Metode pemeriksaan aktivitas katalitik NAG dalam urin

menyebutkan bahwa NAG dapat menjadi nilai diagnosis pada deteksi awal perjalanan penyakit glomerulus namun tidak pada pasien yang sudah terbukti menderita gangguan fungsi ginjal. 28 Di Korea penelitian terhadap pasien dengan penyakit glomerulus termasuk sindrom nefrotik melaporkan terdapat korelasi negatif antara eksresi NAG urin dan protein urin, namun terdapat korelasi laju filtrasi glomerulus dengan kadar NAG urin. 29 Sebuah penelitian terhadap binatang mengatakan penggunaan NAG urin dapat mengukur perubahan fungsi tubulus renal namun bukanlah indikator berapa banyak kerusakan yang telah terjadi. 30

2.6 Metode pemeriksaan aktivitas katalitik NAG dalam urin

Evaluasi NAG urin diperiksa pada sampel urin pagi hari, walaupun diperbolehkan pada sampel sewaktu. NAG stabil pada perubahan suhu ,pH dan terhadap inhibitor endogenous seperti asam askorbat dan urea yang dapat di eliminasi dengan mudah. NAG dapat disimpan pada suhu 2 – 8 C dalam kulkas bagian chiller selama seminggu dan pada pendingin bersuhu - 20 C dapat tahan selama 1 bulan. 22 Prosedur pemeriksaan kolorimetrik yang canggih berdasarkan penggunaan 2-methoxy-4-2-nitrovinyl-phenyl-N-Acetyl- β-D-Glucosaminide dan m-cresolsulphon phthaleinyl-N-Acetyl- β-D-Glucosaminide sebagai substrat. Pada metode ini warna urin tidak mempengaruhi pemeriksaan. 9 Universitas Sumatera Utara Prinsip pemeriksaan ini adalah m-cresol sulphonphthaleinyl-N-Acetyl- β-D- Glucosaminide, garam Natrium, dihidrolisa N-acetyl- β-D-Glucosaminidase NAG dengan melepaskan 3-cresolsulfonphtalein, garam Natrium 3-cresol- purple yang diukur dengan fotometrik pada 580 nm. 31,32 m-cresolsulphonphthaleinyl-N-Acetyl- β-D-Glucosaminide NAG 3-cresolsulfonphtalein + N-Acetyl-Glucosaminide Gambar 2.2 Prinsip kerja metode fotometrik 32 Kadar NAG urin diekspresikan dengan rasio NAG terhadap kreatinin, karena hubungan ini menunjukkan kecilnya variabel dibandingkan eksresi urin enzim terhadap waktu dan volume. Rasio ini dianjurkan sehingga dapat mengurangi jumlah sampel urin, dengan data kreatinin ini maka tidak memerlukan urin 24 jam. 33 Berdasarkan data bahwa rasio NAG urin kreatinin urin berubah berdasarkan umur sebagai akibat dari konsentrasi kreatinin dan adanya variabel individual maka digunakan standar deviasi pada tiap kelompok umur sebagai referensi nilai normal. 31,34 Universitas Sumatera Utara Aktivitas NAG urin umumnya diekspresikan dalam micromole hydrolyzed substrate per menit per milimole kreatinine μmolmmol namun terkadang dalam micromole hydrolyzed substrate per menit per mililiter urin μmolml dan unit internasionalmilimol Ummol. 8 Satuan nkat melambangkan kuantitas aktivitas enzim sebagai kecepatan reaksi substrat yang dikatalisis enzim. Adapun konversi dari nkat aktivitas katalitik enzim ke mikromol μmol dan satuan internasional U adalah: 1 U = 1μmolmenit = 10 -6 molmenit = 110 6 x 60 moldetik = 16.67 nmoldetik = 16.67 nkat. 35 Untuk lebih mudah nya konversi satuan nkat menjadi U adalah dengan mengalikan nkat dengan 0.06. Tabel 2.2. Nilai rujukan NAGkreatinine urin 31,3 Umurtahun 4 Kadar NAG urin dalam nkatmmol SD Kadar NAG urin dalam Ug 0 - 0.08 53.4435.69 29 0.08 - 1 20.2813.06 11.06 1 - 3 6.193.75 3.38 3 - 6 4.532.22 2.47 10 - 18 3.321.96 1.81 Universitas Sumatera Utara

2.7 Kerangka Konseptual