dimurnikan, dan disimpan dalam media miring GYPA dalam refrigerator hingga
pekerjaan selanjutnya Sniegowski et al., 2002.
3.3 Pengamatan Morfologi Khamir
Pengamatan morfologi koloni khamir secara langsung dilakukan berdasarkan Kurtzman et al., 2011 dengan ciri-ciri yang diamati yaitu tekstur,
warna, permukaan, elevasi dan tepi koloni. Pengamatan dilakukan pada biakan berumur 48 jam atau lebih yang ditumbuhkan dalam media Malt Extract Agar
MEA di dalam inkubator. Pengamatan koloni khamir secara mikroskopis dilakukan berdasarkan Lay 1994 dan Kurtzman et al., 2011 dengan ciri-ciri
yang diamati yaitu bentuk sel, jenis pertunasan, askospora, blastospora dan pseudohifahifa.
3.4 Uji Toleransi Khamir Terhadap Etanol
Isolat khamir diuji tingkat toleransinya terhadap etanol pada media dengan konsentrasi etanol yang bervariasi. Sebanyak 1 ml khamir dengan kekeruhan
setara larutan Mc.Farland diinokulasikan pada 10 ml media Glucose Yeast Peptone
Broth GYPB dengan konsentrasi etanol p.a. yang berbeda 0, 5, 10 dan 15 Khaing et al., 2009. Tabung diinkubasi pada suhu ambien selama 48 jam.
Setelah diinkubasi, sel khamir diukur viabilitasnya dalam media GYPA dan dihitung hasilnya dalam Log CFUml. Masing-masing perlakuan diulang
sebanyak 2 kali. Khamir dengan tingkat toleransi terhadap etanol paling tinggi, digunakan pada tahapan selanjutnya.
3.5 Pembuatan Tepung Limbah
Limbah kupasan kentang, singkong dan talas diambil dari produsen keripik khas Nias, PT. SONA, Gunungsitoli. Masing-masing limbah dipisahkan
menurut jenisnya, kemudian dibersihkan dari kotoran yang menempel. Limbah yang telah bersih dikeringkan di bawah sinar matahari hingga memiliki tekstur
yang rapuh dan mudah patah menyerupai kerupuk. Limbah yang telah kering, digiling kemudian diayak menggunakan saringan sehingga dihasilkan tepung
limbah. Tepung limbah dimasukkan ke dalam wadah yang kering dan tertutup
Universitas Sumatera Utara
kemudian disimpan untuk selanjutnya digunakan sebagai bahan utama media fermentasi bioetanol Adini et al., 2015.
3.6 Sakarifikasi Enzimatis Menggunakan Aspergillus niger
