Pengamatan Jumlah Spora Hidup Dalam Produk Viable Spore CountVSC Ahdianto, Penentuan aktivitas bioinsektisida Bioassay Ahdianto, 2006
Lampiran 2. Perhitungan Susunan Media Kultivasi
Berikut perhitungan total penambahan urea pada beberapa perbedaan perbandingan substrat ampas tahu dan limbah cair tahu dengan berbasiskan pada rasio CN adalah 71.
¾ Media A ampas tahu 20 dan limbah cair tahu 80
C = 7 N C Ampas T + C Air T + C Urea = 7N Ampas T + N Air T + N Urea
5.639 20 g + 0.273 80 g + 20 Urea = 70.42 20 g + 0.022 80 g + 46.667 Urea 1.1278 + 0.2185 + 0.2 Urea = 70.084 + 0.0176 + 0.4667 Urea
1.3463 + 0.2 Urea = 0.7112 + 3.2669 Urea 0.6731 – 0.3556 = 3.2669 Urea – 0.2 Urea
0.6351 g = 3.0669 Urea
Urea = 0.2071 gram untuk 100 gram media
Lampiran 3. Data Bioassay LC
50
dan Potensi Produk bioinsektisida Bacillus thuringiensis subsp. aizawai
Hari ke- Freeze tanpa laktosa
5
o
C 25
o
C 35
o
C LC
50
mgl Potensi Produk
IUmg LC
50
mgl Potensi Produk
IUmg LC
50
mgl Potensi Produk
IUmg
0.25 3,200.00 0.25 3,200.00 0.25 3,200.00
1 0.29
2,758.62 0.48
1,666.67 0.32
2,500.00
16 0.46
1,739.13 0.75
1,066.67 1.89
423.28
30 0.75
1,066.67 2.62
305.34 4.46
179.37
Hari ke- Freeze dengan Laktosa
5
o
C 25
o
C 35
o
C LC
50
mgl Potensi Produk
IUmg LC
50
mgl Potensi Produk
IUmg LC
50
mgl Potensi Produk
IUmg
0.25 3,200.00 0.25 3,200.00 0.25 3,200.00
1 0.26 3,076.92 0.28
2,857.14 0.32
2,500.00
16 0.30 2,666.67 0.48
1,666.67 0.75
1,066.67
30 0.46
1,739.13 0.75
1,066.67 1.89
423.28
Lampiran 4. Data log VSC bioinsektisida Bt subsp. Aizawai
Hari ke- Log VSC tanpa penambahan laktosa sporamg pada suhu :
5
o
C 25
o
C 35
o
C 1
2 Rata-rata
1 2
Rata-rata 1
2 Rata-rata
8,01 7,91 7,96 8,01
7,91 7,96 8,01 7,91 7,96
2 7,51 7,43
7,47 7,15
7,61 7,38 7,18 6,95 7,07
6
7,11 7,48 7,30
7,41 7,48 7,45 7,08
6,90 6,99
18 7,30
7,18 7,24 7,00 7,04 7,02 6,00
7,11 6,56
26 7,20
7,18 7,19 6,95 6,48 6,72 6,00
6,48 6,24
30 7,18
6,00 6,59 7,00 6,00 6,50 6,00
6,3 6,15
Hari ke- Log VSC dengan penambahan laktosa sporamg pada suhu :
5
o
C 25
o
C 35
o
C 1
2 Rata-rata
1 2
Rata-rata 1
2 Rata-rata
8,05 8,25 8,15
8,05 8,25
8,15 8,05
8,25 8,15
2 7,69 7,60
7,65 7,58 7,64
7,61 7,48 7,64
7,56
6 7,63 7,41
7,52 7,62 7,41
7,52 7,40 7,48
7,44
18 7,34 7,58
7,46 7,57
7,28 7,43 6,00 7,48 6,74
26 7,34
7,18 7,26 7,04 6,48 6,76 6,78
6,48 6,63
30 7,04 6,85
6,95 7,15
6,00 6,58 7,00 6,00 6,50
VSC sporamg biomassa kering Perlakuan
Ulangan 1 Ulangan 2
Rata-rata
Setelah Fermentasi 5.2 x 10
9
1.3x 10
9
3.25 x
10
9
Setelah Freeze drying
Tanpa Laktosa 1.03 x 10
8
8.20 x
10
7
9.25 x
10
7
Dengan Laktosa 1.12 x 10
8
1.79 x
10
8
1.45 x 10
8
Lampiran 5. Contoh Penentuan LC
50
Menggunakan Program Probit Quant
Freeze tanpa penambahan laktosa, Hari ke-0
conc obs.corr. expected O-E cont.chi-sq 100.0000 99.11 97.38 1.73 .0117790
10.0000 85.00 88.08 3.08 .0090370 1.0000 70.00 66.22 3.78 .0063718
.1000 45.00 36.63 8.37 .0302168 .0100 10.00 13.52 3.52 .0105908
tot. chi-sq = .6800 chi-sq 95 = 7.8147
chi-sq 99 = 11.3449 The fitted line is log conc.= a + bprobit where :
a = 5.50 b = .85 The correlation coefficient of the initial line is .9814
LC50 fLC50 +95 CL -95 CL .25 5.34 1.35 .05
S fS +95 CL -95 CL 14.95 .21 3.13 71.35
LC
50
= 0,25 : Artinya, untuk mematikan 50 dari total serangga yang ada dibutuhkan
konsentrasi toksin dalam larutan bioinsektisida sebanyak 0,25 mgl.
FORMULASI PRODUK DAN PENURUNAN MUTU SELAMA PENYIMPANAN BIOINSEKTISIDA Bacillus thuringiensis
subsp.aizawai DARI LIMBAH INDUSTRI TAHU
SKRIPSI
ERLINA SETIYAWATI SUSANTO F34061186
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR 2011
PRODUCT FORMULATION AND REDUCTION QUALITY DURING STORAGE OF BIOINSECTICIDE Bacillus thuringiensis subsp. aizawai FROM WASTE OF INDUSTRIAL
TOFU
Erlina Setiyawati Susanto
Department of Agricultural Engineering, Faculty of Agricultural Technology, Bogor Agricultural University, IPB Darmaga Campus, PO Box 16680, Bogor, West Java,
Indonesia. Phone 08561340264, e-mail : erlinnicegmail.com
ABSTRACT
Bioinsecticide can kill insects and disease vector. Bioinsecticide developed from bacteria, virus, mushroom, and protozoa. Bacteria that often used to produce bioinsecticide is “Bacillus
thuringiensis”. Bacillus thuringiensis subsp. aizawai Bta as one of the Bacillus thuringiensis Bt species produces crystal protein called delta endotoxin
δ-endotoxin. As other Bt crystal protein, this crystal is specifically toxic to larvae Lepidoptera and Dipteral ordo. One of advantage
bioinsecticide Bta is savety for our environment. Therefore, in this research produce bioinsecticide Bta from waste of industrial tofu as raw material standard. This research was to obtain the best
product formulations Bta, reduction quality Bta, and to asses the level of toxicity Bta during storage. Media formulation using tofu waste and tofu waste water, with a ratio of 20: 80 and the
starter added 10 v v. In this research, product formulation using lactose as filler. The highest viable spore count VSC is the product formulation of freeze lactose 1.45 x 10
8
sporamg, whereas the lowest VSC is the product formulation of freeze without lactose 9.25 x 10
7
sporamg. After storage one month, the highest VSC is product formulation of freeze lactose was storaged on
temperature 5
o
C 9 x 10
6
sporamg, whereas the lowest VSC is the product formulation of freeze without lactose was storaged on temperature 35
o
C 1.5 x 10
6
sporamg. The level toxicity LC
50
product formulation of freeze lactose and freeze without lactose are 0.25 mgl. Value of LC
50
from all of the treatment higher than value of LC
50
Bactospeine 0.05 mgl. During storage one month, value of LC
50
and potential product bioinsecticide Bta go down continually. Keywords : Bioinsecticide, Bacillus thuringiensis subsp. aizawai Bta, Formulation
ERLINA SETIYAWATI SUSANTO. F34061186. Formulasi Produk dan Penurunan Mutu selama Penyimpanan Bioinsektisida Bacillus Thuringiensis subsp. aizawai dari Limbah
Industri Tahu
.
Di bawah bimbingan Sugiarto dan Mulyorini Rahayuningsih. 2011. RINGKASAN
Bioinsektisida merupakan produk yang dihasilkan oleh mikroorganisme yang dapat membunuh serangga hama dan vektor pembawa penyakit. Bioinsektisida didefinisikan juga
sebagai racun biologis yang dihasilkan oleh mikroorganisme yang dapat membunuh serangga entomopathogen. Salah satu mikroorganisme yang digunakan adalah bakteri Bacillus
thuringiensis Bt. Sedikitnya terdapat 34 subspesies dari Bt yang disebut serotype atau varietas dari Bt dan lebih dari 800 keturunan atau benih Bt telah diisolasi Swadener 1994.
Bioinsektisida dapat diformulasikan menjadi sebuah produk flowable suspension, wettable powder, dust, atau granular tergantung pada tipe fermentasi, segi ekonomi dari proses, dan
kebutuhan formulasi tertentu Quinlan dan Lisansky 1985; Ignoffo dan Anderson 1979. Bentuk formulasi produk bioinsektisida Bt dipengaruhi oleh cara pemanenannya.
Pada penelitian ini diproduksi bioinsektisida Bacillus thuringiensis subsp. aizawai yang berbahan baku produk samping limbah industri tahu sebagai bahan baku utama. Pemilihan
limbah industri tahu ampas tahu dan air tahu dikarenakan kedua komponen tersebut mengandung nutrisi, vitamin, dan mineral yang dibutuhkan mikroorganisme dalam pertumbuhannya. Penelitian
ini bertujuan untuk formulasi produk dan penurunan mutu bioinsektisida Bacillus thuringiensis subsp. aizawai Bta serta untuk menguji toksisitas Bta setelah penyimpanan.
Formulasi media yang digunakan adalah ampas tahu dan air tahu dengan perbandingan 20 : 80 dan jumlah starter yang ditambahkan 10 vw. Pada analisis bahan baku diperoleh kadar
karbon pada ampas tahu dan air tahu sebesar 5.64 bb dan 0.27 bb, sedangkan kadar nitrogennya sebesar 0.42 bb dan 0.02 bb. Pada penelitian ini bentuk formulasi produk
yang dihasilkan adalah formulasi wettable powder. Untuk menghasilkan formulasi produk wettable powder, proses yang dipilih dalam penelitian ini adalah menggunakan pengeringan beku
freeze drying dengan menggunakan laktosa sebagai filler. Jumlah spora hidup tertinggi dengan waktu fermentasi selama 36 jam pada penelitian ini
dihasilkan oleh formula produk freeze dengan penambahan laktosa 1.45 x 10
8
sporamg, sedangkan total spora hidup terendah pada penelitian ini dihasilkan oleh formula produk freeze
tanpa penambahan laktosa 9.25 x 10
7
sporamg. Setelah dilakukan penyimpanan selama 1 bulan jumlah spora hidup tertinggi dihasilkan oleh formula produk freeze dengan penambahan laktosa
yang disimpan pada suhu 5
o
C 9 x 10
6
sporamg, sedangkan total spora hidup terendah dihasilkan oleh formula freeze tanpa penambahan laktosa yang disimpan pada suhu 35
o
C 1.5 x 10
6
sporamg. Tingkat toksisitas LC
50
untuk fermentasi selama 36 jam pada formula freeze dengan atau tanpa penambahan laktosa adalah 0.25 mgl. Nilai LC
50
dari setiap perlakuan dalam penelitian ini lebih besar dibandingkan dengan nilai LC
50
Bactospeine 0.05 mgl. Setelah dilakukan penyimpanan selama 1 bulan nilai LC
50
dan potensi produk bioinsektisida terus mengalami penurunan.
I. PENDAHULUAN