Landasan Teori PENELAAHAN PUSTAKA

d. Variabel pengacau tidak terkendali Variabel pengacau yang tidak dapat dikendalikan adalah kondisi patologis tikus.

2. Definisi operasional

a. Ekstrak etanol-air daun M. tanarius Ekstrak daun M. tanarius adalah ekstrak kental yang diperoleh dengan mengekstraksi serbuk kering daun M. tanarius seberat 10,0 gram yang dilarutkan dalam 100 ml pelarut etanol 50 secara maserasi selama 72 jam, dengan putaran 140 rpm. Kemudian disaring dengan kertas saring dan diuapkan di oven selama 24 jam pada suhu 50 o C, hingga bobot pengeringan tetap dengan susut pengeringan sebesar 0. b. Efek hepatoprotektif Efek hepatoprotektif adalah kemampuan ekstrak etanol-air daun M. tanarius dengan dosis tertentu untuk melindungi hati dari hepatotoksin yang diukur dengan aktivitas enzim ALT dan AST. c. Praperlakuan jangka panjang Praperlakuan jangka panjang dalam penelitian ini dilakukan dengan pemberian ekstrak etanol-air satu kali sehari dalam jangka waktu 6 hari berturut-turut.

C. Bahan Penelitian 1. Bahan utama

a. Bahan uji yang digunakan yaitu daun M. tanarius yang dipanen dari kebun obat Fakultas Farmasi USD Yogyakarta pada bulan Mei 2012. b. Subyek uji yang digunakan yaitu tikus jantan putih galur Wistar usia 2-3 bulan, berat badan 150-250 gram yang diperoleh dari Laboratorium Imono Fakultas Farmasi USD Yogyakarta.

2. Bahan kimia

a. Bahan hepatotoksin yang digunakan adalah CCl 4 PT. MERCK, yang diperoleh dari Laboratorium Kimia Organik Fakultas Farmasi USD Yogyakarta. b. Pelarut ekstrak yang digunakan adalah etanol PT. MERCK dan air suling yang diperoleh dari Laboratorium Farmakognosi Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. c. Bahan pensuspensi ekstrak berupa serbuk CMC-Na 1 berwarna putih, terdispersi dalam air yang diperoleh dari Laboratorium Biofarmasetika- Bioanalisis Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. d. Aquadest dan aquabidest yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi-Toksikologi Fakultas Farmasi USD Yogyakarta. e. Bahan pelarut untuk hepatotoksin CCl 4 berupa olive oil Bertolli ® . f. Kontrol serum ALT-AST Cobas ® PreciControl ClinChem Multi 2 RocheHitachi analyzer. g. Bahan untuk mengukur aktivitas serum ALT dan AST berupa kit-ALAT GPT FS dan kit-ASAT GOT FS produksi Dyasis yang diperoleh dari Alfa Kimia Yogyakarta. Masing- masing bahan terdiri atas dua reagen yaitu Reagen 1 dan Reagen 2. Kit-ALAT GPT FS : R1: TRIS pH 7.15 140 mmolL L-Alanine 700 mmolL LDH Lactate dehydrogenase ≥ 2300 UL R2: 2-Oxoglutarate 85 mmolL NADH 1 mmolL Pyridoxal-5-phosphate FS : Good’s buffer pH 9.6 100 mmolL Kit-ASAT GOT FS : R1: TRIS pH 7.65 110 mmolL L-Aspartate 320 mmolL MDH Malate dehydrogenase ≥ 800 UL LDH Lactate dehydrogenase ≥ 1200 UL R2: 2-Oxoglutarate 65 mmolL NADH 1 mmolL Pyridoxal-5-phosphate FS : Good’s buffer pH 9.6 100 mmolL Pyridoxal-5-phosphate 13 mmolL

D. Alat Penelitian 1. Alat pembuatan ekstrak etanol-air daun M. tanarius

Seperangkat alat gelas, yaitu Bekker glass, Erlenmeyer, gelas ukur, labu ukur, cawan porselen, batang pengaduk, mesin penyerbuk Retsch ® , oven, ayakan no. 40, timbangan analitik, rotary vacuum evaporator, dan moisture balance.