27
3.7.2Pembuatan suspensi natrium diklofenak dosis 4,5 mgkg bb
Ditimbang sebanyak 4,5 mg natrium diklofenak kemudian digerus dengan penambahan suspensi CMC 0,5 sampai homogen, dimasukkan kedalam labu
tentukur 10 ml, lalu ditambahkan suspensi CMC 0,5 sampai garis tanda.
3.7.3 Pembuatan suspensi jus buah belimbing manisdosis 125 mgkg bb, 250 mgkg bb, 500 mgkg bb
Ditimbang 125 mg, 250 mg, 500 mg jus buah belimbing manis. Masing- masing digerus dengan penambahan suspensi CMC 0,5 sampai homogen,
dimasukkan kedalam labu tentukur 10 ml, dicukupkan sampai garis tanda dengan suspensi CMC 0,5.
3.8Pembuatan Induktor Radang karagenan 1
Ditimbang sebanyak 100 mg lambda karagenan, lalu dihomogenkan dengan larutan natrium klorida 0,9, kemudian dimasukkan ke dalam labu
tentukur 10 ml, lalu dicukupkan dengan larutan natrium klorida 0,9 sampai garis tanda kemudian didiamkan dan diinkubasi pada suhu 37
C selama 24 jam.
3.9 Penyiapan Hewan Percobaan
Sebanyak 25 ekortikus putih jantan galur Wistar, dibagi dalam 5 kelompok, setiap kelompok terdiri dari 5 ekor tikus. Sebelum pengujian hewan
percobaan di aklimatisasi dan harus dirawat dengan sebaik-baiknya pada kandang yang mempunyai ventilasi baik dan selalu dijaga kebersihannya.Hewan yang
sehat ditandai dengan memperlihatkan gerakan yang lincah.
Universitas Sumatera Utara
28
3.10 Prosedur Penggunaan Alat Pletismometer Digital 3.10.1 Larutan untuk reservoir :
Sebanyak 2 ml campuran senyawa pembasah Ornano Imbibente BBC.97 yang telah tersedia dalam kemasan standar. Dimasukkan ke dalam labu tentukur 1
L, ditambahkan 0,4 g NaCl kemudian dilarutkan dengan air suling lalu dimasukkan kedalam labu tentukur 1000 ml, kemudian dicukupkan dengan
menggunakan air suling sampai garis tanda.
3.10.2 Penyiapan alat :
Larutan untuk reservoir yang telah disiapkan sebelumnya dimasukkan ke dalam reservoir yang telah dirangkai pada alat kemudiaan diisi sel dengan
memutar kepala katub kira-kira 45 ke arah kiri atau kanan sesuai dengan posisi
reservoir itu dihubungkan, alirkan beberapa kali dengan memutar kepala katub untuk menghindari gelembung udara. Atur batas air sampai mendekati garis
merah bagian atas pada sel. Alat dihidupkan maka tampilan grafik akan menyala dan menunjukkan logo Ugo Basile, hangatkan alat kira-kira 2-3 menit.
3.10.3 Kaliberasi alat :
Tekan F1 dari menu utama maka akan ditampilkan angka 0 secara otomatis kemudian tekan kembali F1 yang akan menunjukkan angka 0,5 ml, tekan
kembali tombol F1 yang akan menunjukkan angka 1,0; 2,0; 4,0; 8,0 ml. Setelah itu, pilihlah probe kaliberasi 2 ml dan tekan F2 untuk konfirmasinya. Masukkan
probe volum ke dalam sel, tunggu beberapa detik hingga nilai yang ditunjukkan stabil. Alat siap digunakan untuk pengukuran kaki tikus.
Universitas Sumatera Utara
29
3.11 Prosedur Pengujian Efek Antiinflamasi
Sebelum pengujian, tikus dipuasakan selama 14-16 jam dengan tetap diberi air minum. Tikus dikelompokkan ke dalam 5 kelompok, yaitu kelompok
kontrol negatif suspensi CMC 0,5, kelompok bahan uji tiga dosis suspensi jus buah belimbing manis, dan kontrol positif Na.diklofenak.
Pada hari pengujian, masing-masing hewan ditimbang dan diberi tanda pada kaki kirinya, kemudian kaki kiri tikus dimasukkan ke dalam sel yang berisi
larutan reservoir yang telah disiapkan sebelumnya sampai cairan naik pada garis batas atas, pedal kemudian ditahan, dicatat angka pada monitor sebagai volume
awal Vo yaitu volume kaki sebelum diberi suspensi secara oral sesuai dengan kelompoknya. Satu jam kemudian, kepada masing-masing telapak kaki tikus
disuntik secara intraplantar dengan 0,05 ml larutan λ-karagenan 1. Setelah 30 menit, dilakukan pengukuran dengan cara mencelupkan kaki tikus ke dalam sel
pletismometer yang berisi cairan khusus sampai larutan mencapai garis batas atas, dan pedal ditahan. Dicatat angka pada monitor. Perubahan volume cairan yang
terjadi dicatat sebagai volume telapak kaki tikus Vt. Pengukuran dilakukan setiap 30 menit selama 360 menit.Dan tiap kali pengukuran larutan sel tetap
dicukupkan sampai garis tanda atau garis merah bagian atas sel dan pada menu utama ditekan tombol 0, juga kaki tikus dikeringkan sebelumnya.
Volume radang adalah selisih volume telapak kaki tikus setelah dan sebelum disuntikkan karagenan. Pada waktu pengukuran, volume cairan khusus
sama setiap kali pengukuran, tanda batas pada kaki tikus harus jelas, kaki tikus harus tercelup sampai batas yang dibuat Juheini, dkk., 1990.
Universitas Sumatera Utara
30
3.12 Perhitungan Persen Radang Persen radang dapat dihitung dengan rumus di bawah ini :
