membuat varietas baru; Silangan protoplasfusi protoplas yaitu menyilangkan dua macam protoplas menjadi satu, kemudian dibudidayakan sampai menjadi tanaman
kecil yang mempunyai sifat baru Hendaryono dan Wijayani, 1994. Budidaya meristem atau embrio bertujuan untuk menumbuhkan kalus dari
eksplan yang ditanam. Eksplan merupakan potongan jaringan atau organ yang dikulturkan Hendaryono dan Wijayani, 1994; Katuuk, 1989 .
Beberapa keunggulan pembiakan vegetatif melalui kultur jaringan adalah dapat memperbanyak dengan cepat kultivar hibrida baru yang berasal dari satu sel
untuk kegunaan komersil, dapat menciptakan tanaman baru bebas dari penyakit yang disebabkan oleh virus, dapat memperbanyak tanaman yang sukar
diperbanyak dengan memakai biji, dapat memperoleh tanaman induk yang sama sifat genetiknya dalam jumlah yang banyak, dan dapat menghasilkan tanaman
baru sepanjang tahun Katuuk, 1989.
2. Kalus
Kalus sebenarnya adalah proliferasi massa jaringan yang belum terdiferensiasi. Massa sel ini terbentuk pada seluruh permukaan irisan eksplan,
sehingga semakin luas permukaan irisan eksplan semakin cepat dan semakin banyak kalus yang terbentuk. Dengan pengambilan metabolit sekunder dari kalus,
biasanya malah dapat diperoleh kandungan lain yang lebih banyak jenisnya, karena seringkali timbul zat-zat terpenoid atau persenyawaan-persenyawaan
lainnya yang sangat berguna khususnya dalam bidang pengobatan Hendaryono dan Wijayani, 1994. Teknik kultur jaringan dicirikan oleh kondisi kultur aseptik,
penggunaan media kultur buatan dengan kandungan nutrisi lengkap dan ZPT Zat PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Pengatur Tumbuh, serta kondisi ruang kultur yang suhu dan pencahayaannya terkontrol Yustina, 2003.
Kumpulan sel pada kalus ini belum diketahui jelas apa fungsinya. Kalus yang terbentuk ini diharapkan terjadi morfogenesis dengan cara pengkulturan
yang berulang-ulang dari media lama ke media yang baru. Teknik pemindahan eksplan ini disebut subkultur Hendaryono dan Wijayani, 1994; Katuuk, 1989.
Benzilaminopurin kelompok sitokinin dan Naftalen Asam Asetat kelompok auksin sintesis merupakan dua kelompok ZPT yang sering
ditambahkan dalam media kultur. Penggunaan bersama kedua jenis ZPT ini dapat memberikan pengaruh interaksi terhadap diferensiasi jaringan. Kombinasi ZPT
antara sitokinin group dengan auksin group dengan metode Mohr merupakan kunci keberhasilan dalam kultur jaringan. Metode ini bertujuan untuk mengetahui
berapa dosis kombinasi ZPT auksin dan sitokinin yang dapat memberikan pertumbuhan yang paling baik terhadap eksplan yang digunakan Hendaryono dan
Wijayani, 1994.
3. Eksplan
Eksplan adalah bagian tanaman yang sesuai, yang kemudian dijadikan semacam benih untuk membentuk pertumbuhan selanjutnya Wetherell, 1982.
Besarnya ukuran eksplan yang ditanam dalam beberapa kasus menentukan terbentuknya kalus atau tidak. Eksplan yang berukuran kecil akan cenderung
kalus, sedangkan eksplan yang ukurannya lebih besar potensial untuk bermorfogenesis Bionde dan Thorpe, 1981.
Menurut Soegihardjo 1990, bahan eksplan dapat dipilih sebagai berikut dengan tumbuhan yang dimaksud :
a. Gymnospermae : tunas kecambah steril atau bagian floem
b. Graminal : lembaga, mesokotil, akar atau bagian batang
c. Dicotyledoneae : kecambah steril akar, hipokotil, keping biji, batang, umbi
dan daun d.
Zingiberaceae dapat digunakan rimpang muda yang bertunas atau biji. Menurut George dan Sherington 1984, semakin besar eksplan yang
digunakan maka semakin besar kemungkinan eksplan akan terkontaminasi oleh mikroorganisme. Oleh karena itu perlu dicari ukuran eksplan yang minimun dan
efektif. Eksplan yang terlalu kecil tidak akan tumbuh secepat eksplan yang ukurannya terlalu besar. Biasanya eksplan yang terlalu kecil daya tahannya
kurang. Ukuran yang paling baik adalah jika sel berjumlah sekitar 20.000-25.000 buah Thorpe cit. Katuuk, 1989.
Macam eksplan, ukuran, umur dan cara pembudidayaan akan mempengaruhi berhasil tidaknya kultur jaringan tanaman dan apakah
morfogenesis akan dapat diimbas dari kultur jaringan tanaman tersebut. Aturan sederhana yang mungkin dapat digunakan sebagai pegangan adalah bahwa kita
harus menggunakan tanaman sumber eksplan yang sehat dan tumbuh kuat, memilih jaringan yang muda dan menggunakan eksplan yang cukup besar
Whetherell, 1982. PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
4. Menabur eksplan
