untuk penetapan kadar gula dan pH sebelum dan setelah fermentasi. Replikasi dilakukan sebanyak 2 kali.
3.4.4. Prosedur Analisis
3.4.4.1. Pengukuran Konsentrasi Gas CO
2
Metode pengukuran gas karbon dioksida dengan cara gravimetri berdasarkan penelitian Susanto dan Achmad 2003. Botol-botol sampel media
fermentasi ditimbang pada jam ke-0, 24, 48, 96, 120, 148 kemudian dicatat massanya. Replikasi sebanyak 2 kali. Konsentrasi gas karbon dioksida dihitung
dengan rumus di bawah ini, yaitu :
Konsentrasi gas CO
2
mgml = w -w
1
V
Keterangan : w = berat botol sampel media fermentasi sebelum inkubasi
w
1
= berat botol sampel media fermentasi setelah inkubasi V = volum total fermentasi ml
3.4.4.2. Pengukuran Kadar Gula Pereduksi Metode Nelson-Somogyi
Pembuatan kurva standar gula pereduksi dibuat dengan cara 1 gram xilosa dilarutkan dengan aquadest sampai volum labu ukur ±100 ml sehingga larutan ini
memiliki konsentrasi 10 mgml larutan A. Sebanyak 2 ml larutan A diambil dan diencerkan dengan aquadest sampai volum labu ukur ±100 ml konsentrasi 0,2
mgml. Larutan B diencerkan dengan aquadest sampai 1 ml sehingga konsentrasinya menjadi 0,04 mgml; 0,08 mgml: 0,12 mgml; 0,16 mgml; dan
0,2 mgml serta dibuat pula larutan blanko 1 ml aquadest. Masing-masing larutan tersebut ditambahkan 1 ml pereaksi Nelson lampiran 12 dan ditutup
dengan kelereng. Sampel dipanaskan dalam air panas ±100
o
C selama ±20 menit, lalu didinginkan. Setelah itu ditambahkan 1 ml pereaksi arsenomolibdat
dan diencerkan dengan 7 ml aquadest kemudian divortek sampai endapan larut. Larutan sampel diukur serapannya dengan spektrofotometer UV-Vis pada
panjang gelombang 520 nm. Kemudian dibuat hubungan antara absorbansi dengan konsentrasi xilosa.
Penetapan kadar gula pereduksi pada sampel dilakukan dengan cara 1 ml supernatan sampel yang telah diencerkan dimasukan ke dalam tabung reaksi dan
dilakukan hal yang sama seperti pada pembuatan kurva standar dan penentuan konsentrasi gula pereduksi pada sampel diplotkan dengan regresi linear kurva
standar Sudarmadji, et al., 1997. Konsentrasi gula pereduksi didapat dari rumus di bawah ini, yaitu :
Persamaan regresi linear kurva standar gula pereduksi, Y = ax + b Konsentrasi gula pereduksi mgml = Y-b x Fp
a Keterangan : Y = Persamaan Regresi linear Absorbansi
m = Konstanta regresi linear Y a = Konstanta regresi linerar Y
Sumber : Firmansyah, 2009
3.4.4.3. Pengukuran Konsentrasi Etanol
