Kurva baku dapat diterima bila nilai r yang lebih besar dari r tabel untuk delapan data dengan derajat bebas db = 7 yaitu sebesar 0,707 taraf kepercayaan 95.
50 100
150 200
250 300
350 400
450
50 100
150 200
250
kadar parasetamol dalam plasma ugml L
u as area x
100 00
Gambar 15. Persamaan kurva baku parasetamol dalam plasma r = 0,9997; p 0,05 ; Y = 19560,5531 X + 117131,5808
Dapat dilihat pada gambar 16 bahwa.nilai r persamaan kurva baku lebih kecil
daripada r tabel sehingga kurva baku tersebut dapat digunakan untuk menghitung kadar parasetamol dalam plasma. Persamaan kurva baku yang diperoleh yaitu Y =
19560,5531 X + 117131,5808.
2. Penetapan harga perolehan kembali, kesalahan acak, dan kesalahan
sistemik.
Validasi metode analisis dilakukan pada tahapan ini. Pertimbangan diperoleh dari parameter yang digunakan yaitu harga perolehan kembali dan koefisien variasi.
Digunakan dua seri kadar larutan yaitu 25 µgml dan 100 µgml yang direplikasi sebanyak 3 kali. Pengukuran dilakukan pada panjang gelombang 250 nm. Setelah
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
diolah dengan persamaan kurva baku maka diperoleh kadar parasetamol dalam plasma.
Perolehan kembali merupakan tolak ukur akurasi metode. Perolehan kembali yang disyaratkan pada bioanalisis terpenuhi jika berada pada rentang antara 80-
120 Mulja Hanwar, 2003. Nilai perolehan kembali dalam hari yang sama intraday untuk kadar 25 µgml sebesar 97,25 ± 0,65 dan untuk kadar 100 µgml
sebesar 97,90 ± 0,81. Dilihat dari nilai tersebut maka dapat dikatakan bahwa metode ini memiliki akurasi yang baik. Data kemudian diulang para hari berikutnya
interday guna menguji ketangguhan metode. Hasilnya, pada kadar 25 µgml kadar yang diperoleh kembali sebesar 99,43 ± 1,12 sebesar 98,88 ± 0,95 untuk kadar
100 µgml.setelah kedua data interday dan interday dibandingkan hasilnya relatif masih baik sehingga disimpulkan bahwa metode memiliki ketangguhan yang baik.
Nilai koefisien variasi KV menyatakan nilai ksalahan acak. Untuk kadar 25 µgml adalah 1,1522 intraday dan 2,0594 interday. Kadar 100 µgml
memiliki nilai KV sebesar 1.4789 intraday dan 1,6521 interday. Nilai ini
memenuhi ketentuan yang KV disyaratkan untuk bioanalisis yaitu kurang kurang dari 15-20 Mulja Hanwar, 2003. Artinya metode ini memiliki nilai presisi yang
baik. Melihat hasil tersebut, dapat disimpulkan bahwa penetapan kadar parasetamol dalam plasma dengan HPLC memenuhi syarat untuk dapat digunakan. Hasilnya
ditampilkan pada tabel XII dan XIII.
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Tabel XII. Harga perolehan kembali, kesalahan acak, kesalahan sistemik penetapan kadar parasetamol dalam plasma dengan HPLC-
Intraday
AUC yang telah dikoreksi nilainya dengan blanko
Penimbangan parasetamolmg
AUC Kadar
terhitung Kadar
terukur μgml
μgml Perolehan
kembali
0.09998 596106
24,9950 24,4868
97,97 0.10000
606569 25,0000
25,0217 100,09
0.10003 604764
25,0075 24,9293
99,69 Purata
24,8126 97,25
SD 0,2859
1,13 KB
0,1651 0,65
KV 1,1522
1.16 0.09998
2007968 99,9800
96,6658 96,68
0.10000 2026143
100,000 97,5950
97,58 0.10003
2063528 100,0300
99,5062 99,44
Purata 97,9223
97,90 SD
1,4482 1,44
KB 0,8361
0,81 KV
1.4789 1,44
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
Tabel XIII. Harga perolehan kembali, kesalahan acak, kesalahan sistemik penetapan kadar parasetamol dalam plasma dengan HPLC-
Intterday
AUC telah dikoreksi nilainya dengan blanko
Seperti yang telah dikemukakan sebelumnya bahwa pada plasma ternyata terdapat senyawa dengan t
R
mirip dengn parasetamol, maka selanjutnya untuk mengitung kadar parasetamol dalam plasma AUC yang diperoleh akan dikoreksi
dengan blanko yaitu dengan cara mengurangi AUC parasetamol yang diperoleh dengan AUC pada blanko plasma tersebut.
Penimbangan parasetamolg
AUC Kadar
terhitung Kadar
terukur μgml
μgml Perolehan
kembali
0,09998 608761
24,9950 25,1337
100,56 0,09998
609467 24,9950
25,1698 100,70
0,10003 591780
25,0075 24,2656
97,03 Purata
24,8564 99,43
SD 0,5119
2,08 KB
0,2956 1,12
KV 2,0594
2,09 0,09998
2078005 99,9800
100,2464 100,27
0,09998 2016597
99,9800 97,1070
97,13 0,10003
2058942 100,0300
99,2717 99,24
Purata 98,8750
98,88 SD
1,6068 1,60
KB 0,9277
0,95 KV
1,6521 1,07
PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI
3. Uji Stabilitas Parasetamol.
