan dengan adanya penambahan larutan uji. Pada metode dilusi padat ini dilakukan pengujian
sebanyak 1 replikasi yang kemudian direpetisi sebanyak tiga kali.
Tabel V. Hasil pengamatan penentuan nilai KHM dan KBM
Konsentrasi mgmL Kekeruhan
Replikasi I 15
- 18
- 20
- 22
- 24
- 26
- 28
- 30
- Kontrol negatif
+++ Kontrol positif
-
Keterangan : +++ : sangat keruh, ++ : keruh, + : agak keruh, - : jernih
Gambar 9. Hasil dilusi padat pada konsentrasi 15 dan 18 mgmL
Pengamatan kekeruhan hasil dilusi padat dilakukan secara visual yang dibandingkan dengan kontrol negatif dan kontrol positif. Kekeruhan yang
dihasilkan pada media menunjukkan adanya pertumbuhan bakteri. Oleh karena itu, dilakukan penggolongan tingkat kekeruhan bakteri, apakah sangat keruh
+++, keruh ++, agak keruh +, dan jernih - yang berarti tidak terdapat pertumbuhan bakteri uji. Berdasarkan hasil pengamatan, semua petri pada semua
konsentrasi menghasilkan kejernihan yang sama dan tidak terdapat pertumbuhan bakteri Lampiran 12.
G. Uji Penegasan Daya Antibakteri Ekstrak Etanolik Daun Salam dengan Metode Streak Plate
Kategori