Lanjutan tabel 2 Pemberian perlakuan sterilisasi pada eksplan binahong III
Alkohol 70 dan larutan clorok 5 selama 5 menit. Setiap
proses pergantian larutan, bahan eksplan dibilas dengan menggunakan air steril sebanyak tiga
kali. Kemudian keringkan dengan tissu steril dan tanam pada media MS.
IV Alkohol 96
3.3.2 Pembuatan Media
3.3.2.1 Pembuatan Larutan Stok
Larutan stok yang akan dibuat berdasarkan pengelompokannya terdiri dari stok makro, stok mikro, stok Fe-EDTA, stok vitamin dan stok hormon.
Pembuatan larutan stok bertujuan untuk menghemat pekerjaan menimbang bahan yang berulang-ulang setiap kali membuat media. Komposisi larutan stok yang
digunakan disajikan pada lampiran 2. Unsur hara yang telah ditimbang sesuai dengan berat yang telah ditentukan kemudian dilarutkan dalam air steril atau
aquades 1 liter. Larutan stok yang telah selesai dibuat, sebaiknya disimpan di tempat yang bertemperatur rendah dan gelap.
3.3.2.2 Pembuatan Media MS
Pembuatan media dengan larutan stok dilakukan dengan metode pengenceran. Pengambilan setiap larutan stok yang dibutuhkan untuk pembuatan
media MS sebanyak 1 liter dapat dilihat pada lampiran 2. Penambahan gula pasir sebanyak 30 gl hendaknya dilakukan sebelum pengenceran, sehingga volume
akhir yang akan dibuat tepat. Komposisi media yang sudah lengkap kemudian dilarutkan dan diencerkan dengan menggunakan air aquades hingga mencapai
volume akhir 1 liter.
3.3.2.3 Pembuatan Media Perlakuan
Untuk merangsang multiplikasi tunas dan pertumbuhan eksplan, ke dalam larutan media MS ditambah sitokinin tunggal berupa AdSO
4,
BAP, kinetin dan thidiazuron dengan taraf konsentrasi sebagai berikut 0,50 mgl; 1,00 mgl; 1,50
mgl dan 2,0 mgl. Penambahan beberapa jenis sitokinin tersebut dilakukan sebelum pengukuran pH yang berkisar antara 5,8. Apabila pH 5,8 dapat
ditambahkan HCl, sedangkan jika pH 5,8 dapat NaOH. Tambahkan agar-agar 8 gl ke dalam larutan dan selanjutnya diaduk menggunakan magnetik stirer.
Larutan tersebut ditutup dengan menggunakan plastik wrap yang diberi lubang untuk proses pemasakan menggunakan microwave. Media perlakuan yang
telah mendidih, dituang ke dalam tabung kultur ± 10 mltabung untuk seluruh perlakuan, kemudian ditutup dan disterilisasi menggunakan autoclave dengan
temperatur 121
o
C dan tekanan 17,5 psi selama 15 menit.
3.3.3 Penanaman
