4.1. pH OptimumPertumbuhan Pichia stipitis dalam Media Cair YPMX
pH merupakan parameter yang mudah untuk menyatakan terjadinya pertumbuhan mikrobial Pelczar dan Chan, 2005. Media cair YPMX
mempunyai pH awal 4,5 dan 5 dengan kondisi agitasi rotary shaker pada 120 rpm dan suhu 27
o
C dan setelah ditambahkan inokulum Pichia stipitis mempunyai absorbansi yang berbeda-beda. Perubahan Optical Density OD
Pichia stipitis dalam media cair YPMX ini dapat dilihat seperti pada gambar
15, yaitu :
0.1 0.2
0.3 0.4
0.5 0.6
0.7 0.8
0.9
2 4
6 8 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28
Waktu Jam A
b s
o rb
a n
s i
6 n
m
Media pH 4.5 Media pH 5
Gambar 15. Peningkatan Optical Density OD Pichia stipitis
dalam Media Cair YPMX Pada gambar 15 dapat dilihat peningkatan OD pada media awal pH 5
jauh lebih tinggi jika dibandingkan dengan media awal pH 4,5. Terjadinya peningkatan nilai OD pada tiap-tiap jam menunjukkan bahwa telah tercukupinya
nutrisi-nutrisi seperti sumber karbon, mikro nutrient, aerasi, dan kondisi pH yang cocok pada media tersebut. Substrat tersebut kemudian dipakai oleh Pichia stipitis
untuk pertumbuhannya. Penggunaan rotary shaker selama proses inkubasi isolat
Pichia stipitis dalam media cair YPMX bertujuan untuk aerasi aktif sehingga
kadar oksigen bisa tercukupi dari pengocokan media dan lebih memudahkan kontak antara nutrisi-nutrisi dalam media dengan yeast.
Kurva pertumbuhan pada media YPMX pH 5 menunjukkan peningkatan OD yang lebih tinggi jika dibandingkan dengan media cair YPMX pH 4,5
gambar 15 maka, pH 5 dipilih untuk pertumbuhan Pichia stipitis dan untuk pH pada substrat yang akan difermentasikan. Waktu inkubasi starter inokulum Pichia
stipitis selama ±16 jam dipilih berdasarkan grafik. Peningkatan OD Pichia stipitis
dalam media cair YPMX pada peningkatan OD gambar 15, dimana pertumbuhan berada pada fase logaritmik yaitu waktu yang optimal untuk
digunakan sebagai starter karena pada fase ini sel Pichia stipitis sedang aktif melakukan pembelahan sel dengan jumlah yang optimal Purwoko, 2007;
Ganjar, 2006. Tingginya OD pada pH 5 disebabkan oleh banyaknya sel-sel Pichia stipitis
yang tumbuh. Dengan demikian diharapkan lebih banyak sel yang akan mengkonversi gula pada media substrat menjadi etanol melalui proses
fermentasi.
4.2. Pengaruh Detoksifikasi Penguapan dan Penambahan Alkali Terhadap Kadar Gula Pereduksi