31
3.3.2 Ekstraksi Senyawa Bioaktif Atactodea striata Harborne 1987
Ekstraksi dilakukan dengan metode ekstraksi bertingkat yang dimodifikasi. Pelarut yang digunakan adalah heksana non polar, etil asetat semi polar dan
metanol polar. Serbuk kerang mas ngur Atactodea striata ditimbang 50 gr, dimasukkan ke dalam erlenmeyer selanjutnya ditambah pelarut he ksana 100 ml,
ditutup dengan alumunium foil agar pelarut tidak menguap, kemudian dimaserasi selama 24 jam. Setelah itu disaring dengan menggunakan kertas saring. Residu
ditambah pelarut etil asetat 100 ml, ditutup alumunium foil, dimaserasi selama 24 jam, setelah itu disaring dengan menggunakan kertas saring. Residu ditambah
pelarut metanol 100 ml, ditutup alumunium foil, dimaserasi selama 24 jam. Masing-masing filtrat yang dihasilkan, dievaporasi dengan suhu yang sesuai
dengan pelarut yang digunakan ±
40
o
C sampai terbentuk ekstrak yang berupa pasta. Selanjutnya ekstrak dari masing-masing pelarut disebut ekstrak he ksana,
ekstrak etil asetat dan ekstrak metanol. Masing-masing ekstrak yang terbentuk kemudian dicuci dengan menggunakan masing-masing pelarut he ksana, etil
asetat, metanol sebagai berikut : 1 Pelarut heksana ditambahkan pada ekstrak heksana, pelarut etil asetat pada
ekstrak etil asetat, dan pelarut metanol pada ekstrak metanol. Perbandingan volume pelarut dan ekstrak adalah 2 : 1. Selanjutnya campuran dishaker
selama 1 jam dan didiamkan selama 24 jam pada suhu 4
o
C. 2 Bila terdapat endapan maka lapisan atasnya di pipet. Selanjutnya di evaporasi
sampai berbentuk pasta. Ekstrak dilarutkan dengan masing-masing pelarut kemudian didiamkan selama 24 jam pada suhu 4
o
C. Bila masih terdapat endapan maka di pipet lapisan atasnya dan di evaporasi, kemudian
ditambahkan pelarut dan didiamkan 24 jam pada suhu 4
o
C. Proses pencucian ini dilakukan sampai tidak terdapat endapan, dengan demikian ekstrak yang
diperoleh benar-benar telah bebas dari komponen-komponen lain yang ikut pada saat ekstraksi.
Setelah pencucian, masing-masing ekstrak hasil evaporasi dikerok dan dimasukkan ke dalam botol sampel, kemudian disimpan pada suhu 4
°
C. Diagram alir proses ekstraksi bahan aktif kerang mas ngur Atactodea striata dapat
dilihat pada Gambar 8.
32
Atactodea striata
Gambar 8 Diagram alir proses ekstraksi bahan akti f dari Atactodea striata
3.3.3 Uji Inhibitor Topoisomerase I TopoGen 2006