Uji Efek Antiinflamasi Jus Buah Belimbing Manis (Averrhoa carambola L.) Terhadap Tikus Jantan

Lampiran 3.Gambar Tumbuhan Buah Belimbing Manis (Averrhoa carambola L.)

Lampiran 4.Gambar Buah Segar dan Simplisia Belimbing Manis

Gambar.Buah segar belimbing manis

Lampiran 5.Gambar Mikroskopik Serbuk Simplisia

Gambar.Mikroskopik serbuk simplisia perbesaran 10 x 40 Keterangan :

1. Berkas pengangkut 2. Parenkim

3. Endosperm berisi butir pati

4. Kristal kalsium oksalat bentuk druse 5. Epidermis

6. Serabut

1

7 6

5 4 2

Lampiran 6.Perhitungan Hasil Pemeriksaan Karakterisasi Simplisia 1. Perhitungan penetapan kadar air

% Kadar Air = volume air (ml )

berat sampel (g)× 100%

a. Berat sampel = 5,089 g Volume air = 0,4 ml % Kadar air = 0,4 ml

5,089 g× 100% = 7,86%

b. Berat sampel = 5,004 g Volume air = 0,4 ml % Kadar air = 0,4 ml

5,004 g× 100% = 7,99%

c. Berat sampel = 5,116 g Volume air = 0,4 ml % Kadar air = 0,4 ml

5,116 g× 100% = 7,81%

% Rata-rata kadar air = 7,86% + 7,99% + 7,81% = 7,88%

Lampiran 6.Lanjutan

2. Perhitungan penetapan kadar sari larut dalam air % Kadar Sari Larut dalam Air = berat sari (g)

berat sampel (g)× 100

20 × 100%

a. Berat sampel = 5,100 g Berat sari = 0,237 g % Kadar sari larut dalam air = 0,237

5,100× 100

20 × 100% = 23,23%

b. Berat sampel = 5,026 g Berat sari = 0,203 g % Kadar sari larut dalam air = 0,203

5,026× 100

20 × 100% = 20,19%

c. Berat sampel = 5,020 g Berat sari = 0,218 g % Kadar sari larut dalam air = 0,218

5,020× 100

20 × 100% = 21,71%

% Rata-rata kadar sari larut dalam air = 23,23% + 20,19% + 21,71% = 21,71%

Lampiran 6. Lanjutan

3. Perhitungan penetapan kadar sari larut dalam etanol % Kadar Sari Larut dalam Etanol = berat sari (g)

berat sampel (g)× 100

20 × 100%

a. Berat sampel = 5,101 g Berat sari = 0,131 g % Kadar sari larut dalam etanol = 0,131

5,101× 100

20 × 100% = 12,84%

b. Berat sampel = 5,007 g Berat sari = 0,1 g % Kadar sari larut dalam etanol = 0,1

5,007× 100

20 × 100% = 9,98%

c. Berat sampel = 5,057 g Berat sari = 0,161 g % Kadar sari larut dalam etanol = 0,161

5,057× 100

20 × 100% = 15,91%

% Rata-rata kadar sari larut dalam etanol = 12,84% + 9,98% + 15,91% 3

Lampiran 6. Lanjutan

4. Perhitungan penetapan kadar abu total % Kadar Abu Total = berat abu (g)

berat sampel (g)× 100%

a. Berat sampel = 2,0003 g Berat Abu = 0,0719 g % Kadar abu total = 0,0719

2,0003 × 100% = 3,59%

b. Berat sampel = 2,0003 g Berat Abu = 0,0737 g % Kadar abu total = 0,0737

2,0003 × 100% = 3,68%

c. Berat sampel = 2,0003 g Berat Abu = 0,0760 g % Kadar abu total = 0,0760

2,0003 × 100% = 3,79%

% Rata-rata kadar abu total = 3,59% + 3,68% + 3,79% = 3,68%

Lampiran 6. Lanjutan

5. Perhitungan penetapan kadar abu tidak larut dalam asam % Kadar Abu Tidak Larut dalam Asam = berat abu (g)

berat sampel (g)× 100%

a. Berat sampel = 2,0003 g Berat Abu = 0,0030 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam = 0,0030

2,0003 × 100% = 0,15%

b. Berat sampel = 2,0003 g Berat Abu = 0,0025 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam = 0,0025

2,0003 × 100% = 0,12%

c. Berat sampel = 2,0003 g Berat Abu = 0,0025 g

% Kadar abu tidak larut dalam asam = 0,0025

2,0003 × 100% = 0,13%

% Rata-rata kadar abu tidak larut dalam asam = 0,15% + 0,12% + 0,13%

3

Lampiran 7.Bagan Kerja Penelitian

dicuci bersih, dipotong dagingnya sesuai ukuran pembuatan simplisia

ditimbang sebagai berat basah dikeringkan di lemari pengering pada suhu 400C

dihaluskan dan ditimbang beratnya Buah Belimbing

Manis

Serbuk Simplisia Simplisia

Karakterisasi Simplisia Skrining Fitokimia Pemeriksaan makroskopik

Pemeriksaan mikroskopik Penetapan kadar air Penetapan kadar sari yang

larut dalam air Penetapan kadar sari yang

larut dalam etanol Penetapan kadar abu total

Pemeriksaan Alkaloida Pemeriksaan Glikosida

Pemeriksaan Steroida/Triterpenoida Pemeriksaan Flavonoid

Pemeriksaan Tanin Pemeriksaan Saponin

Lampiran 7.Lanjutan

Bagan Pembuatan Jus Buah Belimbing Manis

dicuci bersih, dipotong bagian ujung buahnya dan

ditimbang beratnya 8kg

dihaluskan menggunakan juicer tanpa ditambah air

dibekukan dalam freezer dikeringkan dengan menggunakan freeze dryer ditimbang beratnya = 25 g

dilakukan uji efek antiinflamasi jus buah belimbing manis

Buah Belimbing Manis

Jus buah

Jus buah kering

Lampiran 8.Gambar Hewan Percobaan

Telapak kaki tikus sebelum diinduksi karagenan

Lampiran 9.Contoh Perhitungan Dosis Kontrol positif (natrium diklofenak)

Tiap tablet natrium diklofenak mengandung 50 mg natrium diklofenak Dosis pemakaian untuk manusia 25-50 mg

Konversi dari manusia (70 kg) untuk tikus 200 g = 0,018

Pemberian larutan natrium diklofenak

Konversi dosis untuk tikus = 50 mg x 0,018 = 0,90 mg

Maka dosis natrium diklofenak yang digunakan 0,90 mg untuk tikus 200 g, sehingga dosis dalam mg/kg bb adalah :

o,90 mg 200 g =

x 1 kg

x = 0,90 mg

200 g x 1000 g x = 4,5 mg/kg bb

Bahan uji (jus buah belimbing manis)

Lampiran 10.Contoh Perhitungan Persen Radang Dan Persen Inhibisi Radang 1. Persen Radang

Persen radang = Vt - Vo

Vo x 100%

Dimana :Vt = Volume udem kaki pada waktu t Vo = Volume awal kaki tikus

Misalnya : Jus buah belimbing manis dosis 125 mg/kg BB pada menit ke-30 Diketahui : Vt =4,99

Vo = 3,41

Persen Radang = 4,99 - 3,41

3,41 x 100% =46,33% 2. Persen Inhibisi Radang

Persen inhibisi radang = a - b

a x 100%

Dimana : a = Persen radang rata-rata kelompok kontrol

b = Persen radang rata-rata kelompok perlakuan yang mendapat bahan uji atau obat pembanding

Misalnya : Jus buah belimbing manis dosis 250 mg/kg BB pada menit ke-30 Diketahui : a = 51,25%

b = 33,25%

Persen Radang = 51,25 - 33,25

Lampiran 11.Tabel Konversi

Tabel Perbandingan Luas Permukaan Tubuh Hewan Percobaan Untuk Konversi Dosis (Suhardjo, 1995).

Hewan dan BB rata-rata Mencit 20 g Tikus 200 g Marmut 400 g Kelinci 1,5 kg Kera 2 kg Anjing 12 kg Manusia 70 kg Mencit 20 g

1,0 7,0 12,25 27,8 64,1 124,2 387,9

Tikus 200 g

0,14 1,0 1,74 3,9 9,2 17,8 56,0

Marmut 400 g

0,08 0,57 1,0 2,25 5,2 10,2 31,5

Kelinci 1,5 kg

0,04 0,25 0,44 1,0 2,4 4,5 14,2

Kera 4 kg

0,016 0,11 0,19 0,42 1,0 1,9 6,1

Anjing 12 kg

0,008 0,06 0,10 0,22 0,52 1,0 3,1

Manusia 70 kg

Lampiran 12.Hasil Analisis Deskriptif Persen Radang

Descriptives

N Mean

Std. Deviation

Std. Error

95% Confidence Interval for Mean

Mini-mum Maxi- mum Lower Bound Upper Bound Menit Ke-30

Na-CMC 0,5% 5 51.2580 1.83359 .82001 48.9813 53.5347 48.27 52.85 JBBM 125 mg 5 48.4780 2.00596 .89709 45.9873 50.9687 46.33 51.65 JBBM 250 mg 5 33.2520 .50732 .22688 32.6221 33.8819 32.70 33.75 JBBM 500 mg 5 28.0720 .81656 .36518 27.0581 29.0859 26.67 28.66 Na.Diklofenak

4,5mg

5 25.5880 .44941 .20098 25.0300 26.1460 25.00 26.22

Total 25 37.3296 10.85215 2.17043 32.8501 41.8091 25.00 52.85 Menit

Ke-60

Na-CMC 0,5% 5 64.7220 2.83892 1.26960 61.1970 68.2470 60.40 67.09 JBBM 125 mg 5 52.8620 3.36006 1.50266 48.6899 57.0341 47.51 56.76 JBBM 250 mg 5 38.9720 2.89190 1.29330 35.3812 42.5628 35.85 42.14 JBBM 500 mg 5 31.8820 .80310 .35916 30.8848 32.8792 31.10 32.83 Na-Diklofenak

4,5mg

5 28.4920 1.76480 .78924 26.3007 30.6833 26.57 30.79

Total 25 43.3860 14.02270 2.80454 37.5977 49.1743 26.57 67.09 Menit

Ke-90

Na-CMC 0,5% 5 73.3080 1.78346 .79759 71.0935 75.5225 70.52 74.93 JBBM 125 mg 5 57.8220 3.51432 1.57165 53.4584 62.1856 51.91 61.26 JBBM 250 mg 5 44.7580 3.28387 1.46859 40.6805 48.8355 41.19 47.80 JBBM 500 mg 5 35.3320 .67180 .30044 34.4978 36.1662 34.76 36.17

Na-Diklofenak4,5m

g

5 31.5600 2.00340 .89595 29.0725 34.0475 29.25 33.54

Total 25 48.5560 15.82000 3.16400 42.0258 55.0862 29.25 74.93 Menit

Ke-120

Na-CMC 0,5% 5 78.2140 3.94671 1.76502 73.3135 83.1145 73.99 84.49 JBBM 125 mg 5 68.8820 2.38184 1.06519 65.9246 71.8394 64.81 70.87 JBBM 250 mg 5 49.6200 3.12390 1.39705 45.7412 53.4988 45.94 52.83 JBBM 500 mg 5 41.8020 .88180 .39435 40.7071 42.8969 40.85 42.86 Na- 5 38.2280 .62564 .27979 37.4512 39.0048 37.35 39.10

JBBM 500 mg 5 44.8300 .53362 .23864 44.1674 45.4926 44.18 45.59

Na-Diklofenak4,5m g

5 41.3040 .45346 .20280 40.7409 41.8671 40.90 41.99

Total 25 59.8860 18.15206 3.63041 52.3932 67.3788 40.90 93.04 Menit

Ke-180

Na-CMC 0,5% 5 86.2600 4.59834 2.05644 80.5504 91.9696 81.79 93.99 JBBM 125 mg 5 78.1440 3.02544 1.35302 74.3874 81.9006 73.02 81.08 JBBM 250 mg 5 54.2380 1.96717 .87975 51.7954 56.6806 52.50 56.92 JBBM 500 mg 5 46.4640 1.06453 .47607 45.1422 47.7858 45.76 48.33

Na-Diklofenak4,5m

g

5 44.2540 .58505 .26164 43.5276 44.9804 43.58 45.12

Total 25 61.8720 17.64314 3.52863 54.5893 69.1547 43.58 93.99 Menit

Ke-210

Na-CMC 0,5% 5 88.6120 5.25064 2.34816 82.0925 95.1315 83.24 97.15 JBBM 125 mg 5 81.1980 3.47513 1.55412 76.8831 85.5129 75.66 85.29 JBBM 250 mg 5 56.1740 1.14448 .51183 54.7529 57.5951 54.43 57.55 JBBM 500 mg 5 43.3760 1.00510 .44950 42.1280 44.6240 42.30 44.98

Na-Diklofenak4,5m

g

5 37.9280 .90190 .40334 36.8081 39.0479 36.45 38.81

Total 25 61.4576 20.76541 4.15308 52.8861 70.0291 36.45 97.15 Menit

Ke-240

Na-CMC 0,5% 5 89.2540 4.90071 2.19166 83.1690 95.3390 84.68 97.47 JBBM 125 mg 5 77.8440 3.60568 1.61251 73.3670 82.3210 73.02 83.18 JBBM 250 mg 5 53.8080 1.43837 .64326 52.0220 55.5940 51.99 55.66 JBBM 500 mg 5 40.8960 1.20295 .53797 39.4023 42.3897 39.94 42.30

Na-Diklofenak4,5m

g

5 34.4960 1.27365 .56959 32.9146 36.0774 32.83 36.25

Total 25 59.2596 21.69364 4.33873 50.3049 68.2143 32.83 97.47 Menit

Ke-270

Na-CMC 0,5% 5 86.9480 4.29621 1.92132 81.6136 92.2824 82.66 93.99 JBBM 125 mg 5 73.6680 4.08268 1.82583 68.5987 78.7373 68.04 79.58 JBBM 250 mg 5 50.5300 3.91581 1.75120 45.6679 55.3921 44.04 54.09 JBBM 500 mg 5 36.0000 1.09909 .49153 34.6353 37.3647 34.63 37.27

Na-Diklofenak4,5m

g

5 32.2740 .52070 .23286 31.6275 32.9205 31.63 32.93

Total 25 55.8840 21.91016 4.38203 46.8399 64.9281 31.63 93.99 Menit

Ke-300

Na-CMC 0,5% 5 84.1000 4.89054 2.18711 78.0276 90.1724 80.06 92.41 JBBM 125 mg 5 71.0360 3.11831 1.39455 67.1641 74.9079 66.57 75.38 JBBM 250 mg 5 47.8480 4.19371 1.87549 42.6408 53.0552 40.67 51.08 JBBM 500 mg 5 33.3940 .75198 .33630 32.4603 34.3277 32.73 34.65

Na-Diklofenak4,5m

g

5 29.4420 .27707 .12391 29.0980 29.7860 29.22 29.88

Total 25 53.1640 21.88886 4.37777 44.1287 62.1993 29.22 92.41 Menit

Ke-330

Na-CMC 0,5% 5 80.3680 5.15734 2.30643 73.9643 86.7717 76.30 89.24 JBBM 125 mg 5 68.6420 3.61850 1.61824 64.1490 73.1350 63.64 73.87 JBBM 250 mg 5 45.5460 4.15224 1.85694 40.3903 50.7017 38.53 48.92 JBBM 500 mg 5 29.1620 .62367 .27892 28.3876 29.9364 28.06 29.57

Na-Diklofenak4,5m

g

5 26.4960 .70808 .31666 25.6168 27.3752 25.67 27.44

Total 25 50.0428 21.99663 4.39933 40.9630 59.1226 25.67 89.24 Menit

Ke-360

Na-CMC 0,5% 5 76.5800 5.67728 2.53896 69.5307 83.6293 72.25 86.39 JBBM 125 mg 5 64.8160 3.38124 1.51214 60.6176 69.0144 60.12 69.67 JBBM 250 mg 5 43.8020 4.38866 1.96267 38.3528 49.2512 36.70 47.99 JBBM 500 mg 5 27.2280 .54145 .24214 26.5557 27.9003 26.27 27.58

Na-Diklofenak4,5m

g

5 24.6840 1.19169 .53294 23.2043 26.1637 22.89 25.98

Lampiran 13.Hasil Uji Analisis Variansi (ANOVA) One Way

ANOVA

Sum of

Squares df Mean Square F Sig. Menit

Ke-30

Between Groups

2792.411 4 698.103 410.067 .000

Within Groups 34.048 20 1.702 Total 2826.460 24

Menit Ke-60

Between Groups

4593.381 4 1148.345 182.439 .000

Within Groups 125.888 20 6.294 Total 4719.269 24

Menit Ke-90

Between Groups

5883.416 4 1470.854 238.931 .000

Within Groups 123.119 20 6.156 Total 6006.536 24

Menit Ke-120

Between Groups

6077.108 4 1519.277 236.078 .000

Within Groups 128.710 20 6.435 Total 6205.818 24

Menit Ke-150

Between Groups

7697.019 4 1924.255 182.463 .000

Total 7907.939 24 Menit

Ke-180

Between Groups

7328.154 4 1832.039 256.996 .000

Within Groups 142.573 20 7.129 Total 7470.727 24

Menit Ke-210

Between Groups

10177.738 4 2544.434 297.391 .000

Within Groups 171.117 20 8.556 Total 10348.855 24

Menit Ke-240

Between Groups

11126.108 4 2781.527 329.908 .000

Within Groups 168.624 20 8.431 Total 11294.732 24

Menit Ke-270

Between Groups

11313.568 4 2828.392 272.283 .000

Within Groups 207.753 20 10.388 Total 11521.322 24

Menit Ke-300

Between Groups

11291.453 4 2822.863 272.106 .000

Within Groups 207.483 20 10.374 Total 11498.935 24

Menit Ke-330

Between Groups

11381.144 4 2845.286 246.033 .000

Within Groups 231.293 20 11.565 Total 11612.437 24

Lampiran 14.Hasil uji Tukey

Menitke-30 Tukey HSDa

Kelompok

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4 5

Na-Diklofenak 4,5 mg 5 25.5880

JBBM 500 mg 5 28.0720

JBBM 250 mg 5 33.2520

JBBM 125 mg 5 48.4780

Na-CMC 0,5% 5 51.2580

Sig. 1.000 1.000 1.000 1.000 1.000 Means for groups in homogeneous subsets are displayed.

a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

Menit ke-60 Tukey HSDa

Kelompok

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na-Diklofenak 4,5 mg 5 28.4920 JBBM 500 mg 5 31.8820

JBBM 250 mg 5 38.9720

JBBM 125 mg 5 52.8620

Na-CMC 0,5% 5 64.7220

Sig. .244 1.000 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

Lampiran 14. Lanjutan

Menit ke-90 Tukey HSDa

Kelompok

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na-Diklofenak 4,5 mg 5 31.5600 JBBM 500 mg 5 35.3320

JBBM 250 mg 5 44.7580

JBBM 125 mg 5 57.8220

Na-CMC 0,5% 5 73.3080

Sig. .155 1.000 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

Menit ke-120 Tukey HSDa

Kelompok

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na-Diklofenak 4,5 mg 5 38.2280 JBBM 500 mg 5 41.8020

JBBM 250 mg 5 49.6200

JBBM 125 mg 5 68.8820

Na-CMC 0,5% 5 78.2140

Sig. .210 1.000 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

Lampiran 14. Lanjutan

Menit ke-150 Tukey HSDa

Kelompok

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na-Diklofenak 4,5 mg 5 41.3040 JBBM 500 mg 5 44.8300

JBBM 250 mg 5 51.6720

JBBM 125 mg 5 77.3360

Na-CMC 0,5% 5 84.2880

Sig. .447 1.000 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

Menitke-180 Tukey HSDa

Kelompok

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na-Diklofenak4,5 mg 5 44.2540 JBBM 500 mg 5 46.4640

JBBM 250 mg 5 54.2380

JBBM 125 mg 5 78.1440

Na-CMC 0,5% 5 86.2600

Sig. .689 1.000 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

Lampiran 14. Lanjutan

Menitke-210 Tukey HSDa

Kelompok

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na-Diklofenak 4,5 mg 5 37.9280 JBBM 500 mg 5 43.3760

JBBM 250 mg 5 56.1740

JBBM 125 mg 5 81.1980

Na-CMC 0,5% 5 88.6120

Sig. .055 1.000 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

Menit ke-240 Tukey HSDa

Kelompok

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na-Diklofenak 4,5 mg 5 34.4960 JBBM 500 mg/kg BB 5 38.0560

JBBM 250 mg/kg BB 5 53.8080

JBBM 125 mg/kg BB 5 77.8440

Na-CMC 0,5% 5 89.2540

Sig. .329 1.000 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

Lampiran 14. Lanjutan

Menitke-270 Tukey HSDa

Kelompok

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na-Diklofenak 4,5 mg 5 32.2740 JBBM 500 mg 5 36.0000

JBBM 250 mg 5 50.5300

JBBM 125 mg 5 73.6680

Na-CMC 0,5% 5 86.9480

Sig. .386 1.000 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

Menit ke-300 Tukey HSDa

Kelompok

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na-Diklofenak 4,5 mg 5 29.4420 JBBM 500 mg 5 33.3940

JBBM 250 mg 5 47.8480

JBBM 125 mg 5 71.0360

Na-CMC 0,5% 5 84.1000

Sig. .330 1.000 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

Lampiran 14. Lanjutan

Menitke-330 Tukey HSDa

Kelompok

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na-Diklofenak4,5 mg 5 26.4960 JBBM 500 mg 5 29.1620

JBBM 250 mg 5 45.5460

JBBM 125 mg 5 68.6420

Na-CMC 0,5% 5 80.3680

Sig. .729 1.000 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

Menit ke-360 Tukey HSDa

Kelompok

N

Subset for alpha = 0.05

1 2 3 4

Na-Diklofenak 4,5 mg 5 24.6840 JBBM 500 mg 5 27.2280

JBBM 250 mg 5 43.8020

JBBM 125 mg 5 64.8160

Na-CMC 0,5% 5 76.5800

Sig. .795 1.000 1.000 1.000

Means for groups in homogeneous subsets are displayed. a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.

DAFTAR PUSTAKA

Arisandi, Y., dan Andriani, Y. (2006). Khasiat Berbagai Tanaman Untuk Pengobatan. Cetakan I. Jakarta: Penerbit Eska Media. Halaman 34-35.

British Pharmacopoeia.(2009).British Pharmacopoeia.Medicines and Healthcare Products Regulatory Agency (MHRA).Halaman 6488.

Christianie, M., Setiati, S., Trisna, Y., dan Andrajati, R. (2008). Kejadian Reaksi Obat yang Tidak Dikehendaki yang Menyebabkan Pasien Usia Lanjut Dirawat di Ruang Perawatan Penyakit Dalam Instalansi Rawat Inap B Rumah Sakit Dr. Cipto Mangunkusumo. Majalah Ilmu Kefarmasian. 5(3): 138-149

Depkes RI. (1986). Sediaan Galenika. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 8-11.

Depkes RI. (1995). Materia Medika Indonesia. Jilid VI. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 299-306, 321-322, 325, 333-337.

Depkes RI. (2001). Inventaris Tanaman Obat Indonesia. Jilid II. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 39-40.

Ditjen POM RI.(2000).Parameter Standar umum Ekstrak Tumbuhan Obat. Jakarta: Departemen Kesehatan RI. Halaman 10-11.

Farnsworth, N.R. (1966). Biologycal and Phytochemical Screening of Plants. Journal of Pharmaceutical Science.Volume 55. Halaman 262-264.

Guyton dan Hall.(1997). Buku Ajar Fisiologi Kedokteran. Edisi XI. Jakarta: EGC. Halaman 455.

Harborne, J.B. (1987). Metode Fitokima Penuntun Cara Modern Menganalisa Tumbuhan. Edisi I. Penerjemah: Kosasih Padmawinata dan Iwang Soediro. Bandung: ITB. Halaman 152.

Himawan, S. (1994).Patologi. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. Halaman 51-52.

Juheini, F.W., Mariana. Y., dan Rusmawan, I. (1990). Efek Antiinflamasi Jahe (Zingiber officinale. Rosc) Terhadap Radang Buatan Pada Tikus Putih.Majalah Farmakologi dan Terapi Indonesia 7(1). Jakarta: Halaman 9-13.

Katzung, B.G. (2002). Farmakologi Dasar dan Klinik. Edisi I. Jakarta: Salemba Medika. Halaman 449.

Lumbanraja, L.B. (2009). Skrining Fitokimia dan Uji Efek Antiinflamasi Ekstrak Etanol Daun Tempuyung (Sonchus arvenis L.)Terhadap Radang Pada Tikus.Skripsi. Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Muhlisah, F. (1999).Temu-temuan dan Empon-Empon Budi Daya dan Manfaatnya. Yogyakarta: Penerbit Kanisius. Halaman 73-76.

Mycek, M.J. (2001). Farmakologi Ulasan Bergambar. Jakarta: Widya Medika. Halaman 404, 406.

Nugroho, E.A. (2012). Farmakologi Obat-obat Penting dalam Pembelajaran Ilmu Farmasi dan Dunia Kesehatan. Cetakan II. Yogyakarta: Pustaka Pelajar. Halaman 168-169.

Price, S.A dan Wilson, L.M. (2005).Patofisiologi Konsep Klinik Proses-Proses Penyakit.Edisi 4.Jakarta : EGC. Halaman 35-50.

Ramadhani, R. (2014). Jus Buah Populer. Cetakan I. Jakarta: Kawan Pustaka. Halaman 7.

Robbins, S.L., Kumar, V., dan Cotran, R.S. (2007). Buku Ajar Patologi. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC. 7(1): 35-37, 50-53.

Robinson T.(1995). Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. Bandung: ITB. Halaman 191-193.

Rowe, R.C., Paul, J.S., dan Marian, E.Q. (2009). Handbook of Pharmaceutical Excipient. Edisi 6. USA: Pharmaceutical Press. Halaman 623.

Sa’roni, danDzulkarnain, B. (1989).Penelitian efek antiinflamasi batang brotowali, daun kejibeling dan rimpang kunyit pada tikus putih. Majalah Farmakologi danTerapi Indonesia 6 (3). Halaman 63-65.

Shadine, M. (2010).Mengenal Penyakit Hipertensi, Diabetes, Stroke dan Serangan Jantung. Cetakan I. Jakarta: Keenbooks. Halaman 57.

Stringer, J.L. (2001).Basic Concept in Pharmacology a Student's Survival Guide. Edisi II. Canada: McGraw-Hill Companies. Halaman 251-252.

Sukadana, I.M. (2009). Senyawa Antibakteri Golongan Flavonoid Dari Buah Belimbing Manis (Averrhoa carambola Linn.). Jurnal Kimia (online).

Tan, H.T., dan Rahardja, K. (2007). Obat-Obat Penting (Khasiat, Penggunaan, dan Efek-Efek Samping). Edisi VI. Jakarta: Elex Media Komputindo. Halaman 327-330.

Wilmana, P.F. (1995). Analgesik Antipiretik Antiinflamasi Nonsteroid dan Obat Pirai.Dalam:Ganiswara, S.G. Farmakologi dan Terapi. Edisi IV. Jakarta: Penerbit Gaya Baru. Halaman 207, 218.

Wijayakusuma, H., dan Dalimartha, S. (2000). Ramuan Tradisional Untuk Pengobatan Darah Tinggi. Cetakan VI. Jakarta: Penebar Swadaya. Halaman 13,42-43.

Winter, C.A., Risley, E.A., dan Nuss, G.W. (1962). Carrageenin-Induced Oedema In The Hind Paw of The Rat As an Assay To Antiinflammatory Drugs. Proc Soc Exp Biol Med. 111:544-547.

Zettira, Z. (2010). Health Secret Of Pepino. Jakarta: Penerbit PT Elex Media Komputindo. Halaman 28-29.

BAB III

METODE PENELITIAN

Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah metode eksperimental. Tahap penelitian meliputi penyiapan sampel, pengambilan buah,penyiapan hewan percobaan, karakteristik simplisia, skrining fitokimia, pembuatan jus buah belimbing manis dan pengujian efek antiinflamasi terhadap tikus jantan. Dasar metode ini adalah dengan membuat udema pada telapak kaki belakang tikus menggunakan karagenan 1%.Data hasil penelitian dianalisis dengan ANOVA dan dilanjutkan dengan uji Post Hoc Tukey.Analisis statistik ini menggunakan program SPSS (Statistical Product and Service Solution) versi 18.Penelitian ini dilakukan di Laboratorium Farmakologi dan Laboratorium Fitokimia Fakultas Farmasi, Universitas Sumatera Utara.

3.1 Alat dan Bahan 3.1.1 Alat-alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah alat-alat gelas laboratorium, stopwatch, juicer, kandang tikus, hot plate, lumpang dan stamfer, spuit, kamera digital, neraca hewan (Presica Geniweigher, GW-1500), neraca analitik (Vibra AJ), inkubator (Gallenkamp), freeze dryer, spatula, plestismometer, oral sonde dan spuit.

karboksi metil selulosa (CMC), λ-karagenan, larutan natrium klorida 0,9%, Pb (II)

asetat, besi (III) klorida P, merkuri (II) klorida, kalium iodida, iodium, α-naftol, asam nitrat, bismut nitrat, eter, kloroform, isopropanol, metanol, natrium sulfat anhidrat, etil asetat, serbuk magnesium, serbuk seng, asam klorida P, eter, asam sulfat P, dan air suling.

3.1.3 Hewan yang digunakan

Hewan percobaan yang digunakan adalah tikus putih jantan galur Wistar dengan berat badan 150-200 g.

3.2 Penyiapan Sampel

Penyiapan sampelmeliputi pengambilan buah, identifikasi buah, dan pembuatan simplisia.

3.2.1Pengambilan buah

Pengumpulan buah dilakukan secara purposif yaitu tanpa membandingkan dengan bahan yang sama dari daerah lain. Umur bahan yang diambil tidak diperhitungkan.Bahan yang digunakan adalah buah belimbing manis (Averrhoa carambola L.) yang diperoleh dari Pasar Tradisonal Pajak Sore, Jl.Jamin Ginting, Kelurahan Padang Bulan, Kecamatan Medan Baru, Kota Medan, Provinsi Sumatera Utara.

3.2.2 Identifikasi buah

Identifikasi buah dilakukan di "Herbarium Bogoriense", Bidang Botani, Pusat Penelitian Biologi, Lembaga Ilmu Pengetahuan Indonesia (LIPI), Bogor.

3.2.3 Pembuatan simplisia

Buah belimbing manisdicuci hingga bersih kemudian ditiriskan, dirajang tipis dan ditimbang, diperoleh berat basah 2 kg. Selanjutnya dikeringkan dalam lemari pengering pada suhu ± 40oC.Setelah kering diblender menjadi serbuk, ditimbang lalu dimasukkan kedalam wadah botol plastik bertutup rapat dan disimpan pada suhu kamar.Hasil yang diperoleh digunakan untuk skrining fitokimia.

3.3 Pembuatan Larutan Pereaksi 3.3.1 Pereaksi Mayer

Sebanyak 1,4 g raksa (II) klorida dilarutkan dalam air suling hingga 60 ml, pada wadah lain ditimbang sebanyak 5 g kalium iodida lalu dilarutkan dalam 10 ml air suling, kedua larutan dicampurkan dan ditambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.2Pereaksi Dragendroff

Sebanyak 0,8 g bismut (III) nitrat ditimbang, dilarutkan dalam 20 ml asam nitrat pekat, pada wadah lain ditimbang sebanyak 27,2 g kalium iodida, dilarutkan dalam 50 ml air suling, kemudian kedua larutan dicampurkan dan didiamkan sampai memisah sempurna. Larutan yang jernih diambil dan diencerkan dengan air suling hingga volume larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.4Pereaksi Molish

Sebanyak 3 g α-naftol ditimbang, dilarutkan dalam asam nitrat 0,5 N hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.5 Pereaksi Lieberman-Bourchard

Sebanyak 5 bagian volume asam sulfat pekat dicampurkan dengan 50 bagian volume etanol 95%.Kemudian ditambahkan dengan hati-hati 5 bagian volume asam asetat anhidrida ke dalam campuran tersebut dan dinginkan (Depkes RI, 1995).

3.3.6 Pereaksi besi (III) klorida 1% b/v

Sebanyak 1 g besi (III) klorida ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air secukupnya hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.7 Pereaksi timbal (II) asetat 0,4 M

Sebanyak 15,17 g timbal (II) asetat ditimbang, kemudian dilarutkan dalam air suling bebas karbon dioksida sebanyak 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.8 Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N

Sebanyak 8 g kristal natrium hidroksida dilarutkan dengan air suling sebanyak 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.9 Pereaksi asam klorida 2 N

Sebanyak 17 ml larutan asam klorida pekat ditambahkan air suling hingga diperoleh larutan 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.3.10 Pereaksi asam sulfat 2 N

Sebanyak 5,5 ml larutan asam sulfat pekat ditambahkan air suling sampai 100 ml (Depkes RI, 1995).

3.4 Karakteristik Simplisia

Pemeriksaan karakteristik simplisia meliputi pemeriksaan makroskopik dan mikroskopik, penetapan kadar air, penetapan kadar sari larut air, penetapan kadar sari larut etanol, penetapan kadar abu total, penetapan kadar abu tidak larut asam (Depkes RI, 1995).

3.4.1 Pemeriksaan makroskopik

Pemeriksaan makroskopik dilakukan dengan mengamati bentuk luar dari buah belimbing manis.

3.4.2 Pemeriksaan mikroskopik

Pemeriksaan mikroskopik terhadap simplisia dilakukan dengan cara menaburkan serbuk simplisia diatas kaca objek yang telah ditetesi dengan larutan kloralhidrat dan ditutup dengan kaca penutup kemudian diamati dibawah mikroskop.

3.4.3 Penetapan kadar air

Penetapan kadar air dilakukan dengan metode Azeotropi (Destilasi Toluen). Alat meliputi labu alas bulat 500 ml, alat penampung, tabung penerima 5 ml berskala 0,05 ml, pendingin, tabung penyambung, pemanas.

Cara kerja:

a. Penjenuhan toluen

b. Penetapan kadar air simplisia

Sebanyak 5 g serbuk simplisia yang telah ditimbang seksama, dimasukkan ke dalam labu yang berisi toluen jenuh tersebut, lalu dipanaskan hati-hati selama 15 menit.Setelah toluen mendidih, kecepatan tetesan diatur 2 tetes untuk tiap detik sampai sebagian besar air terdestilasi, kemudian kecepatan destilasi dinaikkan sampai 4 tetes tiap detik.Setelah semua air terdestilasi, bagian dalam pendingin dibilas dengan toluen.Destilasi dilanjutkan selama 5 menit, kemudian tabung penerima dibiarkan mendingin pada suhu kamar. Setelah air dan toluen memisah sempurna, volume air dibaca dengan ketelitian 0,05 ml. Selisih kedua volume air yang dibaca sesuai dengan kandungan air yang terdapat dalam bahan yang diperiksa. Kadar air dihitung dalam persen (Depkes RI, 1995).

3.4.4 Penetapan kadar sari larut air

Sebanyak 5 gram serbuk yang telah dikeringkan di udara, dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml air-kloroform (2,5 ml kloroform dalam air suling sampai 1 liter) menggunakan labu bersumbat sambil berkali-kali dikocok selama 6 jam pertama dan kemudian di biarkan selama 18 jam. Saring, uapkan 20 ml filtrat hingga kering dalam cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara, panaskan sisa pada suhu 105ºC hingga bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang

larut dalam air dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 1995).

3.4.5 Penetapan kadar sari larut etanol

Sebanyak 5 gram serbuk yang telah dikeringkan di udara, dimaserasi selama 24 jam dalam 100 ml etanol 95% dalam labu bersumbat sambil dikocok sesekali selama 6 jam pertama dan kemudian dibiarkan selama 18 jam. Saring

cepat dengan menghindarkan penguapan etanol (95%), uapkan 20 ml filtrat hingga kering dengan cawan dangkal berdasar rata yang telah ditara, panaskan sisa pada suhu 105ºC hingga bobot tetap. Kadar dalam persen sari yang larut dalam etanol 95% dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 1995).

3.4.6 Penetapan kadar abu total

Sebanyak 2 gram serbuk yang telah digerus dan ditimbang seksama dimasukkan dalam kurs porselin yang telah dipijar dan ditara, kemudian diratakan. Kurs dipijar perlahan-lahan sampai arang habis, pijaran dilakukan pada suhu 600ºC selama 3 jam kemudian didinginkan dan ditimbang sampai diperoleh bobot tetap. Kadar abu dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 1995).

3.4.7Penetapan kadar abu yang tidak larut asam

Abu yang diperoleh pada penetapan kadar abu dididihkan dalam 25 ml asam klorida encer selama 5 menit, bagian yang tidak larut dalam asam dikumpulkan, disaring melalui kertas saring dipijarkan sampai bobot tetap, kemudian didinginkan dan ditimbang. Kadar abu yang tidak larut dalam asam dihitung terhadap bahan yang telah dikeringkan di udara (Depkes RI, 1995).

3.5Skrining Fitokimia 3.5.1 Pemeriksaan alkaloid

didinginkan dan disaring, filtrat dipakai untuk uji alkaloida. Diambil 3 tabung reaksi, lalu ke dalam masing-masing tabung reaksi dimasukkan 0,5 ml filtrat.

Pada tabung I:ditambahkan 2 tetes pereaksi Mayer, akan terbentuk endapan menggumpal berwarna putih atau kuning

Pada tabung II: ditambahkan 2 tetes pereaksi Dragendorff, akan terbentuk endapan berwarna coklat atau jingga kecoklatan.

Pada tabung III: ditambahkan 2 tetes pereaksi Bouchardat, akanterbentuk endapan berwarna coklat sampai kehitaman.

Alkaloid disebut positif jika terjadi endapan atau kekeruhan pada dua atau tiga dari percobaan di atas (Depkes RI, 1995).

3.5.2 Pemeriksaan flavonoid

Serbuk simplisia ditimbang sebanyak 10 g, ditambahkan 10 ml air panas, dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam keadaan panas, ke dalam 5 ml filtrat ditambahkan 0,1 g serbuk magnesium dan 1 ml asam klorida pekat dan 2 ml amil alkohol, dikocok dan dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika terjadi warna merah atau kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol.

3.5.3 Pemeriksaan saponin

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia ditimbang, dimasukkan ke dalam tabung reaksi, ditambahkan 10 ml air suling panas, didinginkan, kemudian dikocok kuat-kuat selama 10 detik. Saponin positif jika terbentuk busa yang stabil tidak kurang dari 10 menit setinggi 1 sampai 10 cm dan dengan penambahan 1 tetes asam klorida 2 N buih tidak hilang (Depkes RI, 1995).

3.5.4 Pemeriksaan glikosida

Sebanyak 3 g serbuk simplisia ditimbang, disari dengan 30 ml campuran dari 7 bagian etanol 95% dengan 3 bagian air suling (7:3) dan 10 ml asam klorida 2N. Kemudiaan direfluks selama 10 menit, didinginkan, lalu disaring. Diambil 20 ml filtrat ditambahkan 25 ml air suling dan 25 ml timbal (II) asetat 0,4 M dikocok, didiamkan 5 menit lalu disaring. Filtrat disari dengan 20 ml campuran isopropanol dan kloroform (2:3), perlakuan ini diulangi sebanyak 3 kali.Sari air dikumpulkan dan ditambahkan Na2SO4 anhidrat, disaring, kemudiaan diuapkan pada temperatur tidak lebih dari 500C, sisanya dilarutkan dalam 2 ml metanol. Larutan sisa digunakan untuk percobaan berikut, 0,1 ml larutan percobaan dimasukkan dalam tabung reaksi, kemudian diuapkan di atas penangas air. Pada sisa ditambahkan 2 ml air dan 5 tetes larutan perekasi Molish, lalu ditambahkan dengan perlahan-lahan 2 ml asam sulfat pekat melalui dinding tabung, terbentuk cincin ungu pada batas kedua cairan, menunjukkan adanya ikatan gula (glikon) atau glikosida (Depkes RI, 1995).

3.5.5Pemeriksaan tanin

Sebanyak 0,5 g serbuk simplisia ditimbang, disari dengan 10 ml air suling lalu disaring, filtratnya diencerkan dengan air sampai tidak berwarna. Larutan diambil sebanyak 2 ml dan ditambahkan 1-2 tetes pereaksi besi (III) klorida 1%. Jika terjadi warna biru atau hijau kehitaman menunjukkan adanya tanin (Farnsworth, 1966).

sisa ditambahkan 20 tetes asam asetat anhidrida dan 1 tetes asam sulfat pekat pereaksi Lieberman-burchard), timbulnya warna biru atau biru hijau menunjukkan adanya steroida, sedangkan warna merah, merah muda atau ungu menunjukkan adanya triterpenoid (Harborne, 1987).

3.6Pembuatan Jus Buah Belimbing Manis

Pembuatan jus buah belimbing yang dipilih adalah buah belimbing manisyang masih baik, tidak cacat karena pembusukan dan seragam tingkat kematangannya. Pemilihan ini penting agar didapat hasil yang baik.Belimbing selanjutnya dicuci dengan air sampai bersih kemudian ditiriskan. Buah kemudian dipotong kecil dan ditimbang sebanyak 8 kg yang dihaluskan menggunakan juicer tanpa ditambahkan pelarut, kemudian hasil sari jus tersebut di freeze dryer.Hasil yang diperoleh digunakan untuk uji antiinflamasi.

3.7 Penyiapan Bahan Uji, Kontrol dan Obat Pembanding

Jus buah belimbing manis dengan dosis 125 mg/kg bb, 250 mg/kg bb, 500 mg/kg bb (bahan uji), suspensi Na.diklofenak dosis 4,5 mg (kontrol positif), suspensi CMC 0,5% (kontrol negatif),karagenan 1% (penginduksi).

3.7.1 Pembuatan suspensiCMC 0,5%

Sebanyak 500 mg CMC ditaburkan merata kedalam lumpang yang telah berisi air suling panas sebanyak 35 ml, didiamkan selama 15 menit hingga diperoleh massa yang transparan, digerus hingga terbentuk gel kemudian diencerkan dengan sedikit air, dimasukkan ke dalam labu tentukur 100 ml, lalu ditambahkan air suling sampai garis tanda.

3.7.2Pembuatan suspensi natrium diklofenak dosis 4,5 mg/kg bb

Ditimbang sebanyak 4,5 mg natrium diklofenak kemudian digerus dengan penambahan suspensi CMC 0,5% sampai homogen, dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml, lalu ditambahkan suspensi CMC 0,5% sampai garis tanda.

3.7.3 Pembuatan suspensi jus buah belimbing manisdosis 125 mg/kg bb, 250 mg/kg bb, 500 mg/kg bb

Ditimbang 125 mg, 250 mg, 500 mg jus buah belimbing manis. Masing-masing digerus dengan penambahan suspensi CMC 0,5% sampai homogen, dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml, dicukupkan sampai garis tanda dengan suspensi CMC 0,5%.

3.8Pembuatan Induktor Radang (karagenan 1%)

Ditimbang sebanyak 100 mg lambda karagenan, lalu dihomogenkan dengan larutan natrium klorida 0,9%, kemudian dimasukkan ke dalam labu tentukur 10 ml, lalu dicukupkan dengan larutan natrium klorida 0,9% sampai garis tanda kemudian didiamkan dan diinkubasi pada suhu 370C selama 24 jam.

3.9 Penyiapan Hewan Percobaan

Sebanyak 25 ekortikus putih jantan galur Wistar, dibagi dalam 5 kelompok, setiap kelompok terdiri dari 5 ekor tikus. Sebelum pengujian hewan percobaan di aklimatisasi dan harus dirawat dengan sebaik-baiknya pada kandang

3.10 Prosedur Penggunaan Alat Pletismometer Digital 3.10.1 Larutan untuk reservoir :

Sebanyak 2 ml campuran senyawa pembasah (Ornano Imbibente BBC.97) yang telah tersedia dalam kemasan standar. Dimasukkan ke dalam labu tentukur 1 L, ditambahkan 0,4 g NaCl kemudian dilarutkan dengan air suling lalu dimasukkan kedalam labu tentukur 1000 ml, kemudian dicukupkan dengan menggunakan air suling sampai garis tanda.

3.10.2 Penyiapan alat :

Larutan untuk reservoir yang telah disiapkan sebelumnya dimasukkan ke dalam reservoir yang telah dirangkai pada alat kemudiaan diisi sel dengan memutar kepala katub kira-kira 450 ke arah kiri atau kanan sesuai dengan posisi reservoir itu dihubungkan, alirkan beberapa kali dengan memutar kepala katub untuk menghindari gelembung udara. Atur batas air sampai mendekati garis merah bagian atas pada sel. Alat dihidupkan maka tampilan grafik akan menyala dan menunjukkan logo Ugo Basile, hangatkan alat kira-kira 2-3 menit.

3.10.3 Kaliberasi alat :

Tekan F1 dari menu utama maka akan ditampilkan angka 0 secara otomatis kemudian tekan kembali F1 yang akan menunjukkan angka 0,5 ml, tekan kembali tombol F1 yang akan menunjukkan angka 1,0; 2,0; 4,0; 8,0 ml. Setelah itu, pilihlah probe kaliberasi (2 ml) dan tekan F2 untuk konfirmasinya. Masukkan probe volum ke dalam sel, tunggu beberapa detik hingga nilai yang ditunjukkan stabil. Alat siap digunakan untuk pengukuran kaki tikus.

3.11 Prosedur Pengujian Efek Antiinflamasi

Sebelum pengujian, tikus dipuasakan selama 14-16 jam dengan tetap diberi air minum. Tikus dikelompokkan ke dalam 5 kelompok, yaitu kelompok kontrol negatif (suspensi CMC 0,5%), kelompok bahan uji (tiga dosis suspensi jus buah belimbing manis), dan kontrol positif (Na.diklofenak).

Pada hari pengujian, masing-masing hewan ditimbang dan diberi tanda pada kaki kirinya, kemudian kaki kiri tikus dimasukkan ke dalam sel yang berisi larutan reservoir yang telah disiapkan sebelumnya sampai cairan naik pada garis batas atas, pedal kemudian ditahan, dicatat angka pada monitor sebagai volume awal (Vo) yaitu volume kaki sebelum diberi suspensi secara oral sesuai dengan kelompoknya. Satu jam kemudian, kepada masing-masing telapak kaki tikus

disuntik secara intraplantar dengan 0,05 ml larutan λ-karagenan 1%. Setelah 30 menit, dilakukan pengukuran dengan cara mencelupkan kaki tikus ke dalam sel pletismometer yang berisi cairan khusus sampai larutan mencapai garis batas atas, dan pedal ditahan. Dicatat angka pada monitor. Perubahan volume cairan yang terjadi dicatat sebagai volume telapak kaki tikus (Vt). Pengukuran dilakukan setiap 30 menit selama 360 menit.Dan tiap kali pengukuran larutan sel tetap dicukupkan sampai garis tanda atau garis merah bagian atas sel dan pada menu utama ditekan tombol 0, juga kaki tikus dikeringkan sebelumnya.

Volume radang adalah selisih volume telapak kaki tikus setelah dan sebelum disuntikkan karagenan. Pada waktu pengukuran, volume cairan khusus

3.12 Perhitungan Persen Radang

Persen radang dapat dihitung dengan rumus di bawah ini :

Keterangan:

Vt = Volume kaki tikus pada waktu t Vo = Volume awal kaki tikus

Persen inhibisi radang dapat dihitung dengan rumus di bawah ini :

Keterangan:

a = Persen radang rata-rata kelompok kontrol

b = Persen radang rata-rata kelompok perlakuan yang mendapat bahan uji atau obat pembanding

3.13 Analisis Data

Data hasil penelitian dianalisis secara statistik menggunakan metode ANOVA dengan program SPSS versi 18 dengan tingkat kepercayaan 95% dan dilanjutkan dengan uji Post Hoc Tukey untuk mengetahui perbedaan nyata antar perlakuan.

Persen radang (%R) =Vt - V0

Vo ×100%

Persen inhibisi radang (%IR) =a - b

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan

Hasil identifikasi buah dilakukan di Herbarium Bogoriense, Bidang Botani, Pusat Penelitian Biologi-LIPI, menyebutkan bahwa tumbuhan yang digunakan adalah buah belimbing manis (Averrhoa carambola L.).Hasil identifikasi tumbuhan dapat dilihat pada Lampiran 1 halaman 45.

4.2 Hasil Karakterisasi Buah dan Serbuk Simplisia 4.2.1 Pemeriksaan makroskopik

Hasil pemeriksaan makroskopik dari buah yaitu buah belimbing manis berwarna kuning kehijauan, lonjong tidak rata, panjang 4-15 cm. Hasil pengamatan makroskopik buah dapat dilihat pada Lampiran 4 halaman 47.

4.2.2 Pemeriksaan mikroskopik

Hasil pemeriksaan mikroskopik dari serbuk simplisia buah belimbing manis diperoleh berkas pengangkut, parenkim, endosperm berisi butir pati, kristal kalsium oksalat bentuk druse, epidermis, serabut, sel batu.Hasil pengamatan mikroskopik serbuk simplisia dapat dilihat pada Lampiran 5 halaman 48.

4.2.3 Pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia

Tabel 4.1 Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia

No Parameter Hasil (%)

1 Kadar air 7,88

2 Kadar sari larut dalam air 21,71

3 Kadar sari larut dalam etanol 12,91

4 Kadar abu total 3,68

5 Kadar abu tidak larut dalam asam 0,13

Hasil penetapan kadar air serbuk simplisia buah belimbing manis diperoleh 7,88%, hal ini sesuai dengan standarisasi kadar air simplisia secara umum dengan syarat yaitu tidak lebih dari 10%. Jika kadar air lebih dari 10% dapat terjadi proses pertumbuhan mikroba dan jamur. Penetapan kadar sari larut air untuk mengetahui banyaknya senyawa yang dapat larut dalam air (bersifat polar) yang terkandung pada simplisia, syaratnya yaitu tidak kurang dari 22% Penetapan kadar sari larut etanol untuk mengetahui kandungan senyawa kimia yang larut dalam etanol (bersifat polar atau non polar), syaratnya yaitu tidak kurang dari 5%. Senyawa-senyawa yang dapat larut dalam etanol adalah glikosida, antrakinon, steroid terikat, klorofil, dan dalam jumlah sedikit yang larut yaitu lemak dan saponin (Depkes RI, 1986). Penetapankadar abu total untuk mengetahui kadar senyawaanorganik yang terdapat pada simplisia, syaratnya yaitu tidak lebih dari 7,5%. Penetapan kadar abu tidak larut asam untuk mengetahui kadar senyawa anorganik yang tidak larut dalam asam, syaratnya yaitu tidak lebih dari 4% (Depkes RI, 1995).

4.3 Hasil Skrining Fitokimia

Skrining fitokimia serbuk simplisia buah belimbing manis dilakukan untuk mendapatkan informasi golongan senyawa metabolit sekunder yang terdapat

didalamnya. Adapun pemeriksaan yang dilakukan terhadap simplisia buah belimbing manis adalah pemeriksaan golongan senyawa alkaloid, flavonoid, glikosida, saponin, tanin, dan triterpenoid/steroid.

Hasil pemeriksaan skrining fitokimia serbuk simplisia dapat dilihat pada Tabel 4.2.

Tabel 4.2 Hasil skrining fitokimia serbuk simplisia

No Skrining Hasil

1 Alkaloid +

2 Flavonoid +

3 Glikosida -

4 Saponin +

5 Tanin -

6 Triterpenoid/Steroid -

Keterangan : (+) positif = mengandung golongan senyawa (-) negatif = tidak mengandung golongan senyawa

Berdasarkan hasil skrining fitokimia dapat dilihat, golongan senyawa metabolit sekunder yang terdapat di dalam simplisia buah belimbing manis adalah alkaloid, flavonoid, saponin.

4.4 Hasil Analisa Persen Radang Kaki Tikus

Hasil perubahan volume udem kaki tikus yang diperoleh lalu dihitung persen radang pada kaki tikus.Selanjutnya dibuat grafik perubahan persen radang rata-rata kaki tikus.Hasil perhitungan persen radang rata-rata kaki tikus dapat di lihat pada Tabel 4.3.

Tabel 4.3 Hasil persenradang rata-rata kaki tikus Kelompokpe

rcobaan

Persenradang kaki tikus ± SD padamenitke-

30 60 90 120 150 180 210 240 270 300 330 360

Natrium CMC 0,5% 51,25 ± 1,8 64,72 ± 2,8 73,30 ± 1,7

78,21 ± 3,9 84,28 ± 5,3 86,26 ± 4,5 88,61 ± 5,2 89,25 ± 4,9 86,94 ± 4,2 84,10 ± 4,8 80,36 ± 5,1 76,58 ± 5,6 JBBM 125 mg 48,47 ± 2,0 52,86 ± 3,3 57,82 ± 3,5 68,88 ± 2,3 77,33 ± 3,4 78,14 ± 3,0 81,19 ± 3,4 77,84 ± 3,6 73,66 ± 4,0 71,03 ± 3,1 68,64 ± 3,6 64,81 ± 3,3 JBBM 250 mg 33.25 ± 0,5 38,97 ± 2,8 44,75 ± 3,2 49,62 ± 3,1 51,67 ± 3,3 54,23 ± 1,9 56,17 ± 1,1 53,80 ± 1,4 50,53 ± 3,9 47,84 ± 4,1 45,54 ± 4,1 43,80 ± 4,3 JBBM 500 mg 28,07 ± 0,8 31,88 ± 0,8 35,33 ± 0,6 41,80 ± 0,8 44,83 ± 0,5 46,46 ± 1,0 43,37 ± 1,0 40,89 ± 1,2 36,00 ± 1,0 33,39 ± 0,7 29,16 ± 0,6 27,22 ± 0,5 Natriumdikl ofenak 4,5 mg 25,58 ± 0,4 28,49 ± 1,7 31,56 ± 2,0 38,22 ± 0,6 41,30 ± 0,4 44,25 ± 0,5 37,92 ± 0,9 34,49 ± 1,2 32,27 ± 0,5 29,44 ± 0,2 26,49± ± 0,7 24,68 ± 1,1 34

Berdasarkan hasil perhitungan persen radang rata-rata kaki tikus menunjukkan kelompok percobaan yang diberi suspensi natrium karboksi metil selulosa 0,5%, suspensi JBBM dosis 125, 250, 500 mg/kg bb, dan suspensi natrium diklofenak dosis 4,5 mg pada menit ke-30 hingga menit ke-210 mengalami peningkatan persen radang. Pada menit ke-210 yang memiliki persen radang terbesar yaitu kelompok percobaan yang diberi suspensi natrium karboksi metil selulosa 0,5% (88,61%) dan yang memiliki persen radang terkecil yaitu kelompok percobaan yang diberi natrium diklofenak dosis 4,5 mg (44,25%).

Pada menit ke-240 hingga menit ke-360 semua kelompok percobaan mengalami penurunan persen radang.Untuk melihat hasil persen radang rata-rata kaki tikus dengan lebih jelas maka dibuat ke dalam bentuk grafik.Grafik hasil pengukuran persen radang rata-rata dapat dilihat pada Gambar 4.4.

Gambar 4.4Persen radang rata-rata telapak kaki kiri tikus tiap waktupengamatan

Gambar 4.4 Persenradang rata-rata telapak kaki kiri tikus tiap waktupengamatan Apabila volume radang besar, maka persen radangnya pun besar. Pada Gambar 4.4 dapat dilihat bahwa semua kelompok dosis memiliki persen radang rata-rata yang lebih kecil dari kelompok Na.CMC dari menit ke-30 sampai menit ke-360. Pada menit ke-30 hingga menit ke-180 JBBM 500 mg/kg bb dan natrium diklofenak memiliki persen radang rata-rata yang sama. Menit ke-210 JBBM 125 mg/kg bb dan JBBM 250 mg/kg bb sama-sama mengalami peningkatan persen radang, namun masih lebih besar dari JBBM 500 mg/kg bb dan natrium diklofenak. Pada menit ke-240 hingga menit ke-360 semua kelompok sudah mengalamai penurunan persen radang.

0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100

30 60 90 120 150 180 210 240 270 300 330 360

R ad an g kak i ti kus ( % ) Waktu (menit)

Na.CMC 0,5% JBBM 125 mg

JBBM 250 mg JBBM 500 mg

4.5 Hasil Analisa Persen Inhibisi Radang Kaki Tikus

Efek antiinflamasi dapat dilihat dari besarnya persen inhibisi radang rata-rata tiap waktu pengamatan.Hasil perhitungan persen inhibisi radang rata-rata kaki tikus dapat dilihat pada Tabel 4.4.

Tabel 4.4Hasilpersen inhibisiradang rata-rata kaki tikus Waktu

(menit ke-)

JBBM 125 mg

JBBM 250 mg

JBBM 500 mg

Na.Diklofenak 4,5 mg

30 5,42 35,12 45,22 50,08

60 18,32 39,78 50,74 55,97

90 21,11 38,94 51,80 56,94

120 11,92 36,55 46,55 51,13

150 8,24 38,69 46,80 50,99

180 9,41 37,13 46,13 48,70

210 8,37 36,60 51,05 57,20

240 12,78 39,71 54,18 61,35

270 15,27 41,87 58,59 62,88

300 15,54 43,11 60,29 64,99

330 14,58 43,33 63,71 67,03

360 15,36 42,80 64,45 67,77

bb (15,36%).Untuk melihat hasil persen inhibisi radang rata-rata kaki tikus dengan lebih jelas maka dibuat ke dalam bentuk grafik.Grafik hasil pengukuran persen radang rata-rata dapat dilihat pada Gambar 4.5.

Gambar 4.5 Persen inhibisi radang rata-rata telapak kaki kiri tikus tiap waktupengamatan.

Uji beda rata-rata Tukey digunakan untuk melihat kelompok perlakuan mana yang memiliki efek yang sama atau berbeda dan efek terkecil hingga efek terbesar antara yang satu dengan yang lainnya sehingga diperoleh susunan kelompok yang berbeda dilakukan dengan uji Tukey, uji beda rata-rata >0,05 menunjukkan bahwa antar kelompok perlakuan tidak berbeda nyata dan

0 10 20 30 40 50 60 70 80

30 60 90 120 150 180 210 240 270 300 330 360

R ad an g inhi bi si kak i ti kus ( % ) Waktu (menit)

JBBM 125 mg JBBM 250 mg

sebaliknya bila uji beda rata-rata <0,05 menunjukkan berbeda nyata terhadap semua perlakuan.

Dalam penelitian ini dilakukan uji Tukey kelompok bahan uji (JBBM 125 mg/kg bb, 250 mg/kg bb, 500 mg/kg bb) terhadap kelompok kontrol positif (natrium diklofenak 4,5 mg) dan terhadap kelompok kontrol negatif (natrium karboksi metil selulosa 0,5%).

Uji Tukey pada menit ke-30 menunjukkan suspensi natrium diklofenak memiliki perbedaan yang signifikan dengan JBBM 500 mg/kg bb, 250 mg/kg bb, 125 mg/kg bb, dan natrium karboksi metil selulosa 0,5%.JBBM 500 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan 250 mg/kg bb.JBBM 250 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan 125 mg/kg bb. JBBM 125 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan natrium karboksi metil selulosa 0,5%.

Uji Tukey pada menit ke-60-360 menunjukkan suspensi natrium diklofenak memiliki perbedaan yang tidak signifikan dengan JBBM 500 mg/kg bb, tetapi memiliki perbedaan yang signifikan denganJBBM 250 mg/kg bb, 125 mg/kg bb, dan natrium karboksi metil selulosa 0,5%. JBBM 500 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan JBBM 250 mg/kg bb, 125 mg/kg bb. JBBM 250 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan JBBM 125 mg/kg bb dan natrium karboksi metil selulosa 0,5%. JBBM 125 mg/kg bb memiliki perbedaan yang signifikan dengan natrium karboksi metil selulosa 0,5%.

dosis lainnya baik dilihat dari nilai persen radang dan persen inhibisi radang antara individu maupun secara kelompok.

Dari hasil pengukuran yang dilakukan diketahui bahwa jus buah belimbing

manis mampu menghambat pembentukan radang yang diakibatkan oleh λ -karagenan. Hal ini disebabkan jus buah belimbing manis mengandung senyawa golongan flavonoid, alkaloid, dan saponin dengan kandungan utamanya adalah flavonoid (Sukadana, 2009).

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan dapat disimpulkan:

a. Jus buah belimbing manis (JBBM) (Averrhoa carambola L.) memiliki efek sebagaiantiinflamasi pada telapak kaki tikus yang diinduksi dengan karagenan 1% secara intraplantar.

b. Jus buah belimbing manis (JBBM) dosis 500 mg/kg BBdengan natrium diklofenak 4,5 mg/kg bb pada tingkat kepercayaan 95%, hasil uji statistik Tukey menunjukkan bahwa tidak terdapat perbedaan yang signifikan.JBBM dosis 500 mg/kg bbmemiliki efek inhibisi radang rata-rata yang paling besar dibandingkan JBBM dosis 250 mg/kg bb dan dosis 125 mg/kg bb.

5.2 Saran

a. Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk mengukur sel-sel misalnya leukosit, basofil, neutrofil.

b. Disarankan kepada peneliti selanjutnya untuk menguji toksisitas dari jus buah belimbing manis (Averrhoa carambola L.).

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Tumbuhan

Belimbing manis merupakan tanaman berbentuk pohon, tinggi mencapai 12 m. Percabangan banyak yang arahnya agak mendatar sehingga pohon ini tampak menjadi rindang. Berbunga sepanjang tahun sehingga buahnya tak kenal musim.Daun belimbing manis berupa daun majemuk menyirip ganjil dengan anak daun berbentuk bulat telur, ujung runcing, tepi rata, permukaan atas mengilap, permukaan bawah buram, panjang 1-9 cm, dan lebar 1-4 mm. Bunga majemuk tersusun dengan baik, warnanya merah keunguan, keluar dari ujung cabang, ada juga yang keluar dari dahannya. Buahnya merupakan buah buni, berusuk lima, bila dipotong melintang berbentuk bintang. Panjang buah 4-14 cm, berdaging, dan banyak mengandung air, saat masak warnanya kuning. Rasanya manis sampai asam. Biji berwarna putih kotor kecoklatan, pipih, berbentuk elips dengan kedua ujung lancip.Buah dan daun mengandung kristal asam oksalat sehingga rasanya asam. Air perasan belimbing dapat dipakai untuk menghilangkan karat pada logam (Wijayakusuma dan Dalimartha, 2000).

2.1.1 Nama daerah

Nama daerah, Sumatera: asom jorbing (Batak), balimbing manis (Minangkabau), belimbing manis (Melayu); Jawa: balimbing amis (Sunda), blimbing legi (Jawa Tengah), bhalingbhing manis (Madura); Sulawesi: lembetua (Gorontalo), lombituka gula (Buol), takule (Baree), bainang sulapa (Makasar),

balireng (Bugis); Maluku: baknil kasluir (Kai), totofuko (Ternate), tofuo (Tidore), balibi totofuko (Halmahera) (Depkes RI, 2001).

2.1.2 Sistematika tumbuhan

Sistematika tumbuhan buah belimbing manis adalah sebagai berikut: Kingdom : Plantae

Divisi : Spermatophyta Sub divisi : Angiospermae Class : Dicotyledonae Ordo : Geraniales Famili : Oxalidaceae Genus : Averrhoa

Spesies : Averrhoa carambola L. (Depkes RI, 2001).

2.1.3 Kandungan kimia

Buah belimbing manis mengandung alkaloida, saponin dan flavonoida (Depkes RI, 2001).

2.1.4 Khasiat tumbuhan

Buah belimbingmanis (Averrhoa carambola L.) berkhasiat sebagai obat batuk, encok, sariawan, hipertensi, diabetes melitus,demam, dan menghilangkan jerawat (Arisandi dan Andriani, 2006). Daunnya berkhasiat sebagai obat sakit kepala(Depkes RI, 2001).

kalau antioksidan dalam buah paling baik manfaatnya bila diolah menjadi jus, mengkonsumsinya membantu proses pencernaan tubuh dengan mempercepat penyerapan nutrisi kualitas tinggi yang terkandung di dalam jus (Ramadhani, 2014).

Jus merupakan minuman sari buah yang diperoleh dari proses pemerasan mesin juicer sehingga akan diperoleh cairan sari buah. Jus buah mengandung sumbervitamin, sumber mineral, seperti kalsium, magnesium, fosfor, dan besi.Walaupun diperlukan dalam jumlah kecil, mineral ini bermanfaat untuk menjaga kesehatan tubuh (Zettira, 2010).

2.3 Inflamasi

Inflamasi berasal dari bahasa latin inflammare, yang berarti "membakar", merupakan suatu respon protektif normal terhadap luka jaringan yang disebabkan oleh trauma fisik, zat kimia yang merusak, atau zat-zat mikrobiologik. Inflamasi adalah usaha tubuh untuk menginaktivasi atau merusak organisme yang menyerang, menghilangkan zat iritan, dan mengatur derajat perbaikan jaringan (Mycek, 2001).

Inflamasi secara umum dibagi menjadi 3 fase, yakni: inflamasi akut, respon imun, dan inflamasi kronis. Inflamasi akut merupakan respon awal terhadap cedera jaringan, hal tersebut terjadi melalui media rilisnya autacoid serta pada umumnya didahului oleh pembentukan respon imun (Katzung, 2002).Fase ini melibatkan sistem vaskuler lokal, sistem imun, dan beberapa sel (Nugroho, 2012).Respon imun terjadi bila sejumlah sel yang mampu menimbulkan kekebalan diaktifkan untuk merespon organisme asing atau substansi antigenik

yang terlepas selama respon terhadap inflamasi akut serta kronis.Inflamasi kronis menyebabkan keluarnya sejumlah mediator yang tidak menonjol dalam respon akut (Katzung, 2002).Fase ini melibatkan peran sel dasar putih terutama sel mononuclear (monosit, makrofag dan limfosit), dan peran dari fibroblast. Fibrolast merupakan sel utama pada jaringan pengikat, yang merupakan sel yang mensintesis matrik ekstraseluler dan kolagen, berperan dalam proses penyembuhan luka sel/jaringan (Nugroho, 2012).

2.3.1 Tanda-tanda inflamasi

Inflamasi ditandai oleh adanya vasodilatasi pembuluh darah lokal yang mengakibatkan terjadinya aliran darah setempat yang berlebihan, peningkatan permeabilitas kapiler.Inflamasi menyebabkan pembekuan cairan di dalam ruang interstisial yang disebabkan oleh fibrinogen dan protein lainnya yang bocor dari kapiler dalam jumlah yang besar.Inflamasi juga menyebabkan migrasi sejumlah besar granulosit dan monosit ke dalam jaringan, pembengkakan sel jaringan (Guyton dan Hall, 1997).

Tanda klasik umum yang terjadi pada proses inflamasi yaitu rubor (kemerahan), tumor (pembengkakan), kalor (panas setempat yang berlebihan), dolor (rasa nyeri), dan functiolaesa (gangguan fungsi/kehilangan fungsi jaringan yang terkena).

a. Rubor (kemerahan), terjadi karena jaringan yang meradang mengandung banyak darah akibat kapiler-kapilernya melebar dan kapiler-kapiler yang

b. Kalor (panas), merupakan sifat peradangan yang terjadi pada permukaan tubuh. Terjadi akibat sirkulasi darah yang meningkat. Naiknya suhu ini tidak melebihi suhu rektum sehingga diambil kesimpulan bahwa peningkatan metabolisme tidak terlalu menyebabkan kenaikan suhu (Himawan, 1994).

c. Tumor (pembengkakan), disebabkan karena adanya suplai cairan sel darah merah maupun sel darah putih dari sirkulasi darah menuju jaringan interstisal. Kumpulan cairan beserta sel-sel tersebut dalam jaringan luka dinamakan eksudat (Nugroho, 2012).

d. Dolor (sakit atau nyeri), ditimbulkan karena adanya kerusakan jaringan yang melepaskan mediator nyeri. Mediator tersebut antara lain ion hidrogen, histamin, serotonin, asetilkolin dan bradikinin. Oleh karena itu, nyeri merupakan "sinyal" bahwa tubuh mengalami kerusakan jaringan (Nugroho, 2012). Rasa nyeri juga disebabkan oleh tekanan yang meninggi dalam jaringan akibat terjadinya eksudat (Himawan, 1994).

e. Fungsio laesa (perubahan fungsi), merupakan dampak reaksi peradangan yang berupa perubahan fungsi lokal yang abnormal (Nugroho, 2012). Pada daerah yang bengkak dan sakit disertai adanya sirkulasi yang abnormal akibat penumpukan dan aliran darah yang meningkat juga menghasilkan lingkungan lokal yang abnormal sehingga jaringan yang terinflamasi tersebut tidak berfungsi secara normal (Price dan Wilson, 2005).

2.3.2 Mekanisme terjadinya inflamasi

Salah satu faktor penyebab terjadinya inflamasi adalah produk yang dihasilkan dari metabolisme asam arakhidonat.Asam arakhidonat merupakan suatu asam lemak tak jenuh ganda dengan 20 atom karbon.Asam arakhidonat

dilepaskan oleh fosfolipid melalui fosfolipase sel yang telah diaktifkan oleh rangsang mekanik, kimiawi, atau fisik. Proses metabolisme asam arakhidonat terjadi melalui dua jalur utama, yaitu siklooksigenase dengan menyintesis prostaglandin juga tromboksan dan lipooksigenase yang menyintesis leukotrien dan lipoksin.

Jalur utama metabolisme asam arakhidonat, yaitu:

a. Jalur siklooksigenase, produk yang dihasilkan oleh jalur ini adalah prostaglandin E2 (PGE2), PGD2, prostasiklin (PGI2), dan tromboksan A2 (TXA2). TXA2 adalah pengagregasi trombosit dan vasokonstriktor, merupakan produk utama prostaglandin dalam trombosit. PGI2 adalah suatu vasodilator dan inhibitor agregasi trombosit. PGD2 merupakan metabolit utama jalur siklooksigenase dalam sel mast, bersama dengan PGE2 menyebabkan vasodilatasi dan meningkatkan pembentukan edema. Prostaglandin juga berperan dalam patogenesis nyeri dan demam pada 15 inflamasi, PGE2 membantu menigkatkan sensitivitas nyeri terhadap berbagai rangsang dan berinteraksi dengan sitokin yang menyebabkan demam.

b. Jalur lipoksigenase, merupakan enzim yang memetabolisme asam arakhidonat yang menonjol dalam neutrofil. Enzim ini menghasilkan leukotrien. Leukotrien pertama yang dihasilkan disebut leukotrien A4 (LTA4) yang selanjutnya akan menjadi LTB4 melalui hidrolisis

Kemudian lipoksin A4 (LXA4) yang menyebabkan vasodilatasi dan menghambat kemotaksis neutrofil (Robbins, dkk., 2007).

Mekanisme terjadinya inflamasi dapat dilihat pada Gambar 2.1. Fosfolipid membran sel

- --X--Steroidmenghambat Lipoksigenase

HETEHPETE ASAM ARAKHIDONAT

---X-- Inhibitor COX-1 dan COX-2, aspirin, indometasin menghambat 5-HETE 5-HPETE Prostaglandin G2 (PGG2)

Prostaglandin H2 (PGH2)

Leukotrien B4 Leukotrien A4 (LTA4)

Prostasiklin Tromboksan A2 Leukotrien C4 (LTC4) PGI2 TXA2

Leukotrien D4 (LTD4)

Leukotrien E4 (LTE4)

Lipoksin A4Lipoksin B4

PGD2PGE2PGF2

Gambar 2.1 Mekanisme terjadinya inflamasi (Robbins, dkk., 2007). Fosfolipase

5-Lipoksigenase Siklooksigenase

Menyebabkan vasodilatasi, menghambat agregasi platelet Menyebabkan vasokonstriksi, menghambat agregasi platelet Vasodilatasi Meningkatkan terjadinya edema 12-Lipoksigenase Kemotaksis Vasokontriksi Bronkospasme Peningkatan Permeabilitas Vasodilatasi

Menghambat kemotaksis neutrofil Merangsang adhesi monosit

2.4 Obat Antiinflamasi

Obat antiinflamasi adalah golongan obat yang memiliki aktivitas menekan atau mengurangi peradangan. Berdasarkan mekanisme kerjanya obat antiinflamasi terbagi menjadi dua golongan.Golongan pertama adalah golongan obat antiinflamasi steroid, obat antiinflamasi yang kedua yaitu golongan obat antiinflamasi nonsteroid (AINS).

2.4.1 Obat antiinflamasi golongan steroida

Obat antiinflamasi golongan steroida bekerja menghambat sintesis prostaglandin dengan cara menghambat enzim fosfolipase, sehingga fosfolipid yang berada pada membran sel tidak dapat diubah menjadi asam arakidonat. Akibatnya prostaglandin tidak akan terbentuk dan efek inflamasi tidak ada. Contoh obat antiinflamasi steroid adalah deksametason, betametason dan hidrokortison (Tan dan Rahardja, 2007).

2.4.2 Obat antiinflamasi golongan non steroida

Obat-obat antiinflamasi nonsteroid merupakan suatu grup obat yang secara kimiawi tidak sama dan berbeda aktivitas antiinflamasinya. Obat-obat inibekerja dengan jalan menghambat enzim siklooksigenase tetapi tidak menghambat enzim lipooksigenase (Mycek, 2001).Walaupun demikian obat-obat ini memiliki banyak persamaan dalam efek terapi maupun efek samping (Wilmana, 1995).

Semua obat antiinflamasi nonsteroid mempunyai efek klinis yaitu dengan menghambat sintesis prostaglandin.Prostaglandin menyebabkan terjadinya

prostaglandin(Stringer, 2001). Secara kimiawi, penggolongan obat antiinflamasi nonsteroida ini dibagi dalam beberapa kelompok, yaitu (Tan dan Rahardja, 2007):

a. Salisilat : asetosal, benorilat dan diflunisal

b. Asetat : natrium diklofenak, indometasin dan sulindac c. Propionat : ibuprofen, ketoprofen, flurbiprofen, naproksen dan

tiapprofenat

d. Oxicam : piroxicam, tenoxicam dan meloxicam e. Pirazolon : oksifenilbutazon dan azapropazon

f. Lainnya : mefenaminat, nabumeton dan azapropazon

2.4.3 Natrium diklofenak

Rumus bangun natrium diklofenak dapat dilihat pada Gambar 2.2.

Gambar 2.2Rumus bangun natrium diklofenak (British Pharmacopoeia, 2009). Rumus molekul : C14H10C12NNaO2

Nama kimia : asam benzeneasetat, 2-[(2,6-diklorofenil)amino] monosodium

Berat molekul : 318,13

Kelarutan : sedikit larut dalam air, mudah larut dalam metanol, larut dalam etanol (96 persen), dan sedikit larut dalam aseton (British Pharmacopoeia, 2009).

Natrium diklofenak adalah derivat sederhana dari asam fenilasetat yang relatif tidak selektif sebagai penghambat siklooksigenase dan merupakan salah satu obat antiinflamasi nonsteroid yang biasa dijadikan pembanding dalam uji antiinflamasi.Obat ini memiliki waktu paruh singkat yaitu 1-3 jam.Efek samping yang lazim dari obat ini ialah mual, gastritis, eritema kulit dan sakit kepala.Pemakaian obat ini harus hati-hati terhadap pasien tukak lambung.Pemakaian selama kehamilan tidak dianjurkan (Wilmana, 1995).

2.5 Karagenan

Iritan yang digunakan untuk pengujian efek inflamasi beragam jenisnya, salah satunya adalah karagenan. Karagenan merupakan suatupolisakarida hasil ekstrak rumput laut dari genus Chondrusdan Gigartina. Bentuknya berupa serbuk berwarna putih hingga kuning kecoklatan, ada yang berbentuk butiran kasar hingga serbuk halus, tidak berbau, serta memberi rasa berlendir di lidah (Rowe,dkk., 2009).

Karagenan terbagi atas tiga tipe, yaitu kappa karagenan, iota karagenan dan lambda karagenan. Karagenan diberi nama berdasarkan persentase kandungan ester sulfatnya,yaitu kappa karagenan mengandung 25-30%, iota karagenan

28-Karagenan berperan dalam pembentukan udem pada model inflamasi akut. Karagenan dipilih karena dapat melepaskan mediator inflamasi, yaitu prostaglandin setelah disuntikkan ke hewan uji. Oleh karena itu, karagenan dapat digunakan sebagai iritan dalam metode uji yang bertujuan untuk mencari obat-obat antiinflamasi, tepatnya yang bekerja dengan menghambat sintesis prostaglandin (Winter, dkk., 1962). Penggunaan karagenan sebagai penginduksi radang memiliki beberapa keuntungan antara lain: tidak meninggalkan bekas, tidak menimbulkan kerusakan jaringan, dan memberikan respon yang lebih peka terhadap obat antiinflamasi dibanding senyawa iritan lainnya (Lumbanraja,2009).

2.6 Metode Uji Efek Antiinflamasi

Beberapa metode yang dapat dipakai untuk mengukur uji efek antiinflamasi (Suralkar, 2008) adalah:

a. Induksi karagenan

Induksi udem dilakukan pada kaki hewan uji. Dalam hal ini disuntikkan suspensi karagenan secara subplantar. Obat uji diberikan secara oral. Volume udem kaki diukur dengan alat pletismometer. Aktivitas antiinflamasi obat uji ditunjukkan oleh kemampuan obat uji mengurangi udem yang diinduksi pada telapak kaki hewan uji.

b. Induksi histamin

Metode yang digunakan hampir sama dengan metode induksi karagenan, hanya saja penginduksi yang digunakan adalah larutan histamin 1%.

c. Induksi asam asetat

Metode ini bertujuan untuk mengevaluasi aktivitas inhibisi obat terhadap peningkatan permeabilitas vaskular yang dinduksi oleh asam asetat secara intraperitoneal. Sejumlah pewarna (Evan’s Blue 10%) disuntikkan secara intravena. Aktivitas inhibisi obat uji terhadap peningkatan permeabilitas vaskular ditunjukkan dengan kemampuan obat uji dalam mengurangi konsentrasi pewarna yang menempel dalam ruang abdomen yang disuntikkan sesaat setelah induksi asam asetat.

d. Induksi xylene pada udem daun telinga

Hewan uji diberikan obat, kemudian diinduksi xylene dengan mikropipet pada kedua permukaan daun telinga kanannya. Telinga kiri digunakan sebagai kontrol. Terdapat dua parameter yang diukur dalam metode ini, yaitu ketebalan dan bobot dari daun telinga hewan uji. Ketebalan daun telinga hewan uji yang telah diinduksi diukur dengan menggunakan jangka sorong digital, lalu dibandingkan dengan telinga kiri. Jika menggunakan parameter bobot daun telinga, maka daun telinga hewan uji dipotong dan ditimbang. Kemudian dibandingkan beratnya dengan telinga kiri.

e. Induksi asam arakhidonat pada udem daun telinga

Metode yang digunakan hampir sama dengan metode xylene, hanya saja penginduksi yang digunakan adalah asam arakhidonat yang diberikan secara topikal pada kedua permukaan daun telinga

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Penelitian dan pengembangan tumbuhan obat baik di dalam maupun di luar negeri berkembang dengan pesat, terutama dalam bidang khasiat obat maupun analisis zat kimia berdasarkan indikasi tumbuhan obat yang telah digunakan oleh sebagian masyarakat dengan khasiat yang teruji secara empiris. Hasil penelitian tersebut, tentunya lebih memantapkan para pengguna tumbuhan obat akan khasiat maupun kegunaannya (Wijayakusuma dan Dalimartha, 2000).

Masyarakat Indonesia termasuk salah satu masyarakat dunia yang mengenal dan memakai obat tradisional sebagai upaya penanggulangan masalah kesehatan.Obat tradisional terdiri dari ramuan bahan yang berasal dari tumbuhan, hewan, mineral dan sediaan sarian (galenik) atau campuran dari bahan tersebut (Ditjen POM RI, 2000).Pengetahuan tentang tanaman berkhasiat sebagai obat merupakan warisan budaya bangsa berdasarkan pengalaman secara turun temurun (Muhlisah, 1999).

Salah satu tumbuhan yang berkhasiat sebagai obat adalah buah belimbing manis (Averrhoa carambola L.). Belimbing manis merupakan tumbuhan yang berasal dari daerah tropis. Ciri buah belimbing manis berwarna kuning kehijauan ketika masih muda dan berwarna kuning kemerahan kalau sudah tua, berbiji kecil berwarna coklat, rasanya manis dengan sedikit asam dan banyak mengandung air (Shadine, 2010).

Menurut Sukadana (2009), buah belimbing manis dapat berkhasiat sebagai antiinflamasi, analgesik dan diuretik, digunakan untuk obat batuk, sariawan, demam, kencing manis, kolesterol tinggi dan sakit tenggorokan. Belimbing manis mengandung senyawa golongan flavonoid, alkaloid, dan saponin dengan kemungkinan kandungan utamanya adalah flavonoid (Sukadana, 2009).Flavonoid berfungsi sebagai antiinflamasi dengan cara menghambat enzim siklooksigenase dan lipooksigenase dapat memberi harapan untuk pengobatan gejala peradangan dan alergi (Robinson, 1995).Inflamasi merupakan respon terhadap kerusakan jaringan akibat berbagai rangsangan yang merugikan, baik rangsangan kimia maupun mekanis (Sa’roni dan Dzulkarnain, 1989).

Salah satu obat yang dapat digunakan untuk antiinflamasi adalah natrium diklofenak, yang dapat menimbulkan efek samping apabila dikonsumsi dalam jangka panjang. Penggunaan obat ini dapat meningkatkan insiden terjadinya perdarahan dan perforasi pada saluran bagian atas (Christianie, dkk., 2008).Oleh karena itu, pada penelitian ini akan dilakukan uji efek antiinflamasi jus buah belimbing manis terhadap tikus jantan yang diinduksi dengan karagenan sebagai alternatif obat antiinflamasi.

1.2 Perumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang, maka perumusan masalah pada penelitian ini adalah:

b. apakah jus buah belimbing manis memiliki efek antiinflamasi yang setara dengan natrium diklofenak ?

1.3 Hipotesis

Berdasarkan perumusan masalah, maka hipotesisnya adalah:

a. jus buah belimbing manis memiliki efek sebagai antiinflamasi pada telapak kaki tikus yang diinduksi karagenan.

b. jus buah belimbing manis memiliki efek antiinflamasi yang setara dengan natrium diklofenak.

1.4 Tujuan Penelitian

Tujuan penelitian ini adalah:

a. untuk mengetahui efek antiinflamasi jus buah belimbing manis pada tikus yang diinduksi karagenan.

b. untuk mengetahui efek antiinflamasi yang setara dengan natrium diklofenak.

1.5 Manfaat Penelitian

Hasil penelitian diharapkan dapat memberikan informasi tentang buah belimbing manis yang berkhasiat sebagai antiinflamasi.

1.6 Kerangka Pikir Penelitian

Kerangka pikir penelitian ini adalah sebagai berikut:

Variabel Bebas Variabel Terikat Parameter

Buah Belimbing Manis (BBM)

Karakterisasi

- Makroskopik - Mikroskopik - Kadar air - Kadar abu total - Kadar abu tidak larut dalamasam - Kadar sari larut dalam air

- Kadar sari larut dalam etanol Skrining

Fitokimia

- Alkaloid - Flavonoid - Glikosida - Saponin

- Steroida/Triterpenoid - Tanin

Volume kaki tikus

Persen radang (udem)

Persen Inhibisi Radang Serbuk

simplisia BBM

UJI EFEK ANTIINFLAMASI JUS BUAH BELIMBING MANIS

(Averrhoa carambola L.) TERHADAP TIKUS JANTAN

ABSTRAK

Natrium diklofenak merupakan obat golongan antiinflamasi nonsteroid (AINS), yang dapat menimbulkan efek samping apabila dikonsumsi dalam jangka panjang. Penggunaan obat ini dapat meningkatkan insiden terjadinya perdarahan dan perforasi pada saluran bagian atas. Masyarakat Indonesia termasuk salah satu masyarakat dunia yang mengenal dan memakai obat tradisional sebagai upaya penanggulangan masalah kesehatan. Salah satu tumbuhan yang berkhasiat sebagai obat adalah buah belimbing manis (Averrhoa carambola L.). Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui jus buah belimbing manis berkhasiat sebagai antiinflamasi terhadap tikus jantan yang diinduksi λ-karagenan dan membandingkannya dengan obat natrium diklofenak.

Hasil skrining fitokimia diperoleh serbuk simplisia yang mengandung flavonoid, alkaloid, saponin. Hasil karakterisasi serbuk simplisia masing-masing diperoleh kadar air (7,88%), kadar sari larut air (21,71%), kadar sari larut etanol (12,91%), kadar abu total (3,68%) dan kadar abu yang tidak larut asam (0,13%).

Pengujian jus buah belimbing manis terhadap efek antiinflamasi dengan menggunakan alat pletismometer digital dengan prinsip pengukuran berdasarkan hukum Archimedes. Tikus diberikan jus buah belimbing manis secara oral dengan 3 dosis yaitu 125; 250, dan 500 mg/kg bb, natrium diklofenak dosis 4,5 mg sebagai kontrol positif. Setelah satu jam pemberian bahan uji, tikus diinduksi

dengan larutan λ-karagenan secara intraplantar, lalu diukur volume radang kaki tikus.

Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan menunjukkan jus buah belimbing manis dosis 125; 250, dan 500 mg/kg bb masing-masing meredakan 15,36%; 42,80%;64,45% radang kaki tikus yang diinduksi λ-karagenan, serta jus buah belimbing manis dosis 500 mg/kg bb memberikan efek antiinflamasi dengan natrium diklofenak 4,5 mg/kg bb.

Kata kunci: natrium diklofenak, buah belimbing manis (Averrhoa carambola L.),skrining fitokimia, karakterisasi

THE ASSAY ANTIINFLAMMATORY EFFECT SWEET STAR FRUIT JUICE ( Averrhoa carambola L. ) ON MALE RATS

ABSTRACT

Sodium diklofenac is a nonsteroidal antiinflammatory agents (NSAIDs), which can cause side effects when consumed in the long term. The use of these drugs may increase then incidence of bleeding and perforation of the upper gastrointestinal tract. Indonesian society of the world community who know and use traditional medicine as an effort of health problems. One of the plants that have medicinal properties is the star fruit sweet (Averrhoa carambola L.). This study aimed to know the juice of star fruit sweet nutritious as carrageenan and on male rats induced antiinflammatory drug diclofenac sodium.

Comparing results of phytochemical screening obtained powder simplicia that containing flavonoids, alkaloids, saponins. Simplicia powder characterization results obtained each water content 7.88%,water soluble extract content 21.71%, levels of sea sari ethanol 12.91%, total ash content 3.68% and the levels of acid insoluble ash 0.13%.

Testing the sweet star fruit juice to anti-inflammatory effects by using a digital pletismometer with the measurement principlesof law Archimedes. Mice given the sweet star fruit juice orally at 3 dosage is: 125; 250, and 500 mg/kg bw, a dose of 4,5 mg diclofenac sodium as a positive control. After one hour of administration of the test substances, rats inducedby intraplantar λ - carrageenan solution, and then measured the volume of the rat foot inflammation.

Based on the research that has been conducted shows the juice of star fruit sweet dose of 125 ; 250 , and 500 mg / kg bw respectively relieve 15.36 %; 42.80 %;64.45 % inflammation induced rat foot λ - carrageenan, as well as star fruit juice sweet dose of 500 mg / kg bw provide antiinflammatory effects with diclofenac sodium 4.5 mg / kg bw.

Keywords:diclofenac sodium, sweet star fruit (carambola L. Averrhoa), phytochemical screening, characterization

UJI EFEK ANTIINFLAMASI JUS BUAH BELIMBING MANIS

(

Averrhoa carambola

L.) TERHADAP TIKUS JANTAN

SKRIPSI

Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara

yaratarjana Farmasi pada Fakultas FaUnivematera Utar

OLEH:

IRA MAYA SINAGA

NIM 131524084

PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN

UJI EFEK ANTIINFLAMASI JUS BUAH BELIMBING MANIS

(

Averrhoa carambola

L.) TERHADAP TIKUS JANTAN

SKRIPSI

Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara

yaratarjana Farmasi pada Fakultas FaUnivematera Utar

OLEH:

IRA MAYA SINAGA

NIM 131524084

PENGESAHAN SKRIPSI

UJI EFEK ANTIINFLAMASI JUS BUAH BELIMBING MANIS

(

Averrhoa carambola

L.) TERHADAP TIKUS JANTAN

OLEH:

IRA MAYA SINAGA

NIM 131524084

Dipertahankan di hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas FarmasiUniversitas Sumatera Utara

Pada tanggal: November 2016

Disetujui Oleh:

Pembimbing II,

.

Panitia Penguji,

Prof. Dr. Urip Harahap, Apt. NIP 195301011983031004

Marianne, S.Si., M.Si., Apt. NIP 198005202005012006 Pembimbing I,

Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt. NIP 195103261978022001

Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt. NIP 195103261978022001 Pembimbing II,

Dr. Poppy Anjelisa Z. Hasibuan, S.Si., M.Si., Apt.NIP 197506102005012003

Yuandani, S.Farm., M.Si., Ph.D., Apt. NIP 198303202009122004

Medan, November2016 Fakultas Farmasi

Universitas Sumatera Utara Dekan,

KATA PENGANTAR

Puji dan syukur kehadirat Tuhan Yang Maha Esa, karena atas segala rahmat, kasih dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penyusunan skripsi yang berjudul “Uji Efek Antiinflamasi Jus Buah Belimbing Manis (Averrhoa carambola L.) terhadap Tikus Jantan”. Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

Pada kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Ibu Dr. Masfria, M. S., Apt., selaku dekan Fakultas Farmasi yang telah memberikan bantuan dan fasilitas selama masa perkuliahan dan penelitian, kepada Ibu Prof. Dr. Rosidah, M.Si., Apt., dan Ibu Dr. Poppy Anjelisa Z. Hasibuan, S.Si., M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah membimbing penulis dengan penuh kesabaran, tulus dan ikhlas selama penelitian dan penyusunan skripsi ini berlangsung, kepada Bapak Prof. Dr. Urip Harahap, Apt., Ibu Marianne, S.Si., M.Si., Apt. dan Ibu Yuandani, S.Farm., M.Si., Ph.D., Apt., selaku dosen penguji yang telah memberikan saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Ucapan terima kasih kepada BapakPopi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt., selaku pembimbing akademik yang telah memberikan motivasi selama mengikuti perkuliahan dan Kepada Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU yang telah mendidik selama perkuliahan hingga selesai.

saudara-saudara penulis Corry, Pitri, Felix, Winda, Miranda yang selalu setia memberikan motivasi dan dukungan baik moral, material, maupun doa. Sahabat-sahabat terbaik penulis Weldani, Yanti, Rumiris, Fryda, Fitria, Claudia, Ester, serta teman-teman Farmasi Ekstensi 2013 yang telah memberikan bantuan, dukungan dan motivasi hingga penulis menyelesaikan penelitian.

Penulis menyadari sepenuhnya bahwa skripsi ini masih belum sempurna, oleh sebab itu dengan segala kerendahan hati penulis mengharapkan kritik dan saran yang membangun pada skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya di bidang farmasi.

Medan, November 2016 Penulis,

Ira Maya Sinaga

SURAT PERNYATAAN TIDAK PLAGIAT

Saya yang bertanda tangan dibawah ini:

Nama : Ira Maya Sinaga

Nomor Induk Mahasiswa : 131524084

Program Studi : Ekstensi Sarjana Farmasi

Judul Skripsi : Uji Efek Antiinflamasi Jus Buah Belimbing Manis (Averrhoa carambola L.) terhadap Tikus Jantan

Dengan ini menyatakan bahwa skripsi ini ditulis berdasarkan data dari hasil pekerjaan yang saya lakukan sendiri, dan belum pernah diajukan oleh orang lain untuk memperoleh gelar kesarjanaan diperguruan tinggi lain, dan bukan plagiat karena kutipan yang ditulis telah disebutkan sumbernya didalam daftar pustaka.

Apabila dikemudian hari ada pengaduan dari pihak lain karena didalam skripsi ini ditemukan plagiat karena kesalahan saya sendiri, maka saya bersedia menerima sanksi apapun oleh Program Studi Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara, dan bukan menjadi tanggung jawab pembimbing.

Demikianlah surat pernyataan ini saya perbuat dengan sebenarnya untuk dapat digunakan jika diperlukan sebagaimana mestinya.

Medan, November 2016 Yang membuat pernyataan,

3.3.4 Pereaksi Molish ... 20

3.3.5Pereaksi Lieberman-Bouchard ... 20

3.3.6 Pereaksi Besi (III) Klorida 1% b/v ... 20

3.3.7 PereaksiTimbal (II) Asetat 0,4 M ... 20

3.3.8Pereaksi Natrium Hidroksida 2 N ... 20

3.3.9PereaksiAsam Klorida 2 N ... 20

3.3.10 Pereaksi Asam Sulfat 2 N ... 20

3.4 Karakteristik Simplisia... 21

3.4.1 Pemeriksaan makroskopik ... 21

3.4.2 Pemeriksaan mikroskopik ... 21

3.4.3Penetapan kadar air ... 21

3.4.4 Penetapan kadar air sari larut air ... 22

3.4.5 Penetapan kadar air sari larut etanol ... 22

3.4.6 Penetapan kadar abu total ... 23

3.4.7 Penetapan kadar abu yang tidak larut asam ... 23

3.5Skrining Fitokimia ... 23

3.5.1Pemeriksaan alkaloid ... 23

3.5.2Pemeriksaan flavonoida ... 24

3.5.3Pemeriksaan saponin ... 24

3.5.4Pemeriksaan glikosida ... 25

3.5.5Pemeriksaan tanin ... 25

3.5.6Pemeriksaan steroida/triterpenoida ... 25

3.6Pembuatan Jus Buah Belimbing Manis ... 26

3.7.1 Pembuatan suspensi CMC 0,5% ... 26

3.7.2 Pembuatan suspensi Na-diklofenak dosis 4,5 mg/kg bb 27 3.7.3 Pembuatan suspensijus buah belimbing manis dosis 125 mg/kg bb, 250 mg/kg bb, 500 mg/kg bb ... 27

3.8 Pembuatan Induktor Radang (karagenan 1%) ... 27

3.9Penyiapan Hewan Percobaan ... 27

3.10Prosedur Penggunaan Alat Pletismometer Digital ... 28

3.10.1 Larutan untuk reservoir ... 28

3.10.2 Penyiapan alat ... 28

3.10.3 Kaliberasi alat ... 28

3.11Prosedur Pengujian Efek Antiinflamasi ... 29

3.12Perhitungan Persen Radang ... 30

3.13Analisis Data ... 30

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ... 31

4.1 Hasil Identifikasi Tumbuhan... 31

4.2Hasil Karakterisasi Buah dan Serbuk Simplisia ... 31

4.2.1 Pemeriksaan makroskopik ... 31

4.2.2 Pemeriksaan mikroskopik ... 31

4.2.3 Pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia ... 31

4.3Hasil Skrining Fitokimia ... 32

4.4Hasil Analisa Persen Radang Kaki Tikus ... 33

4.5Hasil Analisa Persen Inhibisi Radang Kaki Tikus ... 37

DAFTAR PUSTAKA ... 42 LAMPIRAN ... 45

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1.1 Kerangka pikir penelitian ... 4 2.1 Mekanisme terjadinya inflamasi ... 11 2.2 Rumus bangun natrium diklofenak ... 13

4.4 Persenradang rata-ratatelapak kaki kiri tikus tiap

waktu pengamatan... 36 4.5 Persen inhibisi radang rata-rata telapak kaki kiri tikus

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

4.1 Hasil pemeriksaan karakteristik serbuk simplisia ... 32

4.2 Hasilskrining fitokimia serbuk simplisia ... 33

4.3 Hasilpersen radang rata-rata kaki tikus ... 34

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Hasil identifikasi tumbuhan ... 45

2. Komite etik penelitian hewan ... 46

3. Gambar tumbuhan buahbelimbing manis ... 47

4. Gambarbuah segardan simplisia belimbing manis ... 48

5. Gambar mikroskopik serbuk simplisia ... 49

6. Perhitungan hasil pemeriksaan karakterisasi simplisia ... 50

7. Bagan kerja penelitian ... 54

8. Gambar hewan percobaan ... 57

9. Contoh perhitungan dosis ... 58

10. Contoh perhitunganpersen radang dan persen inhibisi radang ... 59

11. Tabel konversi ... 60

12. Hasil analisis deskriptif persen radang ... 61

13. Hasil uji analisis variansi (anova) one way ... 64