Pembentukan Kecambah Dari Biji Kelapa Sawit Penyediaan Ekstrak Kasar Enzim Lipase dari Kecambah Biji Kelapa Sawit Penentuan Suhu Optimum Untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase Terhadap Hidrolisis RBDPO

3.4 Bagan Penelitian

3.4.1 Pembentukan Kecambah Dari Biji Kelapa Sawit

Dipisahkan buah kelapa sawit dari tandan Pusat Penelitian Kelapa Sawit Medan Kecambah kelapa sawit berumur 1 hari Buah kelapa sawit 9,056 kg Tandan kelapa sawit varietas DxP ±16,00 kg Tandan kosong kelapa sawit dikupas Direndam dengan air selama 7 hari Dibilas dengan larutan Dithane M-40 0,4 Dikering anginkan selama 1 hari Diletakkan pada kotak gray Dimasukkan ke dalam germinator pada suhu 39-40ºC selama 60 hari Direndam dengan air selama 3 hari Dibilas dengan larutan Dithane M-40 0,4 Diletakkan pada kotak gray Dimasukkan dalam ruangan pada suhu 30ºC selama 21 hari Biji kelapa sawit 2,704 kg Daging buah kelapa sawit 7,525 kg Dimasukkan dalam plastik Direndam dengan air Diletakkan dalam ruangan pada suhu 25 º C selama 14 hari Kecambah Kelapa sawit berumur 14 hari UNIVERSITAS SUMATERA UTARA ditambahkan dengan 100,68 g NH 4 2 SO 4 didiamkan selama 1 malam pada suhu 4ºC disentrifugasi pada 10.000 rpm selama 30 menit Dilarutkan dengan buffer fosfat pH 7,0 dalam labu takar 50 mL

3.4.2 Penyediaan Ekstrak Kasar Enzim Lipase dari Kecambah Biji Kelapa Sawit

90 buah kecambah biji kelapa sawit 416,5501 g ditambahkan dengan 250 mL buffe fosfat pH 7,0 diblender disaring dipisahkan cangkang dengan biji bagian dalam Cangkang 295,380 g Biji Bagian Dalam 121,179 g Residu Filtrat 198,5 mL disentrifugasi pada 5000 rpm selama 30 menit Endapan Supernatan 167,8 mL Suspensi 215,5 mL Supernatan Endapan 1,52 g Ekstrak Kasar Enzim Lipase UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

3.4.3. Penentuan Suhu Optimum Untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase Terhadap Hidrolisis RBDPO

Dilakukan perlakuan yang sama untuk variasi suhu 35ºC; 40ºC; 45ºC; dan 50ºC 1 g RBDPO dimasukkan masing-masing ke dalam gelas Erlenmeyer 250 mL ditambahkan 4 mL buffer fosfat pH 7,0 ditambahkan 1 mL crude enzim lipase dipanaskan gelas Erlenmeyer pada suhu 30ºC selama 60 menit ditambahkan 6 mL etanol : aseton 1:1 ditambahkan 3 tetes indikator fenolftalein dititrasi dengan KOH 0,0906 N sampai terjadi perubahan warn menjadi merah lembayung dicatat volume KOH 0,0906 N yang terpakai dihitung ALB nya dihitung aktivitasnya Hasil UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

3.4.4. Penentuan pH Optimum Untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase Pada Hidrolisis RBDPO