23
karena tidak tercukupinya bahan-bahan esensial yang dibutuhkan sel untuk terus tumbuh dan membelah. Epigallocathecin-3-gallate yang terkandung dalam teh hijau
dan juga dapat ditemukan pada konsentrasi yang lebih rendah dalam Scurrulla atropurpurea adalah angiogenesis inhibitor oral dan digunakan sebagai prevensi dan
terapi dari penyakitgangguan angiogenesis.
29,34
2.7. Deteksi Proliferasi Sel dengan Pewarnaan Ki-67
Ki-67 digunakan untuk mendeteksi atau mengevaluasi faktor pertumbuhan dari jaringan neoplasma. Ki-67 protein dikenal sebagai monoklonal antibodi Ki-67 atau
MK167. Ki-67 antigen merupakan protein nuklear yang dikaitkan dengan proliferasi. Lebih jauh lagi juga dikaitkan dengan transkripsi RNA ribosom. Inaktivasi Ki-67
antigen menyebabkan inhibisi sintesa RNA ribosom.
35
Ki-67 adalah protein nuklear nonhiston yang berhubungan dengan siklus sel, yang diekspresikan pada sel yang berproliferasi selama pertengahan fase G1, meningkat
pada saat memasuki fase S dan G2, dan mencapai puncak pada fase M pada siklus sel dan dikatabolisme dengan cepat pada akhir fase M dan tidak terdeteksi pada fase G0
dan awal G1. Ekspresi Ki-67 sangat berhubungan dengan pertumbuhan growth fraction dan tidak nampak selama proses perbaikan DNA. Ki-67 dihubungkan
dengan petanda proliferasi sel dan pada karsinoma payudara invasif digunakan untuk menentukan grading yang berhubungan dengan prognosa pasien.
7
Pada interfase Ki-67 antigen dapat dideteksi melalui nukleus, pada saat terjadinya mitosis banyak protein dilokasikan dipermukaan kromosom. Ki-67 adalah
Universitas Sumatera Utara
24
monoklonal antibodi yang dihasilkan dengan mengimunisasi mencit dengan nukleus hodgkin lymphoma cell line L 428. Penamaan berasal dari nama kota asal yaitu Kiel
dan penomoran dari original clone pada 96-well plate. MIB-1 yang digunakan adalah monoklonal antibodi yang mendeteksi Ki-67 antigen. Ki-67 labelling index
digunakan setelah jaringan diprosesing dengan formalin, parafin dan embeding dan setelah dipanaskan dengan perantaraan antigen retrieval.
38,39
Universitas Sumatera Utara
25
2.8. Kerangka Teori
Gambar 2.6. Skema kerangka teori penelitian Benzoαpyrene
karsinogenik Payudara Tikus Wistar
Scurrulla atropurpurea Reaksi detoksikasi, epoksidasi
hidroksilasi DNA, RNA dan protein tubuh
Mutasi DNA
Inisiasi
Promosi
Progresi
Aktivitas proliferasi sel Ki67
Transformasi
Keterangan : : Pengaruh karsinogenik
: Pengaruh ekstrak S. atropurpurea : efek menghambat
Universitas Sumatera Utara
26
BAB 3 METODE PENELITIAN
3.1. Desain Penelitian
Desain yang digunakan pada penelitian ini adalah penelitian eksperimental murni dengan post test only control group design yang menggunakan tikus Wistar sebagai
hewan percobaan.
37
3.2. Tempat dan Waktu Penelitian
Penelitian ini dilakukan di laboratorium Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara USU Medan, laboratorium Biologi Fakultas FMIPA USU Medan,
serta laboratorium Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran USU dan Instalasi Patologi Anatomi RS. H. Adam Malik Medan dalam waktu 6 bulan Agustus 2011
– Februari 2012.
3.3. Rancangan Penelitian
Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap RAL dengan jumlah sampel 25 ekor tikus Wistar betina yang
telah diinokulasi kanker terinduksi benzoαpyrene yang dibagi dalam 5 kelompok, masing-masing 5 ekor tiap kelompok dengan nama
kelompok K1, K2, P1, P2,dan P3. 1.K1 = diberi diet standar, setelah timbul massa tumor 3 minggu, tidak diberi
ekstrak Scurrulla atropurpurea, dan diterminasi pada minggu ke-3 kontrol positif pertama.
2.K2 = diberi diet standar, setelah timbul massa tumor 3 minggu, tidak diberi ekstrak Scurrulla atropurpurea dan diterminasi pada minggu ke-6 kontrol
positif kedua.
Universitas Sumatera Utara
