14
3.3 PROSEDUR PENELITIAN
3.3.1 Prosedur Pembuatan Starter
1. Semua peralatan disterilisasi di dalam autoclave selama 15 menit pada
suhu 121
o
C. 2.
Kadar gula nira aren Arenga pinnata Merr segar diukur dengan refraktometer.
3. Nira aren dipasteurisasi pada suhu 80
o
C kemudian didinginkan hingga suhu ruangan.
4. Dicampurkan satu oase S.cerevisiae dengan 500 ml nira aren kemudian
diaduk di rotary shaker hingga merata. 5.
Starter didiamkan selama 48 jam pada suhu ruangan. 6.
Dilakukan perhitungan jumlah sel hingga diperoleh konsentrasi larutan starter diatas 1.10
6
selml dengan hemositometer.
3.3.2 Prosedur Fermentasi
1. Semua peralatan disterilisasi di dalam autoclave selama 15 menit pada
suhu 121
o
C. 2.
Kadar gula nira aren Arenga pinnata Merr segar diukur dengan refraktometer.
3. Nira aren dipasteurisasi pada suhu 80
o
C kemudian didinginkan hingga suhu ruangan.
4. Dicampurkan nira aren dengan larutan starter sebanyak 15 vv dari
total volume campuran 500 ml. 5.
Ditambahkan NPK 0,4 mm ke dalam larutan. 6.
Campuran dijaga pada suhu 35
o
C selama 24 jam dalam kondisi anaerobik. 7.
Dimasukkan hasil fermentasi ke dalam peralatan distilasi, kondisi operasi diatur pada suhu 85
o
C. 8.
Distilat di tampung dengan erlenmeyer dan diukur volumenya. 9.
Diambil sampel distilat untuk dianalisis. 10.
Prosedur di atas diulangi dengan volume starter 25 ,35, 45,55 serta variasi suhu 32
o
C dan 39
o
C.
Universitas Sumatera Utara
15
3.3.3 Prosedur Analisis
3.3.3.1 Analisis Kadar Gula Nira Segar Dengan Refraktometer
1. Dibersihkan permukaan prisma refraktometer lalu keringkan.
2. Dialirkan satu tetes aquades ke prisma refraktometer untuk menentukan
titik nol. 3.
Dibersihkan dan dikeringkan prisma refraktometer. 4.
Diteteskan nira segar ke permukaan prisma dengan menggunakan batang plastik, buat larutan gula menyebar ke permukaan prisma dan jangan
sampai terbentuk gelembung kemudian prisma ditutup. 5.
Baca hasil pengukuran kadar gula pada refraktometer [55].
3.3.3.2 Analisis Densitas 1.
Alat piknometer yang digunakan untuk mengukur densitas bioetanol dikeringkan ke dalam oven pada temperatur 100
o
C selama 10 menit kemudian didinginkan sampai suhu kamar.
2. Ditimbang piknometer kosong dengan menggunakan neraca analitis
kemudian dicatat massanya. 3.
Diisi piknometer dengan aquades kemudian ditimbang dengan neraca analitis dan dicatat massanya. Dicatat suhu aquades pada saat pengukuran.
4. Piknometer dikeringkan di dalam oven pada temperatur 100
o
C selama 10 menit lalu didinginkan sampai suhu kamar.
5. Dimasukkan sampel distilat ke dalam.
6. Ditimbang piknometer yang berisi sampel distilat dengan menggunakan
neraca analitis dan dicatat massanya. 7.
Dihitung densitas distilat dengan rumus : ρ
1
m
1
= ρ
2
m
2
Dimana: ρ
1
= densitas air m
1
= massa piknometer berisi air – piknometer kosong
ρ
2
= densitas distilat m
2
= massa piknometer berisi distilat – piknometer kosong [4]
Universitas Sumatera Utara
16 3.3.3.3 Analisis Spesific Gravity dan API Gravity
Specific gravity dan API gravity adalah suatu pernyataan yang
menyatakan densitas kerapatan atau berat per satuan volume dari suatu bahan. Hubungan antara specific gravity sg dan API gravity G adalah sebagai berikut:
, sg
, Besarnya harga dari API gravity berkisar dari 0-100, sedangkan specific
gravity merupakan harga relatif dari densitas suatu bahan terhadap air. Hubungan
antara densitas dan specific gravity adalah sebagai berikut: S
densi as kg densi as air kg
3.3.3.4 Analisis Nilai Kalor Nilai densitas, spesific gravity dan API gravity kemudian digunakan untuk
menghitung nilai kalor dengan persamaan: ,
,
3.3.3.5 Analisis Kadar Bioetanol dengan Metode Densitas Analisa kadar bioetanol dilakukan dengan metode densitas dengan cara
berikut: 1.
Nilai densitas yang diperoleh sebelumnya dicocokkan pada tabel 3.1 berikut.
2. Kadar etanol dihitung dengan menginterpolasi data densitas berat jenis
dan kadar etanol pada suhu 30
o
C pada tabel 3.1. Tabel 3.1 Konversi Berat Jenis - Kadar Etanol [56]
Kadar Larutan Etanol
Berat Jenis Larutan Etanol
gmL Kadar Larutan
Etanol Berat Jenis
Larutan Etanol gmL
1 2
3 4
5 0,99568
0,99379 0,99194
0,99014 0,98839
0,98670 25
26 27
28 29
30 0,95607
0,95442 0,95272
0,95098 0,94922
0,94741 [4]
[4]
Universitas Sumatera Utara
17 6
7 8
9
10 11
12 13
14 15
16 17
18 19
20 21
22 23
24 0,98507
0,98347 0,98189
0,98031 0,97875
0,97723 0,97573
0,97424 0,97278
0,97133 0,96990
0,96844 0,96697
0,96547 0,96395
0,96242 0,96087
0,95929 0,95769
31 32
33 34
35 36
37 38
39 40
41 42
43 44
45 46
47 48
49 0,94557
0,94370 0,94180
0,93986 0,93790
0,93591 0,93390
0,93186 0,92979
0,92770 0,92558
0,92344 0,92128
0,91910 0,91692
0,91472 0,91250
0,91028 0,90805
3.3.3.6 Analisis Bioetanol Dengan Reaksi Oksidasi Kalium Dikromat K
2
Cr
2
O
7
Analisis kualitatif bioetanol dilakukan dengan metode reaksi oksidasi dengan langkah sebagai berikut:
1. Persiapan bahan dan alat yang ingin digunakan pada saat analisis.
2. Dimasukkan ke dalam tabung reaksi 2 ml K
2
Cr
2
O
7
2 dan tambahkan 5 tetes H
2
SO
4
pekat. 3.
Tabung reaksi digoyangkan hingga larutan homogen. 4.
Ditambahkan 1 ml sampel bioetanol ke dalam tabung reaksi yang telah homogen.
5. Diamati perubahan yang terjadi.
6. Reaksi positif ditandai dengan terjadinya perubahan warna dari jingga ke
hijau kebiruan [57].
Universitas Sumatera Utara
18
3.4 FLOWCHART PENELITIAN
Kategori