Daya anti-inflamasi ekstrak boswella serrata roxb. ex Colebr.--Indian frankincense pada mencit putih betina.

(1)

x INTISARI

Seiring dengan perkembangan teknologi, pengobatan alami juga mengalami kemajuan yang sangat pesat dan mulai menjadi “tren” saat ini, dimana pengobatan herbal juga melengkapi pengobatan kimiawi.

Boswellia serrata merupakan tumbuhan yang didalamnya terkandung senyawa aktif asam β-boswelat yang dapat digunakan untuk mengobati inflamasi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek anflamasi, besarnya daya anti-inflamasi dan potensi daya anti-anti-inflamasi Boswellia serrata dalam mengurangi radang pada mencit putih betina.

Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Pada penelitian ini digunakan hewan uji sebanyak delapan puluh lima ekor mencit galur Swiss, umur 2 – 3 bulan, berat badan 20 – 30 g. Hewan uji dibagi secara acak menjadi 8 kelompok. Kelompok I diberi karagenin 1% sebagai kontrol negatif, kelompok II diberi aquadest sebagai kontrol negatif, kelompok III diberi natrium diklofenak sebagai kontrol positif, kelompok IV diberi CMC-Na 1% sebagai kontrol negatif, dan kelompok V hingga VIII diberi ekstrak Boswellia serrata dengan peringkat dosis 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kgBB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB. Tiga jam setelah injeksi karagenin 1%, mencit dikorbankan, kedua kaki belakang dipotong pada sendi tarsocrural, dan ditimbang. Data bobot udema dianalisis dengan uji Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusinya, dilanjutkan analisis secara statistik menggunakan uji Kruskal Wallis lalu dilanjutkan dengan uji Mann Whitney bertaraf kepercayaan 95%.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak Boswellia serrata terbukti tidak memiliki efek anti-inflamasi namun mampu menurunkan udema pada dosis 24,25 mg/kgBB dan 72,8 mg/kg BB. Prosentase respon daya anti-inflamasi yang dihasilkan secara berurutan pada peringkat dosis 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kgBB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB yaitu 23,04 %; 11,12%; -14,89%; dan -26,29%. Prosentase daya anti-inflamasi yang dihasilkan pada dosis 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kgBB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB yaitu 33,18%; 15,99%; -21,44% dan -37,86%.

Kata kunci : Ekstrak Boswellia serrata, anti-inflamasi

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(2)

xi ABSTRACT

With the developing of the technology, the treatment with herbal drug also has going to better and going to be trend in now, where the treatment with herbal drug has complementary with chemical drug.

Boswellia serrata is one of a plant that containing compound active β -boswellic acid for the treatment of inflammatory disease. The purpose of this research is to prove the truth of anti-inflammation effect, percentage of anti-inflammation ability and to know amount of potency of anti-inflammation ability of Boswellia serrata extract to decrease inflammation on white female mice.

The type of his research was purely experimental with complete random pattern design. Subject whose used in this research is eighty five mice was Switzerland white female mice whose age 2-3 month and have weight between 20-30 gram. The subject were divided into eight groups. Group I was treated by carrageenan 1 % as negative control, group II was treated by aquadest as positive control, group III was treated by diclofenac natrium as positive control, group IV was treated by CMC-Na % as negatif control , and group V, VI, VII, and VIII were treated Boswellia serrata extract which have dosage 24,25 g/kg bw; 72,8 g/kg bw; 214,8 g/kg bw, and 655,2 g/kg bw. Three hours after has injection with carrageenan 1%, were killed and its two back legs were cut at tarsocrural joint. The data about oedema weight that already obtained were analyzed with Kolmogorov-Smirnov to see its distribution, then analyzed with Kruskal Wallis test and continued with Mann Whitney test on 95% significance level.

The result of this research showed that Boswellia serrata extract that Boswellia serrata extract hasn’t anti-inflamation effect but can decrease oedema in dosage 24,25 mg/kgBB and 72,8 mg/kgBB. The percentage of anti-inflammation ability in dosage 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kgBB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB was successively 23,04 %; 11,12%; -14,89%; dan -26,29%. Relative potency of anti-inflammation ability in dosage 24,25 mg/kgBB and 72,8 mg/kgBB was successively 33,18% dan 15,99%.

Keyword : Boswellia serrata extract, anti-inflammatory

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(3)

DAY Roxb. ex

YA ANTI – x Colebr.

--Di Me

UN

– INFLAMA Indian fra

iajukan untu emperoleh G Progr T N

FAK

NIVERSIT

Y

ASI EKST ankincense

SKRIP

uk Memenu Gelar Sarjan ram Studi Il

Oleh TH. Avi Ha NIM : 0481

KULTAS F

TAS SAN

YOGYAK

2008

TRAK BOS ePADA M

PSI

uhi Salah Sa na Farmasi lmu Farmas : ardhiani 114091

FARMAS

NATA DH

KARTA

8

SWELLIA MENCIT PU atu Syarat (S.Farm.) si

SI

HARMA

SERRATA UTIH BETINA

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(4)

DAYA ANTI – INFLAMASI EKSTRAK BOSWELLIA SERRATA Roxb. ex Colebr. -- Indian frankincense PADA MENCIT PUTIH BETINA

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Ilmu Farmasi

Oleh : TH. Avi Hardhiani

NIM : 048114091

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

2008

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(5)

iii

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(6)

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(7)

Kadang……

Di dalam

perjalanan

hidup ini, kita mendapat kesulitan yang membuat

hidup kita terasa berat, dan tidak menentu...Namun, kupercaya

bahwa Yesus Yang Maha Kudus akan menemani

setiap langkah kita

dalam perjalanan hidup ini, untuk

meneguhkan hati

kita

serta

meluaskan wawasan

kita...

” Bapa bisa datang dengan cara apa saja ”

Skripsi ini kupersembahkan untuk

Bapa dan Bunda yang ada di

Surga,

Bapak dan Ibuku,Kakakku,

Seseorang yang selalu ada dihatiku,

serta

Almamaterku

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(8)

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(9)

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(10)

vii PRAKATA

Puji syukur penulis haturkan kepada Allah Bapa di Surga atas segala berkah, karunia, kekuatan dan kasihNya sehingga penulis dapat melakukan penelitian dan mampu menyelesaikan skripsi yang berjudul : ”Daya Anti-inflamasi Ekstrak

Boswellia serrata Roxb. ex Colebr. -- Indian frankincense Pada mencit Putih Betina” yang merupakan realisasi dari kerjasama antara IOT. Sari Sehat -- PT. Capung Indah Abadi dan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma serta sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

Dalam menyusun skripsi ini, penulis banyak memperoleh pengarahan, bimbingan, bantuan dan dukungan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada :

1. Ibu Rita Suhadi, M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

2. Yosef Wijoyo, M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing yang telah memberi banyak pengarahan, bimbingan, dan bantuan selama penelitian dan penyusunan skripsi ini. 3. Ipang Djunarko, S.Si, Apt. atas pengetahuan, bantuan, masukan kepada penulis hingga terselesaikannya skripsi ini serta telah memberikan kesediaannya sebagai dosen penguji.

4. Drs. Mulyono, Apt. yang telah memberikan kesediaannya sebagai dosen penguji.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(11)

viii

5. IOT. Sari Sehat -- PT. Capung Indah Abadi, Ibu Lis Setyowati, atas kerja sama dan bantuannya dalam pengadaan bahan uji yang digunakan dalam penelitian ini. 6. Ign. Y. Kristio Budiasmoro, M.Si., yang telah memberikan pengetahuan bagi

penulis dalam penyelesaian skrispsi ini.

7. Drs. P. Sunu Hardiyanta, S.J., M.Sc. yang telah membantu penulis dalam pengolahan data secara statistik.

8. Mas Heru yang telah membantu dalam pengadaan hewan uji, Mas Parjiman yang senantiasa memberikan waktu dalam menyediakan peralatan, Mas Khayat, Mas Otok, dan Mas Yuwono selaku laboran dan karyawan Fakultas Farmasi USD yang telah membantu penulis selama pelaksanaan penelitian di laboratorium farmakologi.

9. Staff pengajar dan segenap dosen Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

10.Untuk keluargaku : Bapak, Ibu, kakakku, Artha, yang senantiasa memberikan dukungan, semangat, kasih, pengorbanan yang sungguh besar bagi penulis.

11.Mas Beny yang selalu memberikan waktu dan memberikan bantuan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

12.Dhimas Angga W.K. yang senantiasa menemani dalam suka-duka, memberikan semangat kepada penulis untuk terus berjuang dalam menyelesaikan skripsi ini. 13.Tante Santi, Mbak Ella, terima kasih atas nasehat yang selalu diberikan bagi

penulis untuk terus belajar yang rajin.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(12)

14.Ratna Puspita, Keke Sakti Damayanti, Caecilia Ratna, teman-teman seperjuanganku dalam bergelut di laboratorium farmakologi, terima kasih atas kerjasamanya.

15.Teman-teman terdekatku : Lian, Filisia, Feri, Ratna, Erlin, Siska, Widya, Indah, Maduma, Meidina, atas kerjasamanya selama ini serta dukungan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

16.Mas Surya, Mas Galih, dan Mas Angga, terima kasih atas pengetahuan yang diberikan kepada penulis sehingga terselesaikan skripsi ini.

17.Tetangga kamarku : Sinta, Mbak Ica, Mbak Ana, Vita, Mbak Melon, Mbak Desi serta Riska, Treza, Fila, Marlin, Enggar, Mbak Yeyen, terima kasih atas kebersamaan kalian selama ini yang selalu memberikan keceriaan di kost tercinta. 18.Mahasiswa Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma khususnya angkatan

2004 dan semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih sangat jauh dari kata sempurna sehingga penulis menerima saran dan kritik yang bersifat membangun. Penulis berharap semoga skripsi ini dapat berguna dan memberikan pengetahuan bagi semua.

Penulis

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(13)

x INTISARI

Seiring dengan perkembangan teknologi, pengobatan alami juga mengalami kemajuan yang sangat pesat dan mulai menjadi “tren” saat ini, dimana pengobatan herbal juga melengkapi pengobatan kimiawi.

Boswellia serrata merupakan tumbuhan yang didalamnya terkandung senyawa aktif asam β-boswelat yang dapat digunakan untuk mengobati inflamasi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek anflamasi, besarnya daya anti-inflamasi dan potensi daya anti-anti-inflamasi Boswellia serrata dalam mengurangi radang pada mencit putih betina.

Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Pada penelitian ini digunakan hewan uji sebanyak delapan puluh lima ekor mencit galur Swiss, umur 2 – 3 bulan, berat badan 20 – 30 g. Hewan uji dibagi secara acak menjadi 8 kelompok. Kelompok I diberi karagenin 1% sebagai kontrol negatif, kelompok II diberi aquadest sebagai kontrol negatif, kelompok III diberi natrium diklofenak sebagai kontrol positif, kelompok IV diberi CMC-Na 1% sebagai kontrol negatif, dan kelompok V hingga VIII diberi ekstrak Boswellia serrata dengan peringkat dosis 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kgBB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB. Tiga jam setelah injeksi karagenin 1%, mencit dikorbankan, kedua kaki belakang dipotong pada sendi tarsocrural, dan ditimbang. Data bobot udema dianalisis dengan uji Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusinya, dilanjutkan analisis secara statistik menggunakan uji Kruskal Wallis lalu dilanjutkan dengan uji Mann Whitney bertaraf kepercayaan 95%.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak Boswellia serrata terbukti tidak memiliki efek anti-inflamasi namun mampu menurunkan udema pada dosis 24,25 mg/kgBB dan 72,8 mg/kg BB. Prosentase respon daya anti-inflamasi yang dihasilkan secara berurutan pada peringkat dosis 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kgBB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB yaitu 23,04 %; 11,12%; -14,89%; dan -26,29%. Prosentase daya anti-inflamasi yang dihasilkan pada dosis 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kgBB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB yaitu 33,18%; 15,99%; -21,44% dan -37,86%.

Kata kunci : Ekstrak Boswellia serrata, anti-inflamasi

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(14)

xi ABSTRACT

With the developing of the technology, the treatment with herbal drug also has going to better and going to be trend in now, where the treatment with herbal drug has complementary with chemical drug.

Boswellia serrata is one of a plant that containing compound active β -boswellic acid for the treatment of inflammatory disease. The purpose of this research is to prove the truth of anti-inflammation effect, percentage of anti-inflammation ability and to know amount of potency of anti-inflammation ability of Boswellia serrata extract to decrease inflammation on white female mice.

The type of his research was purely experimental with complete random pattern design. Subject whose used in this research is eighty five mice was Switzerland white female mice whose age 2-3 month and have weight between 20-30 gram. The subject were divided into eight groups. Group I was treated by carrageenan 1 % as negative control, group II was treated by aquadest as positive control, group III was treated by diclofenac natrium as positive control, group IV was treated by CMC-Na % as negatif control , and group V, VI, VII, and VIII were treated Boswellia serrata extract which have dosage 24,25 g/kg bw; 72,8 g/kg bw; 214,8 g/kg bw, and 655,2 g/kg bw. Three hours after has injection with carrageenan 1%, were killed and its two back legs were cut at tarsocrural joint. The data about oedema weight that already obtained were analyzed with Kolmogorov-Smirnov to see its distribution, then analyzed with Kruskal Wallis test and continued with Mann Whitney test on 95% significance level.

The result of this research showed that Boswellia serrata extract that Boswellia serrata extract hasn’t anti-inflamation effect but can decrease oedema in dosage 24,25 mg/kgBB and 72,8 mg/kgBB. The percentage of anti-inflammation ability in dosage 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kgBB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB was successively 23,04 %; 11,12%; -14,89%; dan -26,29%. Relative potency of anti-inflammation ability in dosage 24,25 mg/kgBB and 72,8 mg/kgBB was successively 33,18% dan 15,99%.

Keyword : Boswellia serrata extract, anti-inflammatory

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(15)

xii DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ………...…… HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ………. HALAMAN PENGESAHAN ………. HALAMAN PERSEMBAHAN ……….. PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ………...………... PRAKATA ……….. INTISARI ………….………...

ABSTRACT ………...………...

DAFTAR ISI ...……… DAFTAR TABEL ..………. DAFTAR GAMBAR ….………...……….. DAFTAR LAMPIRAN ..………. BAB I. PENGANTAR .……….. A. Latar Belakang ……….………... 1. Permasalahan ……….……….. 2. Keaslian penelitian ……….………. 3. Manfaat penelitian .……….………. B. Tujuan Penelitian ……….………... BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA …….………...

HAL ii iii iv v vi vii x xi xii xvi xviii xx 1 1 3 3 4 5 6

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(16)

xiii

A. Boswellia serrata Roxb. ex Colebr. -- Indian frankincense... 1. Klasifikasi umum………..

2. Nama daerah………

3. Sinonim………

4. Morfologi tanaman……….... 5. Kandungan kimia………..

6. Kegunaan………..

7. Anjuran pemakaian………...

B. Ekstrak……….

C. Inflamasi ……...………..

1. Definisi ….………...

2. Klasifikasi ………... 3. Penyebab….………...

4. Gejala ………..………

5. Mekanisme………...

6. Mediator inflamasi.……….. D. Obat Anti Inflamasi ..………... E. Natrium Diklofenak ………..……….. F. Metode Uji Daya Anti-inflamasi………... In-vivo :...

1. Uji eritema………

6 6 6 6 7 7 9 9 9 10 10 11 11 11 13 17 21 23 24 24 24

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(17)

xiv

2. Uji paw edema ……….

3. Pleurisytest (uji radang selaput dada)………...

4. Tes kantong granuloma……… In-vitro :………

1. Uji kemotaksis leukosit polimorfonuklear... 2. Agregasi leukosit polimorfonuklar yang diinduksi FMLP...

G. Landasan Teori……….

H. Hipotesis………...

BAB III. METODE PENELITIAN ……….………... A. Jenis dan Rancangan Penelitian ……….. B. Variabel dan Definisi Operasional………... C. Bahan Penelitian………... D. Alat Penelitian ...………...………... E. Tata Cara Penelitian ..……….. 1. Perolehan ekstraktanaman Boswellia serrata ...…...………. 2. Penyiapan hewan uji………..…..……… 3. Perhitungan dan penetapan dosis….… ……….. 4. Pembuatan suspensi karagenin 1%………...……... 5. Pembuatan larutan natrium diklofenak... 6. Pembuatan CMC-Na 1%... 7. Penetapan dosis ekstrak Boswellia serrata...

25 26 27 27 27 28 28 29 30 30 30 32 33 34 34 34 34 35 36 38 38

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(18)

8. Uji pendahuluan... 9. Perlakuan hewan uji... 10.Perhitungan prosentase respon daya anti-inflamasi... 11.Perhitungan prosentase daya anti-inflamasi... F. Analisis Hasil... BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN …………...………....

A. Hasil Uji Pendahuluan..………...….. 1. Uji penetapan selang waktu pemotongan kaki... 2. Uji penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak... B. Hasil Uji Daya Anti-inflamasi Ekstrak Boswellia serrata………... BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN …….………

A. Kesimpulan ..………

B. Saran ...……….

DAFTAR PUSTAKA ...……….. LAMPIRAN ………...………. BIOGRAFI PENULIS ..………...

40 41 42 42 43 44 44 44 48 52 67 67 67 69 73 113

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(19)

xvi

DAFTAR TABEL

I. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki..……... II Rangkuman hasil uji Anova satu arah data bobot udema kaki mencit

akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki……….….………... III Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat

injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki……….……..……… IV. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1%

subplantar dengan berbagai variasi selang waktu pemberian natrium diklofenak……….. V. Rangkuman hasil uji Anova satu arah data rata-rata bobot udema kaki mencit akibat sebelum injeksi karagenin 1% subplantar dengan berbagai variasi selang waktu pemberian natrium diklofenak………… VI. Rangkuman hasil uji Scheffe data data rata-rata bobot udema kaki mencit

akibat injeksi karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium diklofenak 4,48 mg/kgBB dengan berbagai variasi selang waktu……… VII. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1%

Hal

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(20)

xvii

subplantar baik pada kelompok kontrol maupun perlakuan ekstrak... VIII. Rata-rata prosentase respon daya anti-inflamasi baik pada kelompok

kontrol maupun perlakuan ekstrak………... IX. Hasil uji Kruskall Wallis rata-rata prosentase respon daya

anti-inflamasi baik pada kelompok kontrol maupun perlakuan ekstrak….. X. Rangkuman uji Mann-Whitney rata-rata prosentase respon daya

anti-inflamasi baik pada kelompok kontrol maupun perlakuan ekstrak……….. XI. Prosentase daya anti-inflamasi kelompok perlakuan ekstrak

Boswellia serrata...

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(21)

xviii DAFTAR GAMBAR Gambar 1 Gambar 2 Gambar 3 Gambar 4 Gambar 5 Gambar 6 Gambar 7 Gambar 8 Gambar 9 Gambar 10 Gambar 11 Gambar 12

Empat asam triterpenoid pentasiklik Boswellia serrata…….. Mekanisme terjadinya peradangan...………... Skema mediator yang berasal dari asam arakhidonat dan kerja obat anti-inflamasi...………... Klasifikasi obat Anti-Inflamasi Steroid (AINS)... Mekanisme kerja obat anti inflamasi ……… Struktur natrium diklofenak...………... Skema kerja uji pendahuluan... Skema kerja perlakuan terhadap hewan uji... Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki... Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% subplantar dengan berbagai variasi selang waktu pemberian natrium diklofenak... Diagram rata-rata bobot udema akibat injeksi karagenin 1% baik pada kelompok kontrol maupun perlakuan... Diagram rata-rata prosentase daya anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan ...

Hal 8 15 20 21 23 24 40 41 46 49 54 56

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(22)

xix Gambar 13

Gambar 14 Gambar 15 Gambar 16

Gambar 17

Tumbuhan Boswellia serrata... Getah resin tanaman Boswellia serrata... Ekstrak kering Boswellia serrata... Ekstrak Boswelliaserrata dalam bentuk suspensi CMC-Na 1%... Neraca Analitik Merk Mettler Toledo AB 204...

73 73 74

74 75

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(23)

xx DAFTAR LAMPIRAN Lampiran 1 Lampiran 2 Lampiran 3 Lampiran 4 Lampiran 5 Lampiran 6 Lampiran 7 Lampiran 8 Lampiran 9 Lampiran 10 Lampiran 11 Lampiran 12

Tumbuhan Boswellia serrata... Getah resin tumbuhan Boswellia serrata... Foto ekstrak kering Boswellia serrata ... Foto Boswellia serrata dalam bentuk suspensi CMC-Na 1%.. Foto alat neraca analitik Merk Mettler Toledo AB 204... Surat pernyataan sah tentang bahan uji yang diperoleh dari IOT. Sari Sehat qq. PT. Capung Indah Abadi... Certificate of Analysis ekstrak Boswellia serrata 65%... Perhitungan konsentrasi ekstrak Boswellia serrata... Langkah kerja uji penetapan selang waktu pemotongan kaki mencit setelah injeksi karagenin 1%... Hasil uji penetapan selang waktu pemotongan kaki mencit setelah injeksi karagenin 1%... Hasil uji distribusi data pada penetapan selang waktu pemotongan kaki mencit setelah injeksi karagenin 1% dengan uji Kolmogorov- Smirnov... Hasil uji Anova satu arah pada penetapan selang waktu pemotongan kaki mencit setelah injeksi karagenin 1%...

Hal 73 73 74 74 75 76 78 79 80 81 82 82

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(24)

xxi Lampiran 13

Lampiran 14

Lampiran 15

Lampiran 16

Lampiran 17 Lampiran 18

Lampiran 19

Lampiran 20

Langkah kerja uji penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB sebelum injeksi karagenin 1%... Hasil uji penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB sebelum injeksi karagenin 1%... Hasil uji distribusi data penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB sebelum injeksi karagenin 1% dengan uji Kolmogorov- Smirnov... Hasil uji Anova satu arah data penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB sebelum injeksi karagenin 1%... Langkah kerja perlakuan terhadap hewan uji... Data selisih bobot udema kaki mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta kontrol …... Hasil uji distribusi data bobot udema kaki mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta kontrol dengan uji Kolmogorov- Smirnov... Hasil uji Anova satu arah data bobot udema kaki mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4

86 89

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(25)

xxii Lampiran 21

Lampiran 22

Lampiran 23

Lampiran 24

Lampiran 25

Lampiran 26

Lampiran 27

peringkat dosis beserta kontrol... Hasil uji Kruskal Wallis data bobot udema kaki mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta kontrol... Hasil uji Mann-Whitney data bobot udema kaki mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta kontrol... Rangkuman hasil uji Mann-Whitney data selisih bobot udema kaki mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 4 kontrol... Data prosentase (%) respon daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 4 kontrol (sebelum terkoreksi)... Hasil analisis data prosentase (%) respon daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 3 kontrol (terkoreksi tanpa karagenin 1%)... Hasil uji distribusi data prosentase (%) respon daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 3 kontrol dengan uji Kolmogorov- Smirnov... Hasil uji Anova satu arah data prosentase respon daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis

100

103

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(26)

xxiii Lampiran 28

Lampiran 29

Lampiran 30

Lampiran 31

Lampiran 32

beserta 3 kontrol dengan uji Kolmogorov- Smirnov... Hasil uji Kruskal Wallis data prosentase respon daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 3 kontrol... Hasil uji Mann-Whitney data prosentase respon daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 3 kontrol... Rangkuman hasil uji Mann-Whitney data prosentase respon daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 3 kontrol... Perhitungan prosentase daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata... Rincian konversi dosis mencit 20 gram ke manusia 70 kg...

103

104

105

109

110 112

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(27)

BAB I PENGANTAR

A. Latar Belakang

Inflamasi merupakan salah satu masalah yang banyak dialami oleh masyarakat. Peradangan merupakan suatu reaksi vaskuler yang menimbulkan adanya pengiriman cairan, zat terlarut, dan sel darah menuju jaringan intertisial pada daerah cedera (Price danWilson, 1984).Reaksi inflamasi diperlukan karena inflamasi ini merupakan respon biologik dari reaksi-reaksi kimia berurutan, berfungsi melindungi tubuh dari infeksi, dan memperbaiki jaringan yang rusak akibat trauma (Wilmana, 1995).

Walaupun teknologi berkembang sangat pesat, pengobatan alami juga mengalami kemajuan yang sangat pesat yang sekarang ini mulai menjadi “tren” , dimana pengobatan herbal juga melengkapi pengobatan kimiawi. Oleh karena itu banyak masyarakat yang semakin tertarik untuk memanfaatkan obat-obat dari bahan alam yang sering dianggap sebagai pengobatan tradisional untuk mengobati inflamasi, sebab selain harganya yang lebih murah juga karenatersedianya bahan alam terutama tumbuh-tumbuhan di alam sekitar kita sehingga dapat menekan biaya pengobatan. Walaupun begitu, penggunaan obat tradisional juga harus memperhatikan klaim khasiatnya dan tidak cukup apabila hanya dengan keterangan empiris saja.

Boswellia serrata merupakan salah satu tumbuhan digunakan pada pengobatan Ayurveda untuk mengobati penyakit inflamasi (Borrelli, Capasso,

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(28)

Cappasso, Ascione, Aviello, Longo, dkk, 2006). Bagian tanaman Boswellia serrata yang digunakan adalah bagian batang dimana dari bagian tanaman tersebut dapat dihasilkan getah resin/ oleoresin yang merupakan bahan ekstrak Boswellia serrata. Getah oleoresin yang merupakan campuran antara resin dan minyak yang bersifat mudah menguap tersebut terdiri dari minyak esensial, getah resin, dan terpenoid. Secara tradisional, minyak esensial yang dihasilkan dapat digunakan pada aromaterapi untuk relaksasi, membantu dalam pernafasan, dan sistem imun ketika batuk, flu, bronchitis, dan laryngitis. Penggunaan lain termasuk untuk anti-inflamasi, antiseptik, dan astringent (Briggs, Cheiman, Clark, dan Linda, 2004).

Berdasarkan uraian tentang khasiat ekstrak Boswellia serrata sebagai anti-inflamasi, maka pada penelitian ini akan digunakan ekstrak Boswellia serrata yang diperoleh dari IOT Sari Sehat – PT. Capung Indah Abadi yang merupakan salah satu industri obat tradisional dan bahan tersebut diimpor dari Phytotech Extract Pvt. Ltd. India. Pada penelitian ini akan dilakukan uji daya anti-inflamasi dengan menggunakan metode Langford, Holmes dan Emele (1972) yang telah dimodifikasi sehingga dapat diketahui pengaruhnya terhadap inflamasi yang terjadi dan juga untuk mengetahui besarnya daya anti-inflamasi yang dimiliki.

Dengan adanya penelitian tentang daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata ini diharapkan dapat membuktikan kebenaran dari khasiat ekstrak Boswellia serrata serta digunakan sebagai bukti praklinik serta acuan untuk pengembangan Boswellia serrata sebagai obat anti-inflamasi.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(29)

1. Permasalahan

Beberapa permasalahan yang muncul antara lain sebagai berikut : a. Apakah ekstrak Boswellia serrata memiliki efek anti-inflamasi ?

b. Seberapa besar prosentase respon daya anti-inflamasi yang dihasilkan oleh ekstrak Boswellia serrata ?

c. Seberapa besar prosentase daya anti-inflamasi yang dihasilkan oleh ekstrak Boswellia serrata?

2. Keaslian penelitian

Penelitian tentang Boswellia serrata yang sudah pernah dilakukan antara lain sebagai berikut :

a. Efek Boswellia serrata pada motilitas usus hewan pengerat dalam menghambat diare tanpa konstipasi (Borrelli dkk, 2006).

Hasil : diketahui bahwa Boswellia serrata dapat menormalkan adanya perubahan motilitas usus yang disebabkan adanya rangsangan inflamasi dan memiliki aktivitas antidiare. Secara in-vitro ditunjukkan bahwa ekstrak Boswellia serrata secara langsung menghambat motilitas usus dengan mekanisme yang meliputi L-type Ca2+ channels.

b. Kemanjuran dan toleransi ekstrak Boswellia serrata pada pengobatan osteoarthritis pada lutut kaki : A randomized double blind placebo controlled trial (Brenda, 2003).

Hasil : diketahui bahwa pengobatan pasien yang menderita osteoarthritis dengan 333 mg ekstrak Boswellia serrata 3 kali sehari selama 8 minggu dapat meningkatkan kemanjuran.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(30)

c. Open, randomized, controlled clinical trial : Ekstrak Boswellia serrata diibandingkan valdecoxib pada osteoarthritis pada lutut kaki (Sontakke, Thawani, Pimpalkhute, Kabra, Babhulkar, dan Hingorani, 2007).

Hasil : diketahui bahwa ekstrak Boswellia serrata memiliki onset dan durasi yang lebih lama setelah perlakuan dihentikan jika dibandingkan dengan valdecoxib. Keamanan, kemanjuran, dan durasi yang ditunjukkan dari ekstrak Boswellia serrata lebih baik jika dibandingkan valdecoxib.

Penelitian tentang Boswellia serrata ini berbeda dengan penelitian yang sejauh ini telah dilakukan karena pada penelitian ini digunakan metode radang telapak kaki oleh Langford dkk (1972) yang telah dimodifikasi.

3. Manfaat penelitian

a. Manfaat teoritis

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan pengetahuan tentang khasiat tanaman obat terutama ekstrak Boswellia serrata yang memiliki khasiat sebagai anti-inflamasi sehingga dapat bermanfaat bagi ilmu kefarmasian. b. Manfaat praktis

Dari hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi yang berguna untuk masyarakat tentang khasiat dari ekstrak Boswellia serrata yang memiliki khasiat sebagai anti-inflamasi.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(31)

B. Tujuan Penelitian 1. Tujuan umum

Penelitian ini bertujuan untuk memberikan informasi yang pasti bahwa ekstrak Boswellia serrata memiliki khasiat sebagai anti-inflamasi.

2. Tujuan khusus

Penelitian ini memiliki beberapa tujuan khusus antara lain untuk mengetahui efek anti-inflamasi dari ekstrak Boswellia serrata, besarnya prosentase respon daya inflamasi, dan besarnya prosentase daya anti-inflamasi dari ekstrak Boswellia serrata.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(32)

BAB II

PENELAAHAN PUSTAKA

A. Boswellia serrata 1. Klasifikasi umum

Kingdom : Plantae

Subkingdom : Tracheobionta

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida Subkelas : Rosidae

Ordo : Sapindales

Famili : Burseraceae

Genus : Boswellia Roxb. ex Colebr. -- boswellia

Species : Boswellia serrata Roxb. ex Colebr. -- Indian frankincense(Anonim, 2007a).

2. Nama daerah

Luban (Bengali); salai, Indian frankincense tree, Indian olibanum tree (Inggris); salai, saler, salga, salhe, sali (Hindi); kunduru, sallaki (Sanskrit) gugulu, kundrikam, kungli, morada, parangisambrani (Tamil) (Anonim, 2007b).

3. Sinonim

Boswellia glabra Roxb. dan Boswellia thurifera Roxb.( Anonim, 2007b).

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(33)

4. Morfologi tanaman

Boswellia serrata Roxb (Fam. Burseracease), merupakan tanaman berukuran sedang sampai besar yang merupakan tanaman asli dari India Afrika Utara dan Timur Tengah (Borrelli dkk, 2006). Boswellia serrata memiliki daun mengkilat dan mahkota daun yang tersebar. Kulit kayu tebal, berwarna hijau keabu-abuan, abu-abu kemerahan dan mengandung klorofil pada bagian luarnya yang tebal. Daunnya serta bunga yang berwarna putih tersebar banyak pada pangkal cabang (Anonim, 2007b).

4. Kandungan kimia

Pada batang tanaman Boswellia serrata yang kulit kayunya telah dihilangkan untuk proses penyadapan akan dihasilkan getah oleoresin yang terdiri dari minyak, terpenoid dan getah resin. Hampir 16% dari resin tersebut terdiri dari minyak esensial, dimana sebagian besar adalah α-thujene dan p-cymene. Resin bukan merupakan produk kompleks kimia alami, keras, transparan, ketika dipanaskan membentuk kompleks antara asam resin, resin alkohol, resinotanol, ester, dan resen (Robbers, Speedle, and Tyler, 1996). Asam β-boswelat merupakan salah satu dari empat asam triterpen pentasiklik yang berada dalam minyak esensial. Asam Boswellic ini akan menghambat jalur 5-lipoksigenase yang akan mengubah asam arakhidonat menjadi leukotrien (Anonim, 2007c). Getah resin pada Boswellia serrata terdiri dari :

a. Monoterpen (α-thujene)

b. Diterpen (makrosiklik diterpenoid seperti icensole, incensole oksida

isoicensole oksida, diterpen alkohol (serratol)

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(34)

c. Triterpen (seperti α- β –amyrin)

d. Asam triterpenoid pentasiklik (asam boswelat)

e. Asam triterpenoid tetrasiklik (tirucall-8, 24-diena, asam-21-oat) (Anonim, 2007d).

Empat asam triterpen pentasiklik yang terkandung dalam ekstrak etanol getah resin dari batang tanaman Boswellia serrata terdiri dari konstituen utama beserta derivatnya adalah sebagai berikut :

1. asam β- boswelat (I)

2. asam 3-O-asetil – β- boswelat (II) 3. asam 11-keto-β-boswelat (III)

4. asam 3-O-asetil-11-keto-β- boswelat (IV).

Gambar 1.Empat asam triterpenoid pentasiklik Boswellia serrata(Sharma, Mann,Gajbhiye, Kharya, 2007)

COOH AcO

CO O H

( I ) ( II )

COOH O

AcO

COOH O

(III) (IV)

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(35)

5. Kegunaan

Getah resin yang merupakan bagian dari tanaman Boswellia serrata

dapat digunakan sebagai pengobatan tradisional di India dan Cina untuk mengatasi berbagai penyakit seperti inflamasi, nyeri tulang dan luka (Huang, Ma, Badmaev, Shao, dan Chin Chee-Kok, 2000).

Secara tradisional, Boswellia juga digunakan untuk sakit perut dan kembung. Minyak yang dihasilkan dapat digunakan pada aromaterapi untuk relaksasi dan untuk mengurangi pernafasan yang lambat. Minyak esensialnya dipercaya untuk membantu dalam pernafasan dan sistem imun ketika batuk, flu, bronchitis, dan laryngitis. Penggunaan lain termasuk untuk anti-inflamasi, antiseptik, dan astringent (Briggs dkk, 2004).

6. Anjuran pemakaian

Range dosis untuk ekstrak Boswellia serrata ini 200-400mg 3 kali sehari, sedangkan dosis yang umumnya digunakan sekitar 400 mg 3 kali sehari (Anonim, 2007e). Untuk anti-inflamasi atau bronkokontriksi, digunakan ekstrak

Boswellia serrata dosis 400 mg tiga kali sehari (Anonim, 2007c). Ekstrak

Boswellia serrata juga tersedia dalam bentuk minyak esensial dan sediaan tablet 250 mg (Briggs dkk, 2004).

B. Ekstrak

Ekstrak adalah sediaan kering, kental atau cair dibuat dengan menyari simplisia nabati atau hewani menurut cara yang cocok, di luar pengaruh cahaya matahari langsung (Anonim, 1979). Ekstrak juga dapat didefinisikan sebagai

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(36)

sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia nabati atau hewani menggunakan pelarut sesuai, kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Anonim, 2000). Ekstrak kering harus mudah digerus menjadi serbuk. Cairan penyari yang biasanya digunakan antara lain air, eter, atau campuran etanol dan air (Anonim, 1979).

Penyarian simplisia dengan air dapat dilakukan dengan maserasi, perkolasi, atau penyeduhan dengan air mendidih. Penyarian campuran etanol dan air dilakukan dengan cara maserasi atau perkolasi. Penyarian dengan eter dilakukan dengan perkolasi. Hasil akhir ekstrak cair dengan penyari etanol harus dibiarkan di tempat sejuk selama 1 bulan, kemudian disaring, sambil mencegah penguapan (Anonim, 1979 ).

C. Inflamasi 1. Definisi

Radang ialah reaksi jaringan hidup terhadap semua bentuk jejas, dimana dalam reaksi ini berperan juga pembuluh, syaraf, cairan, serta sel-sel tubuh di tempat jejas (Sander, 2003). Reaksi inflamasi merupakan respon nonspesifik terhadap beberapa zat asing yang menyebabkan terjadinya kerusakan sel (Crowley, 2001). Selain itu, peradangan juga merupakan suatu reaksi vaskuler yang menghasilkan adanya pengiriman cairan, zat terlarut, dan sel-sel darah yang bersirkulasi ke dalam jaringan interstisial pada daerah cedera atau nekrosis (Price dan Wilson, 1984).

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(37)

2. Klasifikasi

Ditinjau dari waktu terjadinya, radang terbagi menjadi dua, yaitu yang pertama, radang akut yang disebabkan oleh rangsangan yang berlangsung sesaat atau mendadak (akut); yang kedua, radang kronis yang disebabkan oleh jejas atau injury yang berlangsung beberapa minggu, bulan, atau bersifat menetap dan merupakan kelanjutan dari radang akut. Radang kronis ini sering disebut juga radang proliferatif karena selalu diikuti terjadinya proliferasi fibroblast (Sander, 2003).

3. Penyebab

Terhadap pengaruh-pengaruh yang merusak (noksi) dari berbagai jenis, jaringan ikat pembuluh bereaksi dengan cara yang sama pada tempat kerusakan yang menyebabkan terjadinya suatu radang. Noksi dapat berupa noksi kimia, noksi fisika, infeksi dengan mikroorganisme atau parasit (Mutschler, 1986). Noksi fisika dapat berupa panas atau dingin sedangkan noksi kimia dapat berupa konsentrasi asam atau basa (Crowley, 2001).

4. Gejala

Gejala reaksi meradang yang dapat diamati antara lain : pemerahan (rubor), pembengkakan (tumor), panas meningkat (kalor), nyeri (dolor), dan gangguan fungsi (functiolaesa) (Mutschler, 1986).

a. Rubor merupakan warna kemerahan yang berhubungan erat terhadap meningkatnya aliran darah yang disebabkan karena vasodilatasi (Karch, 2003). Kemerahan biasanya merupakan hal pertama yang dialami setelah terjadi peradangan. Ketika muncul peradangan, arteriola yang mensuplai daerah

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(38)

tersebut melebar sehingga darah yang masuk ke dalam mikrosirkulasi lokal menjadi lebih banyak. Kapiler yang sebelumnya kosong dengan cepat terisi oleh darah, yang sering disebut hyperemia atau kongesti. Karena pembuluh terisi banyak darah maka dapat mengakibatkan timbulnya kenaikan tekanan intravaskuler (Price dan Wilson, 1984).

b. Tumor adalah benjolan akibat penimbunan cairan abnormal pada jaringan interstitial atau rongga tubuh, yang dinamakan dengan oedema (Sander, 2003). Pembengkakan lokal (tumor) merupakan gejala tanda yang paling menyolok dari peradangan akut, dimana pembengkakan itu disebabkan karena pengiriman cairan dan sel-sel dari sirkulasi darah ke jaringan interstisial. Cairan dan sel yang saling bercampur dan tertimbun di daerah peradangan sering disebut dengan eksudat. Untuk keadaan dini reaksi peradangan eksudat tersebut berupa cair. Kemudian leukosit meninggalkan aliran darah dan selanjutnya tertimbun sebagai bagian dari eksudat (Price dan Wilson, 1984). c. Kalor merupakan rasa panas pada daerah radang akibat terjadi vasodilatasi

(Sander, 2003). Panas hanya merupakan suatu reaksi peradangan pada permukaan badan, yang dalam keadaan normal lebih dingin dari 370C, yaitu suhu di dalam tubuh. Saat terjadi peradangan, kulit menjadi lebih panas karena banyak darah yang disalurkan dari dalam tubuh ke permukaan daerah yang terkena daripada yang disalurkan ke daerah yang normal (Price dan Wilson, 1984).

d. Dolor adalah rasa nyeri pada daerah radang akibat iritasi syaraf tepi oleh mediator kimia dan penekanan ”nerve ending” oleh cairan extravaskuler

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(39)

(Sander, 2003). Perubahan pH lokal atau konsentrasi lokal ion-ion tertentu dapat merangsang ujung-ujung syaraf. Selain itu, juga dapat disebabkan adanya pengeluaran zat kimia tertentu seperti histamin atau zat kimia bioaktif lainnya (Price dan Wilson, 1984) dan juga dapat timbul akibat adanya aktivasi syaraf nyeri yang disebabkan oleh sistem kinin (Karch, 2003).

e. Functiolesia yaitu berkurangnya fungsi dari organ yang mengalami keradangan, akibat terbentuknya metabolit-metabolit yang merugikan oleh sel-sel yang mengalami trauma dan peningkatan temperatur di daerah keradangan untuk reaksi biokimia sehingga fungsi organ menurun (Sander, 2003).

5. Mekanisme

Respon inflamasi merupakan reaksi lokal dari tubuh karena adanya luka. Kerusakan pada sel menyebabkan aktivasi zat kimia pada plasma yang disebut faktor VII atau Hageman factor. Hageman factor bertanggungjawab untuk mengaktifkan 3 sistem dalam tubuh, salah satunya adalah sistem kinin.

Hageman factor akan mengaktifkan kallikrein merupakan substansi yang ditemukan pada jaringan lokal, yang dapat menyebabkan berubahnya kininogen menjadi bradikinin dan kinin lain (Karch, 2003). Bradikinin berkaitan erat dengan peptida kalidin yang merupakan peptida vasoaktif yang dibentuk dari aktivitas enzim pada substrat protein yang disebut kininogen. Pembentukan bradikinin dari kininogen oleh kallikrein terjadi pada plasma (Rang dkk, 2003). Bradikinin menyebabkan terjadinya vasodilatasi lokal yang akan membawa darah menuju daerah luka dan diikuti keluarnya sel darah putih menuju jaringan (Karch, 2003).

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(40)

Bradikinin juga dapat menyebabkan lepasnya asam arakidonat dari membran sel. Asam arakidonat diketahui dapat menyebabkan terlepasnya substansi lain yang disebut autocoid yangterdiri dari prostaglandin (memperbesar reaksi inflamasi), leukotrien (menyebabkan vasodilatasi dan meningkatkan permeabilitas kapiler), dan tromboksan (menyebabkan vasokontriksi lokal dan agregasi platelet) (Karch, 2003).

Ketika Hageman factor memulai aktivitasnya, pada jalur lain menghasilkan respon pada daerah lokal. Kerusakan terhadap membran sel menyebabkan pelepasan histamin secara lokal. Histamin menyebabkan vasodilatasi, yang membawa darah dan komponen darah yang sangat banyak menuju daerah luka, mengubah permeabilitas kapiler, sehingga neutrofil dan darah sangat mudah untuk meninggalkan sirkulasi darah dan menuju daerah luka, dan merangsang adanya nyeri. Karena banyaknya cairan menuju jaringan menyebabkan perubahan pada permebilitas pembuluh kapiler sehingga terjadi tumor (bengkak). Kalor (panas) terjadi karena meningkatnya aliran darah ke daerah luka. Begitu juga juga gejala rubor (kemerahan) berhubungan erat dengan adanya peningkatan aliran darah yang disebabkan adanya vasodilatasi. Dolor (nyeri) muncul karena adanya aktivasi saraf nyeri oleh histamin dan sistem kinin (Karch, 2003).

Beberapa leukotrien yang diaktifkan oleh asam arakidonat memiliki sifat yaitu kemotaksis. Kemotaksis merupakan kemampuan menarik neutrofil dan merangsangnya dan beberapa makrofag lain pada daerah itu sehingga menjadi sangat aktif. Ketika neutrofil aktif, dan beberapa zat kimia lain terlepas menuju

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(41)

daerah luka, neutrofil dapat merusak sel-sel tersebut. Rusaknya sel akan menyebabkan terlepasnya enzim liposom dari sel. Enzim itu akan melisiskan atau merusak membran sel dan protein seluler (Karch, 2003). Mekanisme peradangan dapat dilihat pada Gambar 2.

Plasma tertarik Histamin lepas pada daerah luka

Hageman factor aktif

Prekallikrein Kalikrein aktif

Kininogen Bradikinin

Asam Arakidonat Permeabilitas Vasodilatasi lepas Kapiler ↑

Leukotrien (LTs) Prostaglandin(PGs) Eksudasi protein

( LTB4, LTC4, (PGI2) plasma Aliran

LTD4,LTE4 ) Darah↑

Kemotaksis leukosit, Edema

neutrofil aktif

Fagositosis

Penghilangan sisa luka pada daerah luka untuk proses penyembuhan

Gambar 2. Mekanisme terjadinya peradangan (Karch, 2003)

Bengkak

Merah

Panas Nyeri

Jaringan Rusak

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(42)

Manifestasi dari suatu peradangan akut menurut Sander (2003) ada tiga macam antara lain yaitu perubahan hemodinamik, perubahan permeabilitas, dan

white cell event.

a. Perubahan dinamik dapat disebabkan karena adanya tekanan hidrostatik dalam pembuluh darah akibat meningkatnya aliran darah pada daerah yang mengalami kerusakan sehingga cairan keluar menuju daerah yang bertekanan rendah yaitu intertisial.

b. Perubahan permeabilitas pembuluh darah yang meningkat dapat menyebabkan terjadi kebocoran pembuluh darah dan akhirnya plasma protein dengan berat molekul yang besar dapat menerobos dinding pembuluh darah ke jaringan interstisial.

c. White cells event merupakan sel-sel leukosit yang dalam keadaan normal berjalan di tengah-tengah dari pembuluh darah, maka pembuluh darah sekitar daerah peradangan akan melebar dan sel-sel radang PMN akan menepi yang sering disebut marginasi. Kemudian terjadi emigasi, yaitu sel-sel radang keluar dari pembuluh darah karena permeabilitas kapiler meningkat. Sel-sel PMN yang berada di luar pembuluh darah akan menuju ke pusat radang karena pengaruh adanya mediator kimia dan sering disebut dengan kemotaksis. Lalu terjadi agregasi, dimana sel-sel PMN akan menggerombol pada pusat radang atau mengelilingi pusat radang untuk melokalisir daerah radang, dan akhirnya terjadi fagositosis, yaitu.sel PMN akan memakan kuman atau sel-sel mati dan dicerna oleh enzim katalitik dari lisosom.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(43)

6. Mediator inflamasi

Mekanisme terjadinya radang sangat dipengaruhi oleh senyawa dan mediator yang dihasilkan oleh asam arakidonat. Bila membran sel mengalami kerusakan oleh suatu rangsangan kimiawi, fisik, atau mekanis, maka enzim fosfolipase diaktifkan untuk mengubah fosfolipid yang ada menjadi asam arakidonat (Tjay dan Raharja, 2002). Asam arakidonat sendiri diproduksi oleh eikosanoid yang merupakan derivat kelompok asam lemak endogen yang sangat penting. muncul karena adanya beberapa rangsang seperti kerusakan fisik dan reaksi imun. Rangsangan tersebut akan mengaktifkan enzim fosfolipase pada sel membran atau sitoplasma dan asam arakidonat terlepas dari membran fosfolipid. Fosfolipida selain diubah menjadi arakhidonat oleh enzim fosfolipase juga diubah menjadi lyso-glyseril-fosforilkolin yang kemudian diubah lagi menjadi Platelet Activating Factor (PAF). Platelet Activating Factor dapat menimbulkan peradangan dan tidak hanya pada menyebabkan vasodilatasi lokal saja namun juga dapat meningkatkan permeabilitas pembuluh (Rang, Dale, Ritter, and Moore, 2003).

Arakidonat dimetabolisme dengan beberapa mekanisme di antaranya dua mekanisme yang paling penting, yaitu :

a. Metabolisme untuk membentuk produk dengan ikatan lurus dengan lipoksigenase, yang kemudian menghasilkan leukotrien.

b. Mekanisme siklis dengan siklooksigenase, yang menghasilkan prostasiklin, prostaglandin, dan tromboksan. Siklooksigenase ada 2 bentuk yaitu siklooksigenase 1 (COX-1), ditemukan pada beberapa jaringan, dan

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(44)

siklooksigenase 2 (COX-2), terutama ditemukan pada sel inflamasi (Katzung, Enthony, dan Susan, 2002).

Asam arakhidonat dikatalis oleh enzim siklooksigenase menjadi asam endoperoksida dan seterusnya menjadi prostaglandin (PG) yang dibentuk oleh semua jaringan, prostasiklin (PGI2) yang dibentuk di dinding pembuluh dan berdaya vasodilasi, dan tromboksan (TXA2, TXB2) yang khusus dibentuk dalam trombosit dan berdaya vasokonstriksi serta menstimulasi agregasi pelat darah (trombotis) (Tjay dan Rahardja, 2002).

Dibawah ini merupakan beberapa mediator yang penting dalam proses inflamasi, yaitu sebagai berikut :

a. Leukotrien (LTB4), LTC4, LTD4, dan LTE4), merupakan senyawa sulfidopeptida yang dibentuk sebagai hasil metabolisme asam arkidonat dan merupakan mediator radang dan nyeri. Melalui rute lipoksigenase terbentuk LTA4 yang tidak stabil lalu diubah menjadi LTB4 atau LTC4, dan kemudian diubah lagi menjadi LTE4. Leukotrien C4 (LTC4), LTD4, dan LTE4 terutama dibentuk di granulosit eosinofil dan memiliki efek vasokontriksi di bronkus dan permeabilitas pembuluh dengan menimbulkan udema. Leukotrien B4 khusus disintesa di makrofag dan neutrofil alveolar dan bekerja kemotaksis yaitu menstimulasi migrasi leukosit. Tertarik oleh leukotrien, leukosit dalam jumlah besar menginvasi daerah peradangan dan mengaktifkan banyak gejala radang (Tjay dan Rahardja, 2002).

b. Tromboksan, merupakan mediator inflamasi lain yang dibentuk melalui jalur siklooksigenase adalah tromboksan. Tromboxan (TXA2 dan TXB2) khusus

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(45)

dibentuk dalam trombosit dan memiliki daya vasokontriksi (di jantung) dan menstimulasi agregase platelet darah (trombosis) (Tjay dan Rahardja, 2002). Tromboksan biasanya dibentuk pada platelet, sedangkan prostasiklin pada sel endoteliel (Katzung dkk, 2002).

c. Prostaglandin, merupakan mediator yang merupakan hasil dari metabolisme asam arakidonat melalui jalur siklooksigenase yang mempunyai berbagai efek di pembuluh darah, ujung syaraf, dan pada sel-sel yang terlibat dalam inflamasi (Katzung, 2001). Prostaglandin yang paling penting adalah PgE2 dan PgF2 memiliki daya vasodilatasi dan meningkatkan permeabilitas dinding pembuluh dan cairan sinovial sehingga terjadi radang dan rasa nyeri (Tjay dan Rahardja, 2002).

d. Histamin, merupakan basa amin yang dibentuk dari histidin dengan dekarboksilase histidin. Histamin dalam bentuk terikat secara biologis tidak aktif, tetapi banyaknya stimulus dapat memicu keluarnya histamin sel mast, menyebabkan amin bebas untuk menjalankan aksinya pada derah di sekitarnya (Katzung, 2001). Histamin merupakan mediator yang menyebabkan vasodilatasi, mengubah permeabilitas kapiler, sehingga neutrofil dan darah meninggalkan sirkulasi darah, menuju daerah luka, dan merangsang nyeri. Karena banyaknya cairan menuju jaringan maka dapat menyebabkan terjadinya perubahan pada permebilitas pembuluh kapiler (Karch, 2003).

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(46)

Stimuli

Fosfolipase A2 aktif Fosfolipid

di membran sel Asam arakidonat Liso-gliseril- fosforilkolin Lipoksigenase (LOX) Siklooksigenase (COX)

PAF Hidroperoksida Endoperoksida (vasodilator,meningkatkan

permeabilitas vascular, bronkononstriktor,

kemotaksin) 12-LOX 5-LOX 15-LOX

12 HPETE 5 HPETE 15 HPETE 12 HETE

5 HETE LTA4 15 HETE Tromboksan Prostaglandin Prostasiklin (TXA) ( PGE,PGF) ( PGI)

LTB4 Lipoksin (kemotaksin) Adan B

Gambar 3. Skema mediator yang berasal dari asam arakhidonat dan kerja obat anti-inflamasi (Rang dkk, 2003; Katzung dkk, 2002)

Keterangan:

OAINS = Obat Anti-Inflamasi Non Steroid PAF = Platelet Activating Factor

LT = leukotrien

= diubah

= kerja obat anti-inflamasi (menghambat) LTC4 LTD4 LTE4 (bronkokonstrik tor; meningkatkan permeabilitas vaskular 5-Lipoksig enase inhibitor, co: zileutin Reseptor antagonis leukotrien , co: zafirlukas, montelukas TXA2 (trombotik; vasokonstriktor) PGI2 (vasodilator; hiperalgesik; menghentikan agregasi platelet) PGD2α (bronkokon striktor; kontraksi miometrial) PGD2 (menghamb at agregasi platelet; vasodilator) PGE2 (vasodilator ; hiperalgesi k) Antagonis PG OAINS Antagonis TXA2 Antagonis PAF Glukokorti koid

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(47)

D. Obat – Obat Anti- inflamasi

Penggunaan obat anti-inflamasi digunakan untuk mengurangi terjadinya radang. Pengobatan pada pasien yang mengalami inflamasi biasanya ditujukan untuk meringankan rasa nyeri yang merupakan gejala awal dan merupakan keluhan utama pada pasien, dan membatasi proses perusakan jaringan (Katzung, 2001).

Golongan kortikosteroid mempunyai efek samping yang lebih berbahaya pada dosis tinggi dan penggunaan lama (Tjay dan Rahardja, 2002) sehingga obat-obat Anti-Inflamasi Non Steroid (AINS) memegang peran utama dalam pengobatan radang (Katzung, 2001). Klasifikasi AINS berdasarkan kimiawinya dapat dilihat pada gambar 4.

ASAM KARBOKSILAT ASAM ENOLAT

Asam Derivat Asam Derivat Asam Derivat Asam Derivat Derivat Asetat Salisilat Propionat Fenamat Pirazolon Oksikam

Aspirin As. Tiaprofenat As. mefenamat Azapropazon Piroksikam Benorilat Fenbufen Meklofenamat Fenilbutazon Tenoksikam

Diflunisal Fenoprofen Oksifenbutazon Salsalat Flurbiprofen

Ibuprofen Ketoprofen Naproksen

Derivat Asam Fenilasetat Derivat Asam asetat Inden/indol:

Diklofenak Indometasin Fenklofenak Sulindac Tolmetin

Gambar 4. Klasifikasi obat Anti-Inflamasi Non Steroid (AINS) (Wilmana, 1995) OBAT AINS

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(48)

Mekanisme utama dari AINS adalah menghambat metabolisme asam arakidonat oleh siklooksigenase. Obat AINS hendaknya hanya menghambat COX-2 (peradangan) dan tidak COX-1 (perlindungan mukosa lambung) (Tjay dan Rahardja, 2002). Pada inflamasi, prostaglandin berperan dalam menyebabkan vasodilatasi dan meningkatkan permeabilitas vaskuler. Akan tetapi, inhibisi sintesis prostaglandin oleh AINS mengurangi inflamasi daripada menghilangkannya karena obat ini tidak menghambat mediator inflamasi lainnya . Meskipun demikian, pada sebagian besar pasien dengan antritis reumatoid, efek anti-inflamasi OAINS yang relatif ringan dapat mengurangi nyeri, kekakuan dan pembengkakkan (Neal, 2005). Berbagai AINS mungkin memiliki mekanisme kerja tambahan termasuk kemotaksis, regulasi darah produksi interleukin-1, penurunan produksi radikal bebas dan superoksida, dan campur tangan dengan kejadian-kejadian intraseluler yang diperantarai kalsium. Selain efek terapi, AINS juga dapat menimbulkan efek samping karena didasarkan oleh hambatan pasa sistem biosintesis prostaglandin. Efek samping yang paling sering terjadi adalah induksi tukak lambung yang kadang disertai dengan anemia sekunder akibat perdarahan saluran cerna. Beratnya efek berbeda pada masing-masing obat (Wilmana, 1995). Mekanisme kerja obat anti-inflamasi dapat dilihat pada gambar 5.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(49)

Enzim lipooksigenase Enzim siklooksigenase

Gambar 5. Mekanisme kerja obat anti inflamasi (Wilmana, 1995; Katzung dkk, 2002).

Keterangan :

: menghambat

E. Natrium Diklofenak

Diklofenak merupakan turunan sederhana dari asam fenilasetat yang mirip baik dengan flurbiprofen dan meklofenamat. Diklofenak berpotensi sebagai penghambat siklooksigenase. Obat ini dianjurkan untuk inflamasi kronis seperti arthritis reumatik, osteoarthritis, dan untuk pengobatan pada nyeri akut musculoskeletal (Katzung, 1995).

Trauma/luka pada sel

Gangguan pada membrane sel

Asam Arakidonat

Hidroperoksid

Fosfolipid

Enzim fosfolipase A2 Kortikosteroid

Enderoperoksid

PGG2/PGH

AINS

Leukotrien

m _PGE2,

PGF2, PGD2

Tromboks an A2

Prostasiklin Reseptor

zileuton

zafirlukast

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(50)

Absorbsi obat ini melalui saluran cerna berlangsung cepat dan lengkap. Obat ini terikat 99% pada protein plasma dan mengalami efek lintas pertama sebesar 40-50%. Walaupun waktu paruhnya singkat yaitu 1-3 jam, diklofenak diakumulasi di cairan sinovia yang menjelaskan efek terapi di sendi jauh lebih panjang dari waktu paruh obet tersebut (Wilmana, 1995).

Efek samping terjadi pada pada pasien kira-kira 20% dan meliputi bahaya pada lambung, pendarahan lambung, dan ulserasi lambung (Katzung, 1995), sehingga pemakaian obat ini harus hati-hati pada penderita tukak lambung (Wilmana, 1995). Selain itu, efek samping lain antara lain mual, gastritis, eritema kulit, dan sakit kepala (Wilmana, 1995). Struktur Natrium diklofenak dapat dilihat pada gambar 6.

Gambar 6. Struktur natrium diklofenak (Hanson, 2000).

F. Metode Uji Daya Anti-inflamasi

Ada beberapa uji in-vivo yang dilakukan untuk menguji daya anti-inflamasi, antara lain sebagai berikut :

1) Uji erythema

Hewan uji yang digunakan yaitu marmot galur Pirrbright baik jantan atau betina yang memiliki berat kira-kira 350 gram. Kemudian diberikan

Cl Cl NaOCCH2

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(51)

perlakuan barium sulfida dalam bentuk suspensi. Pada hari berikutnya, senyawa uji yang dilarutkan dalam pembawa yang sesuai dan setengah dosis dari senyawa tersebut diberikan dengan gavage pada 10 ml/kg 30 menit sebelum penyinaran UV. Kotrol diberikan perlakuan pembawa saja. Empat hewan digunakan untuk setiap kelompok perlakuan dan kontrol. Mermot tersebut diletakkan pada manset kulit dengan lubang ukuran 1,5x2,5 cm dan dilakukan penyinaran UV. Setelah 2 jam, setengah dosis senyawa uji yang masih tersisa diberikan kembali pada hewan uji dan diamati 2 dan 4 jam setelahnya (Vogel, 2002)

Uji erythema dengan UV ini dilakukan pada kulit marmot albino dengan bobot rata-rata marmot albino sebesar 350 gram. Penilaian erythema dapat dilakukan sebagai berikut : jika tidak ada inflamasi= 0, erythema ringan= 1, erythema berat= 2, dan erythema sangat berat/kuat= 4. Hewan uji dengan nilai 0 atau 1 dianggap terlindungi, sedangkan nilai setelah 2 dan 4 harus diberi indikasi durasi efeknya (Vogel, 2002). Keuntungan metode ini adalah sederhana namun membutuhkan latihan bagi pengguna dalam pemakaian fotometer refleksi yang bertujuan untuk menghilangkan penilaian subjektif yang tidak perlu (Vogel, 2002). 2) Uji paw edema

Diantara beberapa metode yang digunakan untuk skrining obat anti-inflamasi, terdapat satu dari teknik yang biasa digunakan pada kemampuan beberapa bahan uji untuk menghambat produksi udema kaki hewan uji setelah injeksi bahan pembuat radang. Beberapa zat pembuat radang (iritan) yang telah digunakan seperti brewer’s yeast, formaldehid, dextran, albumin telur, kaolin, aerosol, karagenin, atau naphthoylheparamin. Biasanya ukuran udema kaki hewan

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(52)

uji hasil injeksi diukur sebelum dan setelah perlakuan iritan dan ukuran udema kaki tersebut dibandingkan dengan kontrol. Pada metode ini digunakan hewan uji tikus Sprague-Dawley dengan berat 100-150 gram. Unutk memastikan hidrasi, tikus diberikan 5 ml air ke dalam saluran pencernaan (kontrol) atau bahan uji yang dilarutkan pada volume yang sama. Setelah 30 menit, tikus diberikan secara injeksi subkutan 0,05 ml karagenin 1% pada bagian kaki kiri. Volume udema diukur menggunakan secara plethymographycally setelah injeksi, 3 dan 6 jam dan 24 jam (Vogel, 2002).

3) Pleurisy test (uji radang selaput dada)

Radang selaput dada dikenal sebagai fenomena inflamasi eksudatif pada manusia. Pada penelitian radang selaput dada dapat diinduksi dengan beberapa iritan seperti histamine, bradikinin, prostaglandin, degranulator sel mast, dextran, enzyme, antigen, mikroba, dan iritan nonspesifik seperti turpentine dan karagenin. Radang pada tikus yang diinduksi oleh karagenin akan dipertimbangkan sebagi model inflamasi akut yang baik, dimana keluarnya cairan, migrasi leukosit, dan beberapa parameter biokimia yang berkaitan pada respon inflamasi dapat diukur secara mudah dari eksudatnya (Vogel, 2002). Model radang selaput dada dapat diterima sebagai metode yang dapat dipercaya untuk mengetahui inflamasi akut dan subakut yang diikuti determinasi beberapa parameter secara bersama-sama (Vogel, 2002).

Tikus jantan bergalur Sprague-Dawley dengan berat 220-260 gram dapat digunakan dalam metode ini. Sebanyak 0,1 ml karagenin 2% diinjeksikan ke dalam rongga selaput dada. Kemudian 1 jam sebelum injeksi karagenin, 24 jam,

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(53)

dan 48 jam sesudahnya, kelompok yang terdiri dari 10 tikus diberi perlakuan dengan senyawa standar atau senyawa uji melalui oral atau subkutan. Kelompok kontrol hanya diberikan pelarut senyawa uji (Vogel, 2002).

4) Tes kantung granuloma

Merupakan suatu metode yang menggunakan minyak kroton sebagai iritan. Metode ini sering digunakan untuk memperkirakan potensi dari anti inflamasi kortikosteroid baik setelah pemberian local maupun sistemik. Dengan penyuntikkan dan induksi pada kantung granuloma setelah beberapa interval waktu sampai 4 minggu durasi efek dapat diketahui (Vogel, 2002).

Pada metode ini digunakan tikus jantan atau betina Sprague-Dawley dengan berat antara 150-200 gram. Hewan uji 10 ekor digunakan unutk kelompok perlakuan dan kontrol. Pada bagian punggunag dicukur dan disinfeksi, kemudian dengan jarum pneumoderma diinjeksikan 20 ml udara dibawah pengaruh anestesi. Kemudian diinjeksikan 0,5 ml larutan minyak kroton. Empat puluh delapan jam kemudian, kantung udara terbentuk Saat pembentukan kantung udara, hewan uji setiap hari diberikan perlakuan senyawa uji atau standar secara oral atau subkutan. Setelah 4 atau 5 hari, hewan uji diberi obat bius, kantung udara dibuka, dan eksudat diletakkan dalam gelas silinder lalu diukur (Vogel, 2002)

Selain beberapa uji in-vivo di atas, uji daya anti-inflamasi juga dapat dilakukan dengan beberapa uji in-vitro antara lain sebagai berikut :

1. Uji kemotaksis leukosit polimorfonuklear

Akumulasi leukosit merupakan faktor penting pada mekanisme pertahanan tubuh. Faktor kemotaksis menarik leukosit pada darah terinfeksi atau

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(54)

bagian yang terinflamasi. Metode Boyden (1962) digunakan untuk mengukur efek kemotaksis pada leukosit polimorfonuklear.

Kecepatan migrasi dihitung sebagai persentase dari jumlah PMNs pada kompartemen rendah atau jumlah penggunaan PMNs pada kompartemen tinggi. Kecepatan migrasi tergantung pada konsentrasi chemoattractant seperti zymosan activated serum. Selain itu, dosisnya tergantung penurunan kecepatan migrasi yang dicapai oleh inhibitor kemotaksis (Vogel, 2002).

2. Agregasi leukosit polimorfonuklear yang diinduksi FMLP

Agregasi PMNs dapat diinduksi dengan FMLP ( formil-L-methionil-L-leucyl-L-fenilalanin). Agregasi dapat dihambat dengan turunan xantin. Suspensi sel PMNs disiapkan dari eksudat peritonial yang diambil 17 jam setelah injeksi intraperitonial 10 ml 6% sodium caseinate terhadap tikus Sprague Dawley. Senyawa uji dan standart (pentoxiphylline) dilarutkan dalam GBSS ( Geys-balanced-salt-solution). FMLP dilarutkan dalam DMSO. Dilusi selanjutnya dibuat sampai mencapai konsentrasi 10-7 mol FMLP dalam GBSS. Sebelum ditambahkan FMLP, suspensi sel diinkubasi awal selama 10 menit dengan obat. Agregasi PMNs masuk ke dalam a Born aggregometer (Vogel, 2002).

G. Landasan Teori

Inflamasi merupakan respon jaringan lokal terhadap adanya kerusakan. Peradangan merupakan suatu reaksi vaskular yang hasilnya merupakan pengiriman cairan, zat-zat terlarut dan sel-sel darah yang bersirkulasi ke dalam jaringan–jaringan intertisial pada daerah cedera atau nekrosis.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(55)

Boswellia serrata merupakan tanaman dimana pada bagian batang tanaman ini dapat dihasilkan getah resin/ oleoresin yang merupakan bahan ekstrak

Boswellia serrata. Dalam tanaman Boswellia serrata terdapat empat asam triterpen pentasiklik dengan asam β- boswelat yang menjadi konstituen utama

Boswellia ini. Asam boswelat akan menghambat jalur 5-lipoksigenase yang mengubah asam arakhidonat menjadi leukotrien.

Berdasarkan penelitian Sontakke dkk, 2007 diketahui bahwa keamanan, kemanjuran, dan durasi dari ekstrak Boswellia serrata lebih baik jika dibandingkan valdecoxib, dan namun onset pada ekstrak Boswellia serrata lebih lama jika dibandingkan dengan valdecoxib yang merupakan salah satu obat anti-inflamasi non-steroid. Selain itu, ekstrak Boswellia serrata juga dapat meningkatkan kemanjuran pada pengobatan pasien yang menderita osteoarthritis dengan mengkonsumsi 333 mg ekstrak Boswellia serrata 3 kali sehari selama 8 minggu (Milot, 2003).

Oleh karena itu, pada penelitian ini akan dilakukan penelitian secara in-vivo terhadap ekstrak Boswellia serrata dengan menggunakan metode Langford dkk (1972) untuk mengetahui apakah ekstrak Boswellia serrata benar-benar dapat digunakan sebagai anti-inflamasi.

H. Hipotesis

Ekstrak Boswellia serrata Roxb. ex Colebr. -- Indian frankincense memiliki efek anti-inflamasi terhadap mencit putih betina.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(56)

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian

Penelitian tentang daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata pada mencit betina putih merupakan jenis penelitian eksperimental murni dengan menggunakan rancangan acak lengkap pola searah. Maksud dari eksperimental adalah penelitian yang dilakukan dengan mengadakan perlakuan terhadap objek penelitian serta adanya kontrol. Lengkap berarti setiap hewan uji dalam satu kelompok perlakuan menerima jenis perlakuan yang sama. Pola satu arah menunjukkan hanya ada satu variabel bebas yaitu dosis sediaan ekstrak Boswellia serrata.

B. Variabel dan Definisi Operasional 1. Variabel penelitian

a. Variabel bebas

Dosis ekstrak Boswellia serrata tiap kg berat badan mencit betina. b. Variabel tergantung

Bobot udema kaki mencit yang mengalami radang buatan dengan karagenin 1% yang akan menentukan besarnya prosentase daya anti–inflamasi dari ekstrak Boswellia serrata.

c. Variabel pengacau terkendali

1) Umur mencit : 2 – 3 bulan

2) Jenis kelamin mencit : betina

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(57)

3) Berat badan mencit : 20 – 30 gram

4) Galur mencit : Swiss

5) Keadaan mencit : sehat secara fisik

d. Variabel pengacau tak terkendali

1) Keadaan patologis hewan uji, seperti kemungkinan hewan uji sakit.

2. Definisi operasional

a. Ekstrak Boswellia serrata

Ekstrak Boswellia serrata adalah ekstrak yang mengandung asam boswelat tidak kurang dari 65% yaitu sebesar 66,3%, yang diperoleh dengan mengekstraksi getah minyak resin dari tanaman Boswellia serrata dengan pelarut alkohol.

b. Dosis sediaan ekstrak Boswellia serrata

Dosis diperoleh dengan menimbang sekian miligram serbuk Boswellia serrata per kilogram berat badan dilarutkan dengan CMC-Na 1% kemudian diberikan secara peroral tiap kilogram berat badan mencit.

c. Uji daya anti-inflamasi

Uji ini dilakukan dengan menggunakan mencit galur Swiss sebagai hewan uji yang diradangkan telapak kaki kirinya, dan diukur bobot kakinya dengan cara memotong kedua kaki belakang mencit pada bagian torsocrural, kemudian ditimbang dan dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif karagenin 1% sub plantar.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(58)

d. Efek anti-inflamasi

Efek yang ditunjukkan dengan adanya penurunan udema pada bobot rata-rata udema kaki mencit yang dihasilkan dari sekian miligram serbuk Boswellia serrata per kilogram berat badan yang dilarutkan dengan CMC-Na 1% dan hasilnya signifikan terhadap kontrol negatif.

e. Prosentase respon daya anti-inflamasi

Prosentase daya anti-inflamasi dihitung dari selisih rata-rata perubahan bobot kaki kontrol negatif karagenin 1% dengan perubahan bobot kaki yang diinjeksi dengan ekstrak Boswellia serrata dan dibagi dengan rata-rata perubahan bobot kaki kontrol negatif karagenin 1% kemudian dikalikan seratus persen.

C. Bahan Penelitian

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain sebagai berikut :

1. Hewan uji yang digunakan yaitu mencit betina galur Swiss, dengan usia 2 – 3 bulan, dengan berat badan 20–30 g yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi & Toksikologi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

2. Bahan uji yang digunakan adalah sediaan ekstrak Boswellia serrata dari IOT. Sari Sehat - PT. Capung Indah Abadi yang diimpor dari Phytotech Extract Pvt. Ltd. India dan mengandung 66,3 % asam boswelat..

3. Karagenin sebagai zat peradang (inflamatogen) yang diproduksi oleh PT. Bratacco.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(59)

4. Tablet generik natrium diklofenak 25 mg sebagai kontrol positif yang diproduksi oleh PT. Phapros dan diperoleh dari Apotek Master, Sleman.

5. NaCl fisiologis 0,9 % (Otsuka)sebagai pensuspensi karagenin yang diperoleh dari Apotek Kimia Farma, Sleman.

6. Carboxymethylcellulose-natrium (Bratacco) sebagai pensuspensi ekstrak Boswellia serrata yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi & Toksikologi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

7. Alkohol yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi & Toksikologi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

8. Aquadest yang diperoleh dari Alfa Kimia sebagai pelarut natrium dikofenak.

D. Alat Penelitian

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut : 1. Alat – alat gelas seperti beker glass, labu takar, gelas ukur, pipet tetes,

pengaduk bermerk Pyrex Iwaki Glass, Japan.

2. Spuit injeksi oral (0,1 – 1,0 ml) yang ujungnya diberi bulatan kecil dengan lubang ditengahnya agar tidak melukai hewan uji.

3. Spuit injeksi subplantar (0,1 – 1,0 ml). 4. Gunting bedah.

5. Alat pemanas aquadest dan stirer.

6. Neraca analitik merk Mettler Toledo AB 204.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(60)

E. Tata Cara Penelitian 1. Perolehan ekstrak tanaman Boswellia serrata

Ekstrak Boswellia serrata yang digunakan dalam penelitian ini diperoleh dan disediakan oleh IOT. Sari Sehat- PT. Capung Indah Abadi yang diimpor dari Phytotech Extract Pvt. Ltd. India (terlampir certificate of analysis Boswellia serrata pada lampiran 6).

2. Penyiapan hewan uji

Hewan uji yang dibutuhkan adalah delapan puluh lima ekor mencit betina galur Swiss, umur 2 – 3 bulan, berat badan 20 – 30 g. Hewan uji dibagi secara acak menjadi 2 kelompok, yaitu :

a. Kelompok untuk orientasi sebanyak 45 ekor, dan

b. Kelompok perlakuan sebanyak 40 ekor. Kelompok perlakuan terdiri dari 8 kelompok yang masing – masing terdiri dari 5 ekor, untuk perlakuan kontrol negatif karagenin 1%, kontrol pelarut ekstrak Boswellia serrata, kontrol negatif aquadest, kontrol positif natrium diklofenak, dan kelompok perlakuan sediaan ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis.

Sebelum diberi perlakuan, hewan uji dipuasakan delapan belas sampai dua puluh empat jam dan pemberian minum untuk hewan uji tidak dihentikan.

3. Perhitungan dan penetapan dosis

a. Karagenin 1%

Menurut Williamson (1996), konsentrasi karagenin yang digunakan pada mencit adalah 1% dengan volume 0,05 ml. Volume 0,05 ml karagenin

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(61)

1% adalah volume pemberian untuk mencit dengan berat 20 g sehingga dosis bisa dicari dengan rumus:

V ml =

ml mg C kg BB x BB kg mg D / /

0,05 ml =

ml mg kg x BB kg mg D / 10 02 , 0 /

D = 25 mg/kg BB dan V = {2,5 x BB kg} ml. b. Natrium diklofenak

Dosis yang digunakan pada penelitian ini berdasarkan dosis efektif yang diperoleh dari penelitian Noni, Djunarko, dan Donatus (2003) dan penelitian Rosiana (2007) yaitu sebesar 4,48 mg/kgBB.

c. CMC- Na 1%

Sebagai kontrol negatif CMC 1% diberikan secara per oral, dan volume pemberian maksimal pada mencit adalah 1ml, diketahui berat mencit maksimal dalam penelitian ini adalah 30 gram sehingga bisa dihitung dengan rumus:

V ml =

ml mg C kg BB x BB kg mg D / /

1 ml =

ml mg kg x BB kg mg D / 10 03 , 0 /

D = 333,3 mg/kg BB dan V = {33,3 x BB kg} ml.

4. Pembuatan suspensi karagenin 1%

Timbang 100 mg karagenin, larutkan dengan larutan NaCl fisiologis 0,9% dalam labu takar 10 ml sehingga diperoleh konsentrasi suspensi karagenin

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(62)

1% sebagai zat inflamatogen pada kaki mencit. Apabila akan digunakan kembali sebaiknya diletakkan dalam almari es.

5. Pembuatan larutan natrium diklofenak

Natrium diklofenak yang digunakan pada penelitian ini adalah natrium diklofenak 25 mg berbentuk tablet salut sehingga perlu dilakukan terlebih dahulu uji keseragaman bobot. Dosis efektif natrium diklofenak yang digunakan sebesar 4,48 mg/kg BB berdasarkan penelitian Noni dkk (2003) dan Rosiana (2007), sehingga konsentrasi natrium diklofenak yang diharapkan adalah sebagai berikut :

C =

Vml kg BB x BB kg mg D / = ml mg kg x BB kg mg / 5 , 0 03 , 0 / 48 , 4

= 0,269 mg/ml

= 2,7 mg/10 ml = 0,0027 g/ml.

Syarat uji keseragaman bobot menurut Farmakope Indonesia edisi III yaitu : Timbang 20 tablet, hitung bobot rata-rata tiap tablet. Jika ditimbang satu per satu, tidak boleh lebih dari 2 tablet yang masing-masing bobotnya menyimpang dari bobot rata-ratanya lebih besar dari harga yang ditetapkan pada kolom A, dan tidak satu tabletpun yang bobotnya menyimpang dari bobot rata-ratanya lebih dari harga yang ditetapkan kolom B. Jika tidak mencukupi 20 tablet, dapat digunakan 10 tablet; tidak satu tabletpun yang bobotnya menyimpang lebih besar dari bobot rata-rata yang ditetapkan kolom A dan tidak satu tabletpun yang bobotnya menyimpang lebih besar dari bobot rata-rata yang ditetapkan kolom B.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(1)

108

NPar Tests Mann-Whitney Test

Ranks

5 6.60 33.00

5 4.40 22.00

10 Perlakuan

CMC-Na 1%

Ekstrak Boswellia serrata dosis 218,4 mg/kgBB Total

Persendaya

N Mean Rank Sum of Ranks

Test Statisticsb

7.000 22.000 -1.149 .251 .310a Mann-Whitney U

Wilcoxon W Z

Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)]

Persendaya

Not corrected for ties. a.

Grouping Variable: Perlakuan b.

NPar Tests Mann-Whitney Test

Ranks

5 7.40 37.00 5 3.60 18.00 10

Perlakuan CMC-Na 1%

Ekstrak Boswellia serrata dosis 655,2 mg/kgBB Total

Persendaya

N Mean Rank Sum of Ranks

Test Statisticsb

3.000 18.000 -1.984 .047 .056a Mann-Whitney U

Wilcoxon W Z

Asymp. Sig. (2-tailed) Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)]

Persendaya

Not corrected for ties. a.

Grouping Variable: Perlakuan b.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(2)

Kelom- Mean(g) + SE Besar signifikansi (hasil uji statistik)

pok (n = 5) I II III IV V VI VII

I 0,00 + 15,83 - 0,917 (tb) 0,009(bb) 0,465 (tb) 0,251 (tb) 0,465 (tb) 0,251 (tb)

II 0,00 + 7,81 0,917 (tb) - 0,009(bb) 0,047(bb) 0,602 (tb) 0,251(tb) 0,047(bb)

III 69,44 + 5,80 0,009(bb) 0,009 (bb) - 0,009 (bb) 0,009(bb) 0,009(bb) 0,009 (bb)

IV 23,04 + 6,14 0,465 (tb) 0,047(bb) 0,009(bb) - 0,602 (tb) 0,016(bb) 0,016 (bb)

V 11,12 + 15,31 0,251 (tb) 0,602 (tb) 0,009(bb) 0,602 (tb) - 0,251 (tb) 0,117 (tb) VI -14,89 + 6,95 0,465 (tb) 0,251 (tb) 0,009(bb) 0,016 (bb) 0,251 (tb) - 0,251 (tb)

VII -26,29 + 9,37 0,251 (tb) 0,047(bb) 0,009(bb) 0,016 (bb) 0,117 (tb) 0,251 (tb) -

Keterangan :

I : Kelompok perlakuan kontrol negatif aquadest sebagai pelarut natrium diklofenak

II : Kelompok perlakuan kontrol negatif CMC-Na 1% sebagai pelarut ekstrak Boswellia serrata

III : Kelompok perlakuan kontrol positif natrium diklofenak IV : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kg BB V : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 72,8 mg/kg BB VI : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 218,4 mg/kg BB VII : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 655,2 mg/kg BB bb : berbeda bermakna (p<0,05)

(3)

110

Lampiran 31. Perhitungan prosentase daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata

Peringkat dosis 24,25 mg/kgBB 1. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 62 , 27

x 100% = 39,76%.

2. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 32 , 30

x 100% = 43,66%.

3. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 75 , 25

x 100% = 37,08%.

4. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 61 , 32

x 100% = 46,96%.

5. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 08 , 1 −

x 100% = -1,56%.

Rata-rata prosentase daya anti-inflamasi : 5

% 9 , 165

= 33,18 %. Peringkat dosis 72,8 mg/kgBB

1. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 77 , 36

x 100% = 52,95%.

2. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 54 , 28 −

x 100% = -41,10%.

3. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 11 , 35

x 100% = 50,56%.

4. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 17 , 24 −

x 100% = -34,81%.

5. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 36 , 36

x 100% = 52,36%.

Rata-rata prosentase daya anti-inflamasi : 5

% 96 , 79

= 15,99 %

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(4)

Peringkat dosis 218,4 mg/kgBB

1. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 58 , 24 −

x 100% = -35,40%

2. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 14 , 13 −

x 100% = -18,92%

3. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 11 , 33 −

x 100% = - 47,68%

4. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 69 , 11 −

x 100% = -16,83%

5. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 07 , 8

x 100% = 11,62% Rata-rata prosentase daya anti-inflamasi :

5 % 21 , 107

= -21,44 % Peringkat dosis 655,2 mg/kgBB

1. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 06 , 16 −

x 100% = -23,13%

2. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 99 , 0

x 100% = 1,43%

3. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 83 , 25 −

x 100% = -37,20%

4. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 61 , 35 −

x 100% = - 51,28%

5. Prosentase daya =

% 44 , 69 % 95 , 54 −

x 100% = -79,13% Rata-rata prosentase daya anti-inflamasi :

5 % 31 , 189 −

(5)

112

Lampiran 32. Rincian konversi dosis mencit 20 gram ke manusia 70 kg

Faktor konversi dosis mencit 20 gram ke manusia 70 kg sebesar 387,9

Contoh perhitungan :

Peringkat dosis 24,25 mg/kg BB

24,25mg/kgBB = 0,485 mg/20 g BB

0,485 mg/20 g BB x 387,9 = 188,70 mg/kgBB.

Peringkat dosis 72,8 mg/kg BB

72,8 mg/kgBB = 1,456 mg/20 g BB

1,456 mg/20 g BB x 387,9 = 564,78 mg/kgBB.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

(6)

113

BIOGRAFI PENULIS

Penulis bernama TH. Avi Hardhiani, lahir di Sleman pada tanggal 16 Desember 1985 yang merupakan putri kedua dari dua bersaudara dari pasangan St. Ngadi Hartono dan Agnes Sri Wardani. Penulis pernah menempuh pendidikan di TK Kanisius Klepu pada tahun 1990 dan pada tahun 1991 melanjutkan pendidikan sekolah dasar di SD Kanisius Klepu, yang keduanya berlokasi di Minggir, Sleman. Kemudian menempuh pendidikan SLTP pada tahun 1997 di SLTP Pangudi Luhur Moyudan yang berlokasi di Moyudan, Sleman dan melanjutkan pendidikan sekolah menengah umum di SMU Stella Duce 1 Yogyakarta pada tahun 2001. Setelah selesai menempuh pendidikan SMU pada tahun 2004, penulis melanjutkan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Selama kuliah di Universitas Sanata Dharma, penulis pernah mengikuti beberapa kegiatan, antara lain : mengikuti kegiatan PSF (Paduan Suara Farmasi) dalam acara pengambilan Sumpah Apoteker angkatan 13, mengikuti kegiatan penyuluhan JMKI (Jaringan Mahasiswa Kesehatan Indonesia) sebagai seksi konsumsi, mengikuti kegiatan PEC (Pharmacy Event Cup) sebagai sekretaris II pada tahun 2006. Di luar kampus, penulis mengikuti kegiatan Mudika Bhakti Dharma, Lingkungan Aloysius, Paroki Sedayu sampai sekarang.