16
BAB 3 METODE PENELITIAN
3.1 Desain Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental. Penelitian dilakukan pada sajian otot polos detrusor kandung kemih guinea pig dengan menguji efek
ekstrak Nigella sativa terhadap kontraktilitas otot polos kandung kemih guinea secara in vitro dengan menggunakan alat organ bath.
3.2 Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan pada bulan Januari 2013 s.d. September 2013 di Ruang Multiguna Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam
Negeri Syarif Hidayatullah Jakarta. Penelitian ini telah diajukan melalui Komite Etik Penelitian Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan Universitas Islam Negri
Syarif Hidayatullah Jakarta.
3.3 Bahan Yang Diuji
Penelitian ini menggunakan Nigella sativa sebanyak 1 kg yang telah diekstraksi dengan pelarut etanol 70 pada Balai Penelitian Tanaman Obat dan
Aromatik BALITRO. Penelitian ini menggunakan otot polos kandung kemih guinea pig berjenis kelamin jantan dan betina dengan berat badan 500
– 700 gram dan umur 6 bulan. Sajian diambil dari bagian anterolateral kandung kemih guinea
pig dan dipisahkan lapisan muskularis dari lapisan serosa dan mukosanya. Adapun bahan-bahan yang dibutuhkan adalah guinea pig, larutan ekstrak
Nigella sativa, dimethyl-sulfidoxide DMSO, aquades, carbachol, gas karbogen O
2
97 , CO
2
3 , dan larutan Krebs-Henseleit yang dibuat dalam 500 ml aquades dengan komposisi seperti pada tabel dibawah.
16
17
Tabel 3.1 Komposisi larutan Krebs-Henseleit
No. Komposisi
Molaritas
1. NaCl
121,6 mmolL 2.
KCl 4,7 mmolL
3. NaHCO
3
15,4 mmolL 4.
KH
2
PO
4
1,2 mmolL 5.
MgCl
2
1,2 mmolL 6.
D-+-Glucose 11,5 mmolL
7. CaCl
2
2,5 mmolL
Dalam melaksanakan penelitian ini alat-alat yang dibutuhkan adalah organ bath, water heater, cawan petri plastik, alat bedah minor, lup, papan
bedah,baskom, benang dan pengaitnya, gunting, spidol board marker, kain lap, water container, kulkas, tip pipet hisap, appendorf, pipet hisap, tissue, corong,
laptop, papan bedah, sendok, alcohol swab.
3.4 Identifikasi variabel
3.4.1. Variabel bebas
Variabel bebas pada penelitian ini adalah kadar konsentrasi ekstrak Nigella sativa.
3.4.2. Variabel terikat
Variabel terikat pada penelitian ini adalah persentase kontraksi otot polos kandung kemih guinea pig.
3.5 Alur Penelitian
3.6 Cara Kerja
3.6.1. Tahap Persiapan Bahan dan Sampel
Bahan yang diuji adalah ekstrak dari biji Nigella sativa yang didapatkan dari Balai Penelitian Tanaman Obat dan Aromatik BALITRO. Selanjutnya
dilakukan determinasi tanaman sampel penelitian di Lembaga Ilmu Pengetahuan Persiapan ekstrak
Nigella sativa Persiapan alat dan
bahan penelitian Pembuatan strip otot polos
kandung kemih Guinea pig
Pengujian kontraktilitas strip otot polos dengan organ bath
Pengamatan dan pengukuran kontraksi
Pengolahan data
Kategori