33
3.11. Prosedur Kerja
Dua puluh lima ekor tikus betina strain Wistar dibagi menjadi 5 kelompok, yaitu kelompok kontrol positif pertama K1, kontrol positif kedua K2, perlakuan 1 P1,
perlakuan 2 P2 dan perlakuan 3 P3. Masing-masing kelompok terdiri dari 5 tikus Wistar, kemudian dikandangkan sesuai kelompok dan pada tiap tikus diberi
penomoran dengan memberi tanda pada telinga tiap tikus. Masing-masing kelompok diberi perlakuan seperti pada kerangka operasional.
3.11.1. Induksi sel kanker payudara tikus Wistar
Sel kanker payudara tikus Wistar diinduki oleh benzoαpyrene dosis 0.3mg20gBB
dalam oleum olivarium diberikan secara sub kutan dengan volume pemberian 0,1ml20grBB selama 10 hari.
12
Setelah muncul kanker 1-3 minggu, dilakukan inokulasi sel kanker payudara pada payudara tikus resipien, kemudian diamati
timbulnya massa tumor pada payudara tikus resipien dengan cara palpasi 3 minggu.
3.11.2. Prosedur transplantasi inokulasi tumor
a. Tikus donor dimatikan dengan dekapitasi servikalis, kemudian diletakkan terlentang pada tatakanalas fiksasi dan keempat kakinya difiksasi dengan jarum.
b. Kulit dibagian yang bertumor diusap dengan alkohol 70, kemudian dibuat sayatan dengan gunting lurus, untuk mengeluarkan tumor.
c. Tumor diletakkan di cawan petri kecil yang telah terlebih dahulu dicuci dengan larutan garam fisiologis dan diletakkan di atas es.
d. Amati bentuk dan keadaan tumor, kemudian ambilpotong jaringan tumor yang masih baik yaitu bagian yang tanpa nekrosis biasanya di daerah tepi jika tumor
besar sebanyak kira-kira yang dapat menghasilkan bubur tumor paling sedikit 1
Universitas Sumatera Utara
34
ml dan taruh dicawan petri kecil lainnya. Bersihkan dari jaringan ikat simpai, jaringan nekrotik dan darah, kemudian cacahpotong-potong sampai halus dengan
gunting hingga akhirnya terbentuk “bubur tumor” yang partikelnya dapat
melewati jarum trokar. Tambahkan garam fisiologis lebih kurang sama banyak dengan volume tumor.
e. Bubur tumor disuntikkan sub kutan di payudara tikus dengan dosis 0.2ml menggunakan spuit insulin dengan ketepatan 10
-1
. f. Sisa tumor yang padat dimasukkan ke dalam botol formalin untuk dibuat sediaan
mikroskopik. g. Masing-masing mencit diberi nomor di telinganya dan dimasukkan ke dalam
kandang berbeda yang diberi label berisi: jenis kelompok perlakuan, tanggal transplantasi.
3.11.3. Pengamatan morfologi benjolan, perubahan berat badan tikus
Kategori